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1、人胎盤羊膜上皮細(xì)胞的分離鑒定及多向誘導(dǎo)分化_圖文中國組織工程研究第21卷第9期2017–03–28出版ChineseJournalofTissueEngineeringResearchMarch28,2017Vol.21,No.9www.CRTER.org人胎盤羊膜上皮細(xì)胞的分離鑒定及多向誘導(dǎo)分化，27·研究原著·李萍12，王久存1，陸瑤2，許惠利2(1上海復(fù)旦大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院現(xiàn)代人類學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上海市200433；2上海市干細(xì)胞技術(shù)有限公司，上海市200051)引用本文：李萍，王久存，陸瑤，許惠利.人胎盤羊膜上皮細(xì)胞的分離鑒定及多向
2、誘導(dǎo)分化[J].中國組織工程研究，2017，21(9):1420-1425.DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.2017.09.020ORCID:0000-0001-9713-3915(李萍)文章快速閱讀：文題釋義：人羊膜來源干細(xì)胞：包括人羊膜上皮細(xì)胞、人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞，表達(dá)多種干細(xì)胞標(biāo)記物，具有較全面的多分化潛能，并且因具有“無致瘤性、免疫原性低、安全性高”等諸多胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞所不具備的優(yōu)勢和特點(diǎn)。27人羊膜上皮細(xì)胞：具有表達(dá)多種胚胎干細(xì)胞標(biāo)記物的特點(diǎn)和較全面的多向分化潛能，隨后Miki等研究證實(shí)了其向3胚層
3、分化的潛能，除表達(dá)胚胎干細(xì)胞表面抗原SSSEA-3和SSSEA-4，腫瘤抗性基因TRA1-60和TRA1-81之外，近來發(fā)現(xiàn)人羊膜上皮細(xì)胞還表達(dá)多潛能干細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄因子，例如Oct-4、Sox-2、Nanog和REX-1等及其他抗原，不表達(dá)CD34、SSSEA-1、CD133，弱表達(dá)c-kit(CD117)和CC趨化因子受體(CRR4)。摘要背景：人羊膜上皮細(xì)胞來源穩(wěn)定，正逐漸成為廣受關(guān)注的再生醫(yī)學(xué)種子細(xì)胞來源。目的：建立人羊膜上皮細(xì)胞體外分離培養(yǎng)、成脂、成軟骨、成骨誘導(dǎo)分化的方法。方法：通過胰蛋白酶消化法從人胎盤羊膜中分離羊膜上皮細(xì)胞，進(jìn)行體
4、外培養(yǎng)與鑒定，觀察培養(yǎng)12d內(nèi)的細(xì)胞生長曲線。取P1代羊膜上皮細(xì)胞，分別進(jìn)行成脂、成軟骨、成骨誘導(dǎo)，以常規(guī)培養(yǎng)細(xì)胞為對照，誘導(dǎo)16d后，分別進(jìn)行油紅O染色、Masson染色及堿性磷酸酶染色，同時采用熒光定量PCR檢測誘導(dǎo)過程中成脂轉(zhuǎn)錄因子、Ⅱ27型膠原蛋白、骨橋蛋白、堿性磷酸酶mRNA表達(dá)變化。結(jié)果與結(jié)論：①從人羊膜中分離出的羊膜上皮細(xì)胞，免疫熒光檢測表達(dá)上皮細(xì)胞標(biāo)記物CK19；②P1代細(xì)胞具有較強(qiáng)的分裂增殖能力，P2細(xì)胞與P1相比增殖能力略有下降，P3細(xì)胞增殖能力最差；③羊膜上皮細(xì)胞經(jīng)成脂、成軟骨、成骨誘導(dǎo)后，油紅O染色有紅色脂滴，Mass
5、on染色有亮藍(lán)色軟骨基質(zhì)，堿性磷酸酶染色有紅褐色鈣結(jié)節(jié)；隨著誘導(dǎo)時間的延長，成脂轉(zhuǎn)錄因子、Ⅱ型膠原蛋白、骨橋蛋白、堿性磷酸酶表達(dá)量升高；④結(jié)果表明，采用酶消化法可從人羊膜中分離得到羊膜上皮細(xì)胞，羊膜上皮細(xì)胞可向脂肪細(xì)胞、成軟骨細(xì)胞、成骨細(xì)胞分化。關(guān)鍵詞：干細(xì)胞；分化；羊膜上皮細(xì)胞；誘導(dǎo)分化；成脂細(xì)胞；成骨細(xì)胞；成軟骨細(xì)胞主題詞：羊膜；上皮細(xì)胞；成脂分化；組織工程Humanamnioticepithelialcells:isolation,identificationandmulti-directionaldifferentiation27Li
6、Ping1,2,WangJiu-cun1,LuYao2,XuHui-li2(1MinistryofEducationKeyLaboratoryofContemporaryAnthropology,LifeScienceInstitute,FudanUniversity,Shanghai200433,China;2ShanghaiStemCellTechnologyCo.,Ltd.,Shanghai200051,China)AbstractBACKGROUND:Humanplacentaisastablesourceforhumanamniot
7、icepithelialcells,whichisbecomingacellsourceintheregenerativemedicinethatattractswidespreadattentions.OBJECTIVE:Toestablishthemethodofisolation,culture,andadipogenic,chondricandosteogenicdifferentiationofhumanamnioticepithelialcells.1420P.O.Box10002,Shenyang27李萍，女，1986年生，安徽
8、省合肥市人，漢族，2009年華東師范大學(xué)畢業(yè)，復(fù)旦大學(xué)在讀碩士，主要從事免疫學(xué)、干細(xì)胞方面的研究。中圖分類號:R394.2文獻(xiàn)標(biāo)識碼:B文章編號:2095-4344
