資源描述：
《c基因型hbv轉(zhuǎn)基因小鼠的制備》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學術(shù)論文-天天文庫。
1、C基因型HBV轉(zhuǎn)基因小鼠的制備作者：尤玉琴，黃黎珍，劉光澤，佟明華，李秀梅，胡蓮美，顧為望，孔祥平【摘要】 目的：建立C型HBV轉(zhuǎn)基因小鼠，為乙肝防治研究提供實驗動物模型.方法：采用受精卵顯微注射法，制備HBV轉(zhuǎn)基因小鼠，用PCR，ELISA,熒光定量PCR和免疫組化的方法研究HBV基因在轉(zhuǎn)基因小鼠體內(nèi)的整合、復制和表達情況.結(jié)果：注射受精卵2840枚，篩選注射后成活的受精卵共2256枚，注射成活率79.4％.注射后受精卵共移植假孕雌鼠85只，其中有42只懷孕，假孕雌鼠妊娠率49％，共產(chǎn)下F0代小鼠168只，PCR檢測共有14只小鼠陽性，其中ELISA檢測血清HBsAg陽性5只,HBe
2、Ag均陰性.熒光定量PCR血清HBVDNA顯示，2只小鼠的拷貝數(shù)分別為3.12×105copies/L,1.98×105copies/L，經(jīng)傳代產(chǎn)下F1代小鼠61只，PCR檢測HBVDNA陽性5只，ELISA檢測HBsAg陽性4只，其中肝臟HBsAg免疫組化陽性2只，HBcAg均陰性，且肝組織表達HBsAg為胞漿型.結(jié)論：構(gòu)建的C型HBV基因不但可以在轉(zhuǎn)基因小鼠體內(nèi)進行復制表達，而且可以遺傳給下一代小鼠.【關(guān)鍵詞】肝炎病毒乙型小鼠轉(zhuǎn)基因肝炎表面抗原乙型肝炎核心抗原乙型血清DNA11 【Abstract】AIM：TogenerateHBV(C)genometransgenicmiceto
3、providesuitableanimalmodelsfortherelatedresearchesinChina.METHODS：TheHBVtransgenicmiceweregeneratedbymicroinjectionof1.3copiesHBVgenomeintothepronucleusofFVB/Nzygotes.ThePCRassay,ELISA,RT-PCRandimmunohistochemicalmethodswereusedtodetecttheHBVintegration,replicationandexpressioninthetransgenicmice
4、.RESULTS：Inthisstudy,2840zygoteswereinjected,thesurvived2256zygotesaftermicroinjectionwerereimplantedintotheoviductsof85psudopregnantKMfemalemice.Afterbirth,42femalemicewerepregnantand168F0offspringswereborn.PCRanalysisindicatedthat14outof168F0wereintegratedwithHBVgenome.WithELISA,5ofthemexpresse
5、dHBsAginserum.AndtwomicewerepositiveforHBVDNAreplicationinserumwith3.12×105copies/Land1.98×105copies/Lrespectively.Thenthetransgenicmicewerematedtonormalmicetoestablishtransgenicmousestrain.61F1offspringswereborn.Furtherstudydemonstratedthat5ofthemwereintegratedwithHBVgenomebyPCR,4ofthemwereserum
6、HBsAgpositivebyELISAand2ofthemwiththeintracellulardistributionofHBsAginhepatocytesbyimmunohistochemistry.BothserumHBeAgandliverHBcAg11immunohistochemistrywerenegative.CONCLUSION：TheestablishedHBV(C)genomecouldbenotonlyreplicatedandexpressedintransgenicmicebutalsoinheritedtothenextgenerations. 【K
7、eywords】hepatitisBvirusmicetransgenic,hepatitisBsurfaceantigens;hepatitisBcoreantigens；serum;DNA 0引言 根據(jù)HBV基因序列的差異＞8%，可將HBV毒株分為不同的基因型，目前已確定有A-H8個基因型.不同基因型呈一定的地理區(qū)域性分布，并且HBV基因型與其流行特征、致病性、疾病治療及預后等方面存在十分緊密的關(guān)系［1-5］.我國HBV的主
