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《pdx-1促進大鼠骨髓間質(zhì)干細胞體外分化為胰島素分泌細胞》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、PDX-1促進大鼠骨髓間質(zhì)干細胞體外分化為胰島素分泌細胞作者：盧克良 鐘延美 趙鈞慧 申志新 孫吉平【摘要】目的：研究胰腺十二指腸同源框-1（pancreaticduodenalhomeobox-1，PDX-1）基因在骨髓間質(zhì)干細胞（mesenchymalstemcells，MSCs）體外分化中的作用。方法：構(gòu)建含有PDX-1基因的真核表達載體，轉(zhuǎn)染介質(zhì)Superfect介導(dǎo)重組載體轉(zhuǎn)染MSCs，G418篩選陽性細胞后對轉(zhuǎn)染組（PDX-1＋MSCs）和未轉(zhuǎn)染組（PDX-1-MSCs）均體外進行誘導(dǎo)分化，流式細胞儀檢測胰島素陽性細胞的比例，胰島素ELISA試劑盒測定轉(zhuǎn)染組誘導(dǎo)后細胞的胰島
2、素分泌功能。結(jié)果：限制性酶切分析和序列測定證實成功構(gòu)建了含有PDX-1基因的真核表達載體，熒光顯微鏡觀察證實Superfect高效介導(dǎo)重組載體轉(zhuǎn)染MSCs；流式細胞儀發(fā)現(xiàn)PDX-1＋MSCs分化為胰島素分泌細胞的數(shù)量較PDX-1－MSCs明顯增多（陽性率分別為28.23％±2.56％和7.08％±2.69％），25mmol高濃度葡萄糖刺激的胰島素分泌量（115.29±2.56μU/mL）較5mmol低濃度葡萄糖刺激的分泌量明顯增高（56.61±4.82μU/mL）。結(jié)論：PDX-1能增強大鼠MSCs體外分化為功能性胰島素分泌細胞的能力，對開展胰島移植治療1型糖尿病有重要價值。【關(guān)鍵詞】
3、間質(zhì)干細胞·胰腺十二指腸同源框-1·干細胞移植·糖尿病，1型15【ABSTRACT】Objective:Toinvestigatethepossibleeffectsofpancreaticduodenalhomeobox-1（PDX-1）expressionintransdifferentiationofbonemarrowmesenchymalstemcells（MSCs）invitro.Methods:TheeukaryoticexpressionvectorcontainingPDX-1wasconstructed.ThevectorwastransfectedintoMSCs
4、usingSuperfect,G418wasusedtoselectthepositivecells.PDX-1＋MSCsandPDX-1-MSCswereinducedtotransdifferentiationinvitro,theproportionofinsulin-producingcellswasdetectedbyflowcytometry.InsulinsecretionfunctionofPDX-1＋MSCswasmeasuredbyELISA.Results:Restrictedenzymeanalysisandsequencingshowedthatinteres
5、tgenesegmentwasconsistentwiththatinGeneBank.RecombinationvectorwaseffectivetransformedintoMSCsdemonstratedbyfluorescencemicroscope;insulin-producingcellsfromPDX-1＋MSCswereincreased（28.23%±2.56%and7.08%±2.69%respectively）;insulinsecretionofPDX-1＋MSCschallengedbyglucosein25mmolexceededthatin5mmol（
6、115.29±2.56μU/mLand56.61±4.82μU/mLrespectively）.Conclusion:PDX-1canpromoteadultratMSCstotransdifferentiateintoinsulin-secretingcellsinvitro.15【KEYWORDS】Mesenchymalstemcells·Pancreaticduodenalhomeobox-1·Stemcelltransplantation·Diabetesmellitus，type1 自身免疫性糖尿病又稱為胰島素依賴型糖尿?。?型糖尿?。?，約占全部糖尿病患者的10%，其本質(zhì)是
7、胰島β細胞受到細胞介導(dǎo)的自身免疫性破壞而喪失合成和分泌胰島素的能力。在北美和歐洲，兒童及青少年的平均發(fā)病率為0.2％，占所有青少年糖尿病總數(shù)的80％［1］。胰島移植是治療1型糖尿病的有效方法之一，而很多因素限制了臨床應(yīng)用：1）必須同時使用免疫抑制劑，但某些免疫抑制劑本身具有致糖尿病效應(yīng)；2）移植后的免疫排斥；3）長期使用免疫抑制劑的致瘤潛能；4）供移植的胰島β細胞數(shù)量不足等［2］。因此，尋找新的β細胞來源勢在必行。 骨髓間質(zhì)干細胞（mesen
