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1、兩種不同檢測方法測定血清鈣離子的比較【摘要】 為了比較在寧夏彭陽縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科實(shí)驗(yàn)室兩種血清鈣離子檢測方法的分析性能，分別采用恒星科技公司HX-7185K/NA/CL/GA/PHAnalyzer分析儀的離子選擇電極法(簡稱恒星)和上海愛諾電子有限公司MOL—300全自動生化分析儀及配套出品的甲基麝香草酚藍(lán)比色法試劑盒(簡稱愛諾)進(jìn)行測定，比較指標(biāo)為不精密度、線性范圍、抗干擾性、相關(guān)及偏倚。結(jié)果，血清鈣離子濃度在0～3.95mmol/L時，兩家分析儀在本實(shí)驗(yàn)室總的變異系數(shù)(CV)＜5%，檢測線性范圍為0～4.0mmol/L。血紅蛋白＜10
2、g/L、膽紅素＜300mg/L、維生素C＜5g/L，對兩分析方法檢測干擾＜10%，在可接受范圍內(nèi)。甘油三酯(TG)＜20mmol/L時恒星不受影響(干擾＜10%)。愛諾TG＞15mmol/L時低值血清干擾＞10%，高值血清不受干擾。50份血樣進(jìn)行相關(guān)分析的結(jié)果顯示恒星和愛諾測定血清鈣離子的相關(guān)性良好(r=0.98，P＜0.01)。恒星較愛諾測定血清鈣離子結(jié)果偏低，平均偏倚為0.19，線性回歸分析Cusum檢驗(yàn)顯示兩種方法間偏移無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。實(shí)驗(yàn)室溫度變化±5℃恒星測定血清鈣離子結(jié)果不受影響而愛諾受溫度影響較大，對同一份樣本用
3、恒星與愛諾測定血清鈣離子的最小至最大偏差范圍為1.3%～20%，平均為4.1%。本實(shí)驗(yàn)室兩種不同檢測方法測定血清鈣離子的精密度、線性范圍、抗干擾性符合要求?！娟P(guān)鍵詞】血清鈣離子；離子選擇電極法；比色法9 寧夏彭陽縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科實(shí)驗(yàn)室原有一臺恒星科技公司HX-7185K/NA/CL/GA/PHAnalyzer分析儀，現(xiàn)又購買一臺上海愛諾電子有限公司MOL—300全自動生化分析儀，這兩種儀器均能檢測血清鈣，現(xiàn)將儀器及方法進(jìn)行比較?！ ?對象與方法 1．1對象選擇50份不同濃度水平的血清(其中包括高、中、低水平定值質(zhì)控各兩套)標(biāo)本用于相關(guān)性
4、及偏倚分析，并收集高、中、低三個水平的血清鈣混合，以1mL分裝后-20℃儲存，用于不精密度測定。 1.2儀器與試劑恒星科技公司HX-7185K/NA/CL/GA/PHAnalyzer分析儀(定期自動定標(biāo))和上海愛諾電子有限公司MOL—300全自動生化分析儀及配套出品的甲基麝香草酚藍(lán)比色法試劑盒(更換試劑批號時定標(biāo))，用于離子選擇電極法配套校準(zhǔn)品批號035911，035912，035913；用于MOL—300全自動生化分析儀及配套出品的甲基麝香草酚藍(lán)比色法試劑盒的配套校準(zhǔn)品，來源不詳，濃度為0、0.79、1.78、2.37、3.16、3.9
5、5mmol/L。干擾物質(zhì)為血紅蛋白10g/L、膽紅素300mg/L、維生素C95g/L、甘油三酯(TG)20mmol/L?！ ?.3測定原理 1.3.1離子選擇電極法 離子選擇電極是一種化學(xué)傳感器，它能將溶液中的某種離子的活度變成電位信號，然后通過儀器來測量。電極電位隨溶液中離子活度變化的關(guān)系服從Nernst方程，選擇電極的電位與溶液中被測離子活度的對數(shù)成線性關(guān)系。離子選擇電極儀通常采用比較法來測定樣本中的離子鈣和pH值，即先測量兩個已知濃度標(biāo)準(zhǔn)液中的離子鈣和pH的電極電位，在儀器程序內(nèi)建立一條斜率曲線，然后測量樣本中的離子鈣和pH的電
6、極電位，從建立的斜率曲線上求出樣本中的離子鈣和pH，并計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)化離子鈣濃度?！ ?.3.2甲基麝香草酚藍(lán)比色法 血清鈣離子在堿性溶液中與甲基麝香草酚藍(lán)結(jié)合，生成藍(lán)色的絡(luò)合物。加入適當(dāng)?shù)?-羥基喹啉，可消除鎂離子對測定的干擾，與同樣處理的鈣標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行比較，以求得血清總鈣的含量?！ ?.4方法學(xué)評價9參考美國臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(clinicalandlaboratorystandardsinstitute，CLSI)評價方案對試劑、儀器的不精密度、線性、抗干擾性、相關(guān)性及偏倚進(jìn)行評價?！ ?.4.1不精密度 參考EP5—A文件［1］，采
7、用兩種方法對高、中、低三份混合血清，連續(xù)測定10d，每天測定兩批，批間間隔的時間不小于2h，每批對樣品做雙份測定，取均值，計(jì)算批內(nèi)、批間、天間及總不精密度?！ ?.4.2線性實(shí)驗(yàn) 取病人的異常高值血清1份［作為濃度CA1］和正常人血清一份［作為濃度CA5］，取等體積的CA1和CA5干擾混合構(gòu)成濃度3(CA3)，取等體積的CA1和CA3混合構(gòu)成濃度2(CA2)，取等體積的CA3和CA5混合構(gòu)成濃度4(CA4)。5份標(biāo)本隨即排列測定，對每個樣本做雙測定?！ ?.4.3干擾實(shí)驗(yàn)9 在正常人血清中各加一定量的血紅蛋白10g/L、膽紅素300mg
8、/L、維生素C5g/L、TG20mmol/L，干擾物與混合血清按1∶9的比例混合。血紅蛋白干擾濃度為：1、2、4、8、10g/L；膽紅素干擾濃度為：50、100、200、300m
