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1、免疫散射比濁法測(cè)定CRP【關(guān)鍵詞】散射比濁法 ?。壅菽康谋疚膶?duì)比濁法測(cè)定血清CRP(C-反應(yīng)蛋白)進(jìn)行方法學(xué)評(píng)價(jià)。方法采用免疫散射比濁法檢測(cè)100例患者和30例健康正常人血清CRP含量,同時(shí)與乳膠凝集法結(jié)果對(duì)比。結(jié)果批內(nèi)、批間變異系數(shù)分別為1.41%和4.66%,定量檢測(cè)具有滿意的線性響應(yīng)(r=0.987),免疫比濁法陽性率為35%,乳膠法為18%,比濁法陽性率明顯高于乳膠法。結(jié)論本方法的重復(fù)性、準(zhǔn)確性、穩(wěn)定性、特異性均較好,脂血、黃疸無明顯影響,具有較高的臨床推廣價(jià)值。 ?。坳P(guān)鍵詞]散射比濁法;乳膠凝集法;C-反應(yīng)蛋白 Abstract:ObjectiveMethodological
2、evaluationofnephelometrywasperformedinthedetectionofserumCRP.MethodsThelevelsofse-rumCRPin100patientsand30normalsubjectsweredeterminedbytwomethods:nephelometryandlatexagglutinationtest,andtheresultswerecompared.ResultsTheCVvalueofintra-assaysofCRPwas1.41%,andthatofinter-assaysofCRPwas4.66%.Quantifi
3、cationdetectionshowsasatisfactorylinerelation(r=0.987).ThepositiverateofCRPwas35%by6nephelometry,and18%bylatexagglutinationtest.Ahigherpositiveratewasobtainedbynephelometryincomparisonwithlatexlatexagglutinationtest.ConclusionNephelometryisquitegoodinreplication,accura-cy,stability,andspecificity,a
4、ndnotaffectedbylipidandjaundice.Nephelometryisvaluableinclinicalapplication. Keywords:nephelometry;latexagglutinationtest;CRP CRP是一種急性期反應(yīng)蛋白,能激活補(bǔ)體、促進(jìn)吞噬并具有其他的免疫調(diào)控作用。在各種急性和慢性感染、組織損傷、惡性腫瘤、心肌、手術(shù)創(chuàng)傷、放射線損傷等時(shí),CRP在病后數(shù)小時(shí)迅速升高,病變好轉(zhuǎn)時(shí)又迅速降至正常。目前國內(nèi)CRP的檢測(cè)普遍采用膠乳凝集法和免疫擴(kuò)散法,這兩種方法雖然操作簡便,但其重復(fù)性、穩(wěn)定性等較差,陽性率低。國外主要采用ELISA和比濁
5、法進(jìn)行CRP的檢測(cè)。國內(nèi)近年來也逐漸開始采用比濁法對(duì)CRP進(jìn)行定量分析,我們采用半自動(dòng)散射比濁儀檢測(cè)了100例患者和30例健康人血清CRP含量,并同時(shí)與乳膠法進(jìn)行比較分析?! ?材料與方法 1.1儀器和試劑6 半自動(dòng)免疫比濁儀TURBOX(r)PLUS、CRP測(cè)定試劑盒均購自O(shè)RION公司?! ?.2檢測(cè)對(duì)象 體檢健康血清30例,患者100例。測(cè)定CRP含量,并收集患者血清30份混合、分裝、冷凍保存待用?! ?.3檢測(cè)方法 采用散射比濁法,反應(yīng)杯中加入配制好的反應(yīng)液0.5ml(30ml緩沖液加入0.5ml試劑),混合均勻,室溫(20~25℃),反應(yīng)25~35min,免疫散射比濁儀測(cè)
6、定。CRP正常值為小于10mg/ml。乳膠凝集試驗(yàn)按試劑盒說明書操作?! ?.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 用t檢驗(yàn)和χ2檢驗(yàn)對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析?! ?結(jié)果 2.1兩種方法檢測(cè)和結(jié)果比較6 檢測(cè)100例患者血清CRP,比濁法陽性率為35%,乳膠法陽性率為18%,比濁法陽性率高于乳膠法。通過配對(duì)χ2檢驗(yàn)兩種方法檢測(cè)CRP的陽性數(shù)有顯著性差異(P<0.05),30例體檢健康正常人CRP值均小于10mg/ml?! ?.2批內(nèi)、批間精密度檢測(cè) 取混合患者血清一份,作批內(nèi)重復(fù)測(cè)定20次,結(jié)果顯示CV值為1.41%,在儀器所標(biāo)明的范圍內(nèi)(<5%),批間試驗(yàn)每天一次共20次,結(jié)果顯示CV值為4.66%,在
7、儀器標(biāo)明的8%范圍內(nèi)?! ?.3線性關(guān)系評(píng)價(jià) 取患者混合高值血清一份測(cè)定CRP含量,然后作倍比稀釋共5個(gè)稀釋度,結(jié)果表明該方法具有滿意的線性響應(yīng)(r=0.987)?! ?.4干擾試驗(yàn) 脂血(甘油三脂4.51mmol.L和15.7mmol.L)、黃疸(總膽紅素84.3μmol.L和315μmol.L)對(duì)測(cè)定結(jié)果無明顯影響?! ?討論6 傳統(tǒng)的乳膠凝集法檢測(cè)CRP缺乏精確度,樣品的滴度是靠稀釋血清的陽性結(jié)果