兔膈神經(jīng)和膈肌的傳出放電(申f)

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1、實(shí)驗(yàn)十八、兔膈神經(jīng)和膈肌的傳出放電【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹坑秒跎窠?jīng)與膈肌放電作為觀察呼吸運(yùn)動(dòng)的指標(biāo)，加深對(duì)節(jié)律性呼吸運(yùn)動(dòng)的中樞起源和外界環(huán)境改變對(duì)呼吸運(yùn)動(dòng)的反射性調(diào)節(jié)作用的認(rèn)識(shí)?！緦?shí)驗(yàn)原理】腦干呼吸中樞的節(jié)律性沖動(dòng)發(fā)放，通過(guò)脊髓的膈神經(jīng)及肋間神經(jīng)下行傳導(dǎo)到膈肌與肋間肌，從而產(chǎn)生節(jié)律性的呼吸運(yùn)動(dòng)。因此，引導(dǎo)膈神經(jīng)傳出纖維的放電和膈肌的放電，可直接反映腦干呼吸中樞的活動(dòng)。同時(shí)，膈神經(jīng)與膈肌放電活動(dòng)的變化也能反映體內(nèi)外各種刺激對(duì)呼吸運(yùn)動(dòng)的反射性影響。【實(shí)驗(yàn)對(duì)象】家兔【實(shí)驗(yàn)器材】哺乳動(dòng)物手術(shù)器械、兔解剖臺(tái)、20％氨基甲

2、酸乙酯、20ml注射器、約1m長(zhǎng)內(nèi)徑0.7cm橡皮管一根、CO2氣囊、N2氣囊、0.9％氯化鈉生理鹽水、監(jiān)聽器、引導(dǎo)電極支架、刺激電極及相連的刺激線、BL－410生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)?！緦?shí)驗(yàn)步驟】1.手術(shù)(1)麻醉、固定動(dòng)物及氣管插管同前。(2)分離雙側(cè)迷走神經(jīng)并各穿一細(xì)線打松結(jié)備用。(3)分離膈神經(jīng)。兔膈神經(jīng)主要由頸2～4脊神經(jīng)的腹支匯合而成，位于頸總動(dòng)脈神經(jīng)束的后外側(cè)。先將動(dòng)物頭頸盡量偏向?qū)?cè)，用止血鉗在術(shù)側(cè)頸外靜脈與胸鎖乳突肌之間向深處分離直到脊柱肌，透過(guò)脊柱表面之淺筋膜，即可見到粗大橫行的臂叢神

3、經(jīng)，由頸2～4脊神經(jīng)分出的分支—－膈神經(jīng)，其如細(xì)絲線粗細(xì)、貼在前斜角肌腹緣表面，與氣管呈平行走向入胸腔。用止血鉗或玻璃分針挑破淺筋膜，分離出長(zhǎng)約1.5～2cm一小段膈神經(jīng)，以溫生理鹽水棉球覆蓋保護(hù)。分離過(guò)程中，若感覺(jué)胸鎖乳突肌有礙于神經(jīng)的暴露，可在該肌肉的中部結(jié)扎、剪斷。(4)暴露膈肌并安置記錄電極。在上腹部正中找到劍突所在部位，在劍突下方3～4cm的地方依次剪去皮膚，沿腹白線在劍突下剪3～4cm切口，打開腹腔，用止血鉗夾持劍突尖部并向動(dòng)物頭端3翻轉(zhuǎn)劍突，在劍突內(nèi)表面可見貼附的膈肌，將兩根刺激電極平

4、行插入膈肌，恢復(fù)劍突至原位。(5)安放引導(dǎo)電極。將引導(dǎo)電極支架置于適當(dāng)?shù)奈恢?，用玻璃分針輕輕挑起膈神經(jīng)放在電極上，稍稍提高電極，使之懸空與周圍組織脫離接觸，但切不可將神經(jīng)拉得過(guò)緊，防止損傷。接地電極置于皮膚切口，隨儀器并聯(lián)接地。2.實(shí)驗(yàn)觀察(1)BL-410操作：打開電腦，進(jìn)入BL-410生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)，1通道選擇神經(jīng)放電，2通道選擇肌電，點(diǎn)擊開始按鈕后，屏幕上可以同步觀察到與吸氣運(yùn)動(dòng)同步的膈神經(jīng)和膈肌周期性群集電位圖形，同時(shí)，監(jiān)聽器發(fā)出與之同步的放電聲音，并觀察到動(dòng)物同步的吸氣運(yùn)動(dòng)。(2)于一側(cè)

5、氣管插管上連接長(zhǎng)橡皮管，待放電活動(dòng)穩(wěn)定后，堵住插管的另一側(cè)開口約1分鐘，觀察解剖無(wú)效腔明顯增加時(shí)，膈神經(jīng)和膈肌放電的變化。(3)通過(guò)氣管插管向氣管內(nèi)緩慢注入CO2，觀察吸入氣中CO2濃度增加時(shí)膈神經(jīng)和膈肌放電的變化。(4)通過(guò)氣管插管向氣管內(nèi)緩慢注入N2氣，使吸入氣中N2濃度顯著降低時(shí)，記錄膈神經(jīng)和膈肌放電的變化。(5)肺牽張反射作用的分析1)在氣管插管的兩個(gè)管口各接一小段橡皮管，將預(yù)先已經(jīng)抽取20ml空氣的注射器緊密連接在一側(cè)橡皮管上，瞄準(zhǔn)吸氣末，在堵住插管另一側(cè)橡皮管口的同時(shí)，迅速向氣管內(nèi)注入2

6、0ml空氣，維持這個(gè)姿勢(shì)不動(dòng)持續(xù)幾秒鐘，使肺處于擴(kuò)張狀態(tài)，觀察膈神經(jīng)和膈肌放電的變化。2)動(dòng)物恢復(fù)平靜呼吸后，瞄準(zhǔn)呼氣之末，重新堵住氣管插管的一側(cè)，另外一側(cè)管口連接注射器迅速抽出20ml空氣，抽完后不拔出注射器持續(xù)幾秒鐘，使肺處于萎陷狀態(tài)，觀察膈神經(jīng)和膈肌放電的變化。(6)先切斷一側(cè)迷走神經(jīng)，然后再切斷另外一側(cè)迷走神經(jīng)，觀察膈神經(jīng)和膈肌放電的變化。(7)重復(fù)上述（1）、（2）、（3）、（4）的內(nèi)容，對(duì)比其結(jié)果有何不同。【實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)】1.3分離膈神經(jīng)時(shí)，盡量避免出血和牽拉神經(jīng)?？梢杂脺厣睇}水浸濕的

7、棉花纏繞玻璃分針的尖端來(lái)分離神經(jīng)，沿神經(jīng)走行的方向輕輕游離，不要做垂直方向的牽拉。剛開始分離神經(jīng)時(shí)，應(yīng)盡量靠膈肌段分離，以備萬(wàn)一神經(jīng)損傷，還可以向中樞段延續(xù)分離一段使用。2.暴露膈肌的手術(shù)操作中，腹部的切口不要開得太大，以免腹腔臟器從破口處出來(lái)。另外，切口向頭端延伸過(guò)程中注意不要剪破膈肌造成氣胸。3.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，注意保持神經(jīng)、肌肉的濕潤(rùn)和保溫，氣溫低的天氣應(yīng)開空調(diào)。4.每次處理前后要有對(duì)照，應(yīng)待動(dòng)物呼吸平穩(wěn)后才能開始做下一步實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目?！舅伎碱}】1.實(shí)驗(yàn)中動(dòng)物吸入高濃度的二氧化碳后，可能引起呼吸產(chǎn)生怎

8、樣的改變？它產(chǎn)生的機(jī)制是什么？可能興奮的化學(xué)感受器是哪一個(gè)？2.切斷迷走神經(jīng)以后牽張反射消失的原因是什么？(申晶晶)3