電泳技術(shù)在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用

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1、農(nóng)業(yè)儀器權(quán)威門(mén)戶http://www.zgny17.com/電泳技術(shù)在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用自從1946年瑞典物理化學(xué)家Tiselius教授研制的第一臺(tái)商品化移界電泳系統(tǒng)問(wèn)世以來(lái),在近半個(gè)多世紀(jì)的時(shí)間里,電泳技術(shù)發(fā)展極其迅速?；陔娪驹淼母鞣N儀器設(shè)備不斷問(wèn)世,特別是20世紀(jì)80年代后,?許多自動(dòng)化電泳儀器相繼為臨床實(shí)驗(yàn)室所采用,電泳技術(shù)已成為基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)研究的重要工具之一。?目前,該技術(shù)已廣泛用于蛋白質(zhì)、多肽、氨基酸、核苷酸、有機(jī)物、無(wú)機(jī)離子等的分離和鑒定,甚至病毒與細(xì)胞的研究。特別是電泳所用支持介質(zhì)由流動(dòng)相改為固相支持物后,各種各樣的電泳分析裝置不

2、斷推出以適應(yīng)不同教學(xué)、臨床和科研工作的需要。當(dāng)今,電泳技術(shù)與質(zhì)譜技術(shù)聯(lián)用在后基因組學(xué)研究中,正發(fā)揮者著巨大的作用,為臨床檢驗(yàn)的發(fā)展帶來(lái)新的生機(jī)與活力。?一、電泳分析儀??????電泳分析儀可分為兩大類:臨床實(shí)驗(yàn)室常規(guī)類,如全自動(dòng)熒光/可見(jiàn)光雙系統(tǒng)電泳儀、全自動(dòng)醋纖膜電泳儀、全自動(dòng)瓊脂糖電泳儀和全自動(dòng)瓊脂糖電泳儀;科研為主兼做臨床樣本類,如雙向電泳及雙向電泳2液相色譜2質(zhì)譜聯(lián)用、高效毛細(xì)管電泳及高效毛細(xì)管電泳2質(zhì)譜聯(lián)用、高效毛細(xì)管芯片電泳、DNA測(cè)序系統(tǒng)。1.?全自動(dòng)熒光/可見(jiàn)光雙系統(tǒng)電泳儀:具有熒光/可見(jiàn)光雙系統(tǒng),在使用熒光試劑項(xiàng)目如肌酸激酶(CK

3、)?、乳酸脫氫酶(LD)同工酶時(shí)為全自動(dòng)。只需將樣品、試劑、瓊脂糖凝膠電泳膠片放好后,操作人員可離機(jī)完成試驗(yàn)并得到結(jié)果,此為全自動(dòng)電泳儀。但是使用可見(jiàn)光項(xiàng)目如蛋白電泳,中途人員需返回,將電泳膠片由電泳槽放入染色系統(tǒng)中才可完成試驗(yàn)。而最大優(yōu)點(diǎn)是熒光系統(tǒng)全自動(dòng)且靈敏度高,準(zhǔn)確度高并且采用高壓、低溫系統(tǒng),只需要20?min即可完成電泳分析,速度非?？?。?地址：杭州市西湖科技園西園八路11號(hào)聯(lián)系電話：0571-81953317http://www.zgny17.com/農(nóng)業(yè)儀器權(quán)威門(mén)戶http://www.zgny17.com/2.?全自動(dòng)醋纖膜電泳儀:為

4、可見(jiàn)光單系統(tǒng),使用醋纖膜電泳片。自動(dòng)化程度高,只需將樣品、試劑、電泳片放好,人員可離機(jī)完成試驗(yàn)得到結(jié)果。但是因?yàn)槭褂么桌w膜致使靈敏度低,無(wú)法分析尿蛋白/腦脊液蛋白,對(duì)同工酶分析效果也不理想,多半實(shí)驗(yàn)室只用于血清蛋白電泳分析。3.?全自動(dòng)瓊脂糖電泳儀:為可見(jiàn)光單系統(tǒng),使用瓊脂糖凝膠電泳膠片。優(yōu)點(diǎn)為靈敏度高,可使用于低濃度蛋白檢驗(yàn),如尿蛋白及腦脊液蛋白。而同工酶的分離效果也相當(dāng)不錯(cuò)。但缺點(diǎn)為自動(dòng)化程度較差,當(dāng)電泳結(jié)束和染色脫色完成后,工作人員必須將電泳片由機(jī)器中取出,對(duì)實(shí)驗(yàn)室較為麻煩。但是因?yàn)檫@類儀器所能做項(xiàng)目比較多,且靈敏度較高仍為許多實(shí)驗(yàn)室所接受。

5、4.?全自動(dòng)電泳分析系統(tǒng):集上述儀器的優(yōu)點(diǎn),自動(dòng)點(diǎn)樣、電泳、呈色(或染色、脫色)?、烘干?？捎酶鞣N電泳片,包括瓊脂片、醋酸片、聚丙烯酰胺等,采用可見(jiàn)光及熒光呈色雙系統(tǒng),是一種較理想的電泳儀。5.?雙向電泳及雙向電泳2液相色譜2質(zhì)譜聯(lián)用:雙向電泳第一向?yàn)榈入娋劢?第二向?yàn)樘荻仁榛撬徕c(?SDS)電泳。樣品經(jīng)過(guò)電荷與質(zhì)量?jī)纱畏蛛x后可得到分子的等電點(diǎn)、分子量等信息,這是目前所有電泳技術(shù)中分辨率最高,信息量最多的技術(shù),已成為分析復(fù)雜蛋白混合物的基本工具。自1975年,O′Farrel等建立這種技術(shù)后,已有許多改進(jìn),使得這一技術(shù)日趨完善。ISO2DAL

6、T系統(tǒng)的第一向是用管狀凝膠,雖然分辨率高、上樣量大、耐高鹽等優(yōu)點(diǎn),但有陰極漂移而丟失堿性蛋白、載體兩性電解質(zhì)pH梯度不穩(wěn)定、受電場(chǎng)和時(shí)間影響而重復(fù)性不好等缺點(diǎn)。20世紀(jì)80年代后期,?Gorg等將固相pH梯度等電聚焦技術(shù)用作雙向電泳的第一向,稱為IPG2DALT。固相pH梯度等電聚焦沒(méi)有陰極漂移,?pH梯度穩(wěn)定,分辨率高,重復(fù)性好,是目前流行的雙向電泳技術(shù)。與傳統(tǒng)的單向電泳方法最多只能分析100種蛋白質(zhì)樣品相比,雙向電泳最多可分析5?000?～?10?000個(gè)蛋白點(diǎn)的圖譜。雙向電泳在分離蛋白混合樣品,比較差異方面有不可替代的作用。當(dāng)發(fā)現(xiàn)新的蛋白點(diǎn)時(shí)

7、,將其切下再用液相色譜分離,與質(zhì)譜聯(lián)用,最后可鑒定新發(fā)現(xiàn)的蛋白質(zhì)組分。?6.?高效毛細(xì)管電泳及高效毛細(xì)管電泳2質(zhì)譜聯(lián)用:高效毛細(xì)管電泳是以彈性石英毛細(xì)管為分離通道,以高壓直流電場(chǎng)為推動(dòng)力,依據(jù)樣品中各組分之間淌度和分配行為上的差異而實(shí)現(xiàn)分離的電泳分離分析方法。利用毛細(xì)管代替平板凝膠,分離效率得以提高。高效毛細(xì)管電泳的應(yīng)用范圍從小分子、無(wú)機(jī)離子到生物大分子,甚至整個(gè)細(xì)胞,從帶電粒子到中性分子都可用高效毛細(xì)管電泳方法進(jìn)行分析。目前,毛細(xì)管與質(zhì)譜的接口難題已經(jīng)解決,人們能利用毛細(xì)管電泳的高效分離能力與質(zhì)譜的鑒定技術(shù)聯(lián)用發(fā)揮其特殊功能,發(fā)現(xiàn)未知的化合物。尤

8、其是陣列毛細(xì)管電泳儀已經(jīng)問(wèn)世,這將克服目前大多數(shù)商品化毛細(xì)管電泳儀只能進(jìn)行單根毛細(xì)管電泳的缺陷,這種高通量的新方法將會(huì)給后