hplc法測定裸花紫珠中齊墩果酸與熊果酸的含量

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1、HPLC法測定裸花紫珠中齊墩果酸與熊果酸的含量作者：張艷秋，洪金波，劉文林【摘要】目的：建立裸花紫珠中齊墩果酸與熊果酸的含量測定方法，考察海南五指山地區(qū)野生裸花紫珠中齊墩果酸與熊果酸的含量。方法：采用高效液相色譜法測定裸花紫珠中齊墩果酸與熊果酸的含量，乙腈-甲醇-3.5%乙酸胺水溶液(69∶10∶21)為流動相；流速為1mL/min，檢測波長為215nm。結(jié)果：齊墩果酸與熊果酸的線性范圍分別為1.63～6.53μg(r=0.9996)與1.20～7.20μg(r=0.9997)，回收率分別為98.11%和101.64%。結(jié)論：本法操作簡單，測

2、定結(jié)果準(zhǔn)確，適于裸花紫珠中齊墩果酸與熊果酸的含量測定。【關(guān)鍵詞】裸花紫珠；齊墩果酸；熊果酸；高效液相色譜法［ABSTRACT］Objective:Toestablishamethodforqualitycontrolofoleanolicacidandursolicacidinfoliumcallicarpaenudiflorae,whichisoriginallygrewinthefivefingermountainarea.Methods:Thecontentofoleanolicacidandursolicacidinfoliumca

3、llicarpaenudifloraeweredeterminedbyhighperformanceliquidchromatography(HPLC).TheanalyticalcolumnwasC18(250mm×4.6mm,5μm).Themobilephaseconsisted8ofacetonitrilemethanol3.5%ammoniumacetate(69∶10∶21),theflowratewas1.0mL/min.TheUVdetectionwavelenghthwas215nm.Results:Oleanolica

4、cidandursolicacidshowedagoodlinearityinrangeof1.63～6.53μg(r=0.9996)and1.2～7.2μg(r=0.9997).Theaveragerecoverywas98.11%,101.64%,respectively.Conclusion:Themethodisasimple,convenient,accurateandrelable，anditcanbeusedtoqualitycontroloffoliumcallicarpaenudiflorae.［KEYWORDS］Foliu

5、mcallicarpaenudiflorae;Oleanolicacid；Ursolicacid;Highperformanceliquidchromatography(HPLC)裸花紫珠藥材為馬鞭草科植物裸花紫珠（CallicarpanudifloreaHook.EtArn.）的干燥葉，具有消炎、解毒、收斂、止血作用，用于治療化膿性炎癥、急性傳染性肝炎、外治燒傷、燙傷、外傷出血等，是海南黎族民間常用的一味藥材。8在海南黎族民間驗(yàn)方基礎(chǔ)上，經(jīng)現(xiàn)代研究發(fā)展而成的裸花紫珠片與復(fù)方木麻黃片，就是以裸花紫珠為主藥的成方制劑，前者用于治療胃出血及病毒性

6、肝炎，后者用于治療寒濕痢疾。裸花紫珠藥材主產(chǎn)海南五指山地區(qū)，由于裸花紫珠藥材化學(xué)研究較少，化學(xué)成分不明確，其含量測定指標(biāo)難以建立，給藥材質(zhì)量控制帶來困難。最新研究文獻(xiàn)報(bào)道，從裸花紫珠中分離出了具有抗菌消炎作用的齊墩果酸、熊果酸以及黃酮類成分［1］，我們經(jīng)對其進(jìn)行薄層色譜及高效液相色譜（HPLC）分離檢測發(fā)現(xiàn)，裸花紫珠中所含齊墩果酸與熊果酸含量很高，以兩者作為含量測定指標(biāo)對裸花紫珠藥材進(jìn)行質(zhì)量控制具有實(shí)際意義。本實(shí)驗(yàn)系用HPLC法對裸花紫珠中齊墩果酸與熊果酸含量進(jìn)行了測定，為進(jìn)一步進(jìn)行新制劑開發(fā)和質(zhì)量控制提供科學(xué)依據(jù)。1儀器、試劑與樣品Wate

7、rs高效液相色譜儀（Delta600泵，2487檢測器）；Milennium色譜工作站；齊墩果酸與熊果酸化學(xué)對照品購自中國藥品生物制品檢定所；裸花紫珠藥材采自海南省五指山區(qū)，由本所鑒定；乙腈、甲醇為色譜純，其它均為分析純試劑。水為自制純化水。2試驗(yàn)方法與結(jié)果2.1色譜條件與系統(tǒng)適用性色譜柱：LichrospherC18(250mm×4.6mm,5μm)，流動相：乙腈-甲醇-3.5%乙酸胺水溶液(69∶10∶21)，流速為1mL/min，檢測波長為215nm，柱溫30℃，進(jìn)樣量20μ8L。在此條件下，取裸花紫珠供試品溶液、齊墩果酸與熊果酸對照品

8、溶液分別進(jìn)樣，所得色譜圖見圖1A、B，齊墩果酸與熊果酸能有效分離。a.齊墩果酸(Oleanolicacid）b.熊果酸（Ursolicacid）圖1齊墩果酸與熊果酸