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1、香菇多糖的提取純化方法呂紅常秀蓮*(煙臺(tái)大學(xué)生命科學(xué)院,煙臺(tái)264005)摘要:香菇多糖是香菇中分離出的一種重要的具有生理活性的物質(zhì),具有抗病毒、抗腫瘤、增強(qiáng)人體免疫力等多種功能,在保健食品和藥品開(kāi)發(fā)方面具有廣闊的應(yīng)用前景。概括介紹當(dāng)前常用的熱水浸提法、酶解法、微波提取法和深層發(fā)酵培養(yǎng)法等6種香菇多糖的提取方法。并簡(jiǎn)單比較香菇多糖提取的這幾種方法并介紹了超濾-滲濾法和活性炭聯(lián)合陶瓷膜超濾法這兩種香菇多糖的純化方法。關(guān)鍵詞:香菇多糖;提取;純化;抗癌;抗病毒ExtractionandpurificationofLentinanLvhongchangxiulian*(Yantaiunive
2、rsitylifeacademyofsciences,Yantai26005)Abstract:Lentinanwasisolatedfrommushroomswithanimportantphysiologicalactivityofsubstanceswithanti-virus,anti-cancer,enhanceimmunityandotherfunctions.Ithasbroadapplicationprospectsinhealthfoodanddrug’sdevelopment.Giveoverviewofthecurrentformulationusedinhotw
3、ater,enzymaticmethod,microwaveextractionanddeepfermentationmethod6kindsofmushroompolysaccharidesmethod,AndIntroducedtheUltrafiltration-filtrationmethodandtheActivatedcarbonceramicmembranejointultrafiltrationmethodofLentinanpurification.Keywords:Mushroompolysaccharide;Separation;cancer;antiviral1
4、引言香菇多糖(Lentinan)是一種β-1,3-葡聚糖,是從擔(dān)子菌綱傘菌科真菌香菇子實(shí)體中提取分離純化獲得的均一組分的多糖,能治療癌癥,抗惡性腫瘤,抗病毒,抗感染,提高人體免疫力等多種生理功能。目前國(guó)內(nèi)對(duì)香菇多糖的分離有了很大發(fā)展,主要采用的方法有傳統(tǒng)熱水提取法、酸提取法、堿提取法、這些方法都有其優(yōu)點(diǎn),也有其難以克服的不足之處。與傳統(tǒng)方法相比微波輔助提取法具有設(shè)備簡(jiǎn)單,快速,高效,安全等特點(diǎn)。2香菇多糖的提取方法2.1熱水浸提法這是最早采用的一種傳統(tǒng)方法:香菇多糖溶于水,熱水浸提時(shí),香菇組織細(xì)胞膨脹破裂,多糖成分浸出。熱水浸提香菇多糖,浸提時(shí)的料液比、溫度、時(shí)間、pH、醇析時(shí)的乙醇添
5、加倍數(shù)及提取次數(shù)是影響多糖得率的主要因素。對(duì)料液比而言,若加水太少,提取不徹底;加水太多,容易降低提取液的固形物含量,不利于以后的分離,且加重了工業(yè)生產(chǎn)中的后續(xù)工藝,一般為1:20左右。對(duì)溫度來(lái)說(shuō),隨著提取溫度的升高,粗多糖得率逐漸升高,在80%一95%時(shí)達(dá)到高峰,再提高溫度時(shí),粗多糖得率升高趨勢(shì)趨于平緩,考慮到高溫會(huì)破壞多糖的結(jié)構(gòu),影響其生物活性,同時(shí)高溫提取對(duì)工業(yè)化生產(chǎn)的設(shè)備要求更嚴(yán)格。所以,提取溫度一般以80℃一95℃為宜。隨著提取時(shí)間的延長(zhǎng),粗多糖得率逐漸增加,0.5h一3h之間趨勢(shì)明顯,繼續(xù)延長(zhǎng)提取時(shí)間,多糖得率加趨勢(shì)逐漸趨于平緩,一般浸提時(shí)間為8h一12h。熱水浸提時(shí)的pH
6、為自然pH值,大約在6-8之間。而對(duì)醇析時(shí)提取液的乙醇濃度來(lái)說(shuō),隨著其逐漸升高,多糖得率亦逐漸增加,但乙醇濃度達(dá)到75%后再繼續(xù)添加乙醇,對(duì)粗多糖得率的影響不大,所以提取液的乙醇濃度最好不超過(guò)75%。當(dāng)然,提取次數(shù)對(duì)多糖得率也有一定的影響,多糖得率隨著提取次數(shù)的增加而增加,但提取次數(shù)超過(guò)2次后,多糖得率增加緩慢,趨于平緩。我們通??梢源_定2次提取為比較適宜的提取次數(shù)[1]??偟膩?lái)說(shuō),熱水浸提法的最佳提取條件由具體的實(shí)驗(yàn)環(huán)境而定,一般可根據(jù)正交實(shí)驗(yàn)確定。應(yīng)注意幾點(diǎn):(1)浸提過(guò)程必須充分,這是前提。(2)浸提后過(guò)濾時(shí)應(yīng)盡量趁熱過(guò)濾,否則溫度降低,物質(zhì)問(wèn)的黏度增大,過(guò)濾時(shí)間增長(zhǎng)。(3)濃縮
7、過(guò)程受儀器影響較大。一般旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀是一種較好的濃縮裝置。2.2稀酸(堿)浸提法從香菇中提取多糖的提取劑有:酸液、堿液、酶及熱水等,提取劑為酸(堿)時(shí),即所謂的酸(堿)提取法。該法提取香菇多糖也受多方面因素的影響:酸(堿)溶液的濃度、作用時(shí)間等。一般情況下,0.4mol/L的HC1溶液在40℃一60℃范圍內(nèi),多糖得率較高[2]。需注意,香菇多糖的提取應(yīng)避免在強(qiáng)酸、強(qiáng)堿溶液中進(jìn)行,否則極易造成香菇多糖中糖苷鍵斷裂及構(gòu)象變化而形成較多單糖,影響多糖得