免疫散射比濁法測定crp

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1、免疫散射比濁法測定CRP【關(guān)鍵詞】散射比濁法 ?。壅菽康谋疚膶Ρ葷岱y定血清CRP(C-反應(yīng)蛋白)進(jìn)行方法學(xué)評價(jià)。方法采用免疫散射比濁法檢測100例患者和30例健康正常人血清CRP含量,同時(shí)與乳膠凝集法結(jié)果對比。結(jié)果批內(nèi)、批間變異系數(shù)分別為1.41%和4.66%,定量檢測具有滿意的線性響應(yīng)(r=0.987),免疫比濁法陽性率為35%,乳膠法為18%,比濁法陽性率明顯高于乳膠法。結(jié)論本方法的重復(fù)性、準(zhǔn)確性、穩(wěn)定性、特異性均較好,脂血、黃疸無明顯影響,具有較高的臨床推廣價(jià)值?! 。坳P(guān)鍵詞]散射比濁法;乳膠凝集法;C-反應(yīng)蛋白  Abstract:Objec

2、tiveMethodologicalevaluationofnephelometryedinthedetectionofserumCRP.MethodsThelevelsofse-rumCRPin100patientsand30normalsubjectsinedbytethods:nephelometryandlatexagglutinationtest,andtheresultsetry,and18%bylatexagglutinationtest.Ahigherpositiverateetryinparisonetryisquitegoodinrep

3、lication,accura-cy,stability,andspecificity,andnotaffectedbylipidandjaundice.Nephelometryisvaluableinclinicalapplication.  Keyetry;latexagglutinationtest;CRP  CRP是一種急性期反應(yīng)蛋白,能激活補(bǔ)體、促進(jìn)吞噬并具有其他的免疫調(diào)控作用。在各種急性和慢性感染、組織損傷、惡性腫瘤、心肌、手術(shù)創(chuàng)傷、放射線損傷等時(shí),CRP在病后數(shù)小時(shí)迅速升高,病變好轉(zhuǎn)時(shí)又迅速降至正常。目前國內(nèi)CRP的檢測普遍采用膠乳凝集法和免

4、疫擴(kuò)散法,這兩種方法雖然操作簡便,但其重復(fù)性、穩(wěn)定性等較差,陽性率低。國外主要采用ELISA和比濁法進(jìn)行CRP的檢測。國內(nèi)近年來也逐漸開始采用比濁法對CRP進(jìn)行定量分析,我們采用半自動散射比濁儀檢測了100例患者和30例健康人血清CRP含量,并同時(shí)與乳膠法進(jìn)行比較分析。  1材料與方法   1.1儀器和試劑  半自動免疫比濁儀TURBOX(r)PLUS、CRP測定試劑盒均購自O(shè)RION公司?! ?.2檢測對象  體檢健康血清30例,患者100例。測定CRP含量,并收集患者血清30份混合、分裝、冷凍保存待用?! ?.3檢測方法  采用散射比濁法,反應(yīng)杯中加入

5、配制好的反應(yīng)液0.5ml(30ml緩沖液加入0.5ml試劑),混合均勻,室溫(20~25℃),反應(yīng)25~35min,免疫散射比濁儀測定。CRP正常值為小于10mg/ml。乳膠凝集試驗(yàn)按試劑盒說明書操作?! ?.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理  用t檢驗(yàn)和χ2檢驗(yàn)對結(jié)果進(jìn)行分析?! ?結(jié)果  2.1兩種方法檢測和結(jié)果比較  檢測100例患者血清CRP,比濁法陽性率為35%,乳膠法陽性率為18%,比濁法陽性率高于乳膠法。通過配對χ2檢驗(yàn)兩種方法檢測CRP的陽性數(shù)有顯著性差異(P<0.05),30例體檢健康正常人CRP值均小于10mg/ml?! ?.2批內(nèi)、批間精密度檢測 

6、 取混合患者血清一份,作批內(nèi)重復(fù)測定20次,結(jié)果顯示CV值為1.41%,在儀器所標(biāo)明的范圍內(nèi)(<5%),批間試驗(yàn)每天一次共20次,結(jié)果顯示CV值為4.66%,在儀器標(biāo)明的8%范圍內(nèi)?! ?.3線性關(guān)系評價(jià)  取患者混合高值血清一份測定CRP含量,然后作倍比稀釋共5個(gè)稀釋度,結(jié)果表明該方法具有滿意的線性響應(yīng)(r=0.987)?! ?.4干擾試驗(yàn)  脂血(甘油三脂4.51mmol.L和15.7mmol.L)、黃疸(總膽紅素84.3μmol.L和315μmol.L)對測定結(jié)果無明顯影響?! ?討論  傳統(tǒng)的乳膠凝集法檢測CRP缺乏精確度,樣品的滴度是靠稀釋

7、血清的陽性結(jié)果來確定的,不能定量地表示檢測結(jié)果,而且對于小量低濃度的CRP不夠敏感,因而不能滿足現(xiàn)代臨床對醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)的要求[1]。為了能夠給臨床提供反映患者免疫功能狀況及療效的指標(biāo),國內(nèi)近年來逐漸開始對CRP進(jìn)行定量測定,采用得較多的方法是ELISA法,但該法操作較為復(fù)雜,特異性和重復(fù)性均不如免疫散射比濁法,免疫散射比濁法具有試劑穩(wěn)定,操作簡便,流程短,重復(fù)性和精確性好的優(yōu)勢[2-4]。作者利用ORION公司提供的半自動免疫比濁儀TURBOX(r)PLUS,采用散射免疫比濁法檢測了100例患者和30例健康人群CRP含量,同時(shí)以乳膠法作對照,結(jié)果顯示兩種方法檢

8、測的陽性率有顯著性差異(P<0.05)。散射比濁法檢測批內(nèi)、

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