唾液淀粉酶的活性觀察

《唾液淀粉酶的活性觀察》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。

1、唾液淀粉酶的活性觀察【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?.了解環(huán)境因素對(duì)酶活性的影響及酶的高效性。2.掌握酶定性分析和注意事項(xiàng)?！净驹怼棵甘巧锎呋瘎哂袠O高的催化效率，具催化率比一般催化劑高106~1013。在生物體內(nèi)，過氧化氫酶能催化過氧化氫很快地分解成為H2O和O2，使H2O2不致在體內(nèi)大量積累。鐵粉也是過氧化氫分解反應(yīng)的催化劑，但其催化效率僅為過氧化氫的100億分之一。酶的催化作用受到溫度的影響。在一定的溫度范圍內(nèi)，隨著溫度的升高，酶促反應(yīng)速度增加，直至最大值。由于酶是一種蛋白質(zhì)，溫度過高會(huì)導(dǎo)致酶的失

2、活，因此，反應(yīng)速度到達(dá)最高值以后，溫度繼續(xù)升高，酶促反應(yīng)速度反而急劇下降，直至完全停止酶促反應(yīng)。反應(yīng)速度達(dá)到最大值時(shí)的溫度稱為酶作用的最適溫度。酶活性受環(huán)境pH值的影響。通常各種酶只有在一定的pH值范圍才表現(xiàn)出活力。酶活性達(dá)到最高的pH值，稱為最適pH值。低于或者高于最適pH值時(shí)，酶的活性均降低或者失去活性。唾液淀粉酶的最適pH值為6.8。酶活性受環(huán)境中某些物質(zhì)的影響，有些物質(zhì)能使酶的活性增加，稱為激活劑；有些物質(zhì)能使酶的活性降低，稱為抑制劑。值得注意的是，激活劑和抑制劑不是絕對(duì)的，有些物質(zhì)在低濃度時(shí)為酶的激活劑

3、，而在高濃度時(shí)則為該酶的抑制劑。例如，0.9%的氯化鈉是唾液淀粉酶的激活劑，但氯化鈉達(dá)到1/3飽和度時(shí)就可抑制唾液淀粉酶的活力。本實(shí)驗(yàn)以唾液淀粉酶為材料來觀察環(huán)境因素對(duì)酶活性的影響情況。唾液中含有α-淀粉酶，該酶屬于內(nèi)切酶。淀粉在該酶的催化作用下或隨著時(shí)間的延長而出現(xiàn)不同程度的水解產(chǎn)物，從而得到各種糊精乃至麥芽糖、少量葡萄糖等產(chǎn)物。而碘液能指示淀粉的水解程度，淀粉及淀粉不同程度的水解產(chǎn)物遇到碘可呈藍(lán)色、紫色、暗褐色和紅色，而麥芽糖遇碘液則不呈顏色反應(yīng)。如圖所示：淀粉酶淀粉酶淀粉紫色糊精暗褐色糊精紅色糊精麥芽糖+少

4、量葡萄糖加碘后：藍(lán)色紫紅色暗褐色紅棕色黃色（碘本身顏色）【實(shí)驗(yàn)試劑、材料和器材】（一）試劑（1）0.5%淀粉溶液：稱取0.5g可溶性淀粉，加入少量蒸餾水調(diào)成糊狀，然后緩慢倒入沸騰的60mL蒸餾水中，攪動(dòng)煮沸1min。冷卻至室溫后加水至100mL，置冰箱中存放。（2）碘液：稱取2g碘化鉀溶于5mL蒸餾水中，隨后加1.2g碘，待碘溶解后，加蒸餾水至200mL，混合均勻后保存于棕色瓶中，用前稀釋5倍。（3）不同pH值溶液A液——0.2mol/LNa2HPO4溶液：稱取35.62gNa2HPO4·12H2O，溶于蒸餾水后

5、定容至1000mL。B液——0.1mol/L檸檬酸溶液：稱取21.01g一水檸檬酸，溶于蒸餾水后定容至1000mL。①pH3.8緩沖液——取A液71.0mL、B液129.0mL混合而成。②pH6.8緩沖液——取A液145.5mL、B液54.5mL混合而成。③pH8.0緩沖液——取A液194.5mL、B液5.5mL混合而成。（4）1%（W/V）CuSO4溶液：稱取無水硫酸銅1g（或者稱取五水硫酸銅約1.5625g），溶解后用蒸餾水稀釋至100mL。（5）0.9%（W/V）NaCl溶液：稱取氯化鈉0.9g，溶解后用蒸

6、餾水稀釋至100mL。（6）2%H2O2溶液。（7）鐵粉（二）材料馬鈴薯（生的，熟的各一份）（三）儀器白比色板，恒溫水浴箱，制冰機(jī)，電爐，電子天平，棕色試劑瓶，研缽，試管（30mL），刻度吸管（移液槍），燒杯，容量瓶，水果刀，計(jì)時(shí)表，一次性杯子等【操作步驟】（一）唾液淀粉酶的制備每人先用自來水水漱口，將口腔內(nèi)的食物殘?jiān)宄蓛?。然后用一次性杯子取蒸餾水約20mL含入口中，做咀嚼動(dòng)作3~4分鐘，以分泌較多的唾液。將口腔中的蒸餾水吐入干凈的小燒杯中，此即為稀釋的唾液淀粉酶液。（二）酶的高效性及環(huán)境因素對(duì)酶活性的影響1

7、.pH對(duì)酶活力的影響取3只試管編號(hào)，按表1操作。表1pH值酶活力的影響mL編號(hào)123pH=3.8緩沖溶液3——pH=6.8緩沖溶液—3—pH=8.0緩沖溶液——30.5%淀粉溶液111唾液淀粉酶111將上述各管溶液混勻后在37℃水浴中保溫5min檢查淀粉水解程度每隔1min，從2號(hào)試管中取出1滴溶液置于白瓷板上，用碘液檢查淀粉的水解程度，待溶液不再變色時(shí)，從水浴中取出所有試管向各管中均加碘液1~2滴，搖勻觀察，記錄并解釋各管的現(xiàn)象2.溫度對(duì)酶活性的影響取3只試管編號(hào)，按表2操作。表2溫度對(duì)酶活力的影響編號(hào)123淀

8、粉酶液（mL）0.50.50.5pH6.8的緩沖溶液（mL）1110.5%淀粉溶液（mL）111反應(yīng)溫度（℃，10min）037100取出各試管——冷水冷卻向各管中均加碘液1~3滴，搖勻觀察，記錄并解釋各管的現(xiàn)象3.酶的激活劑和抑制劑對(duì)酶活性影響取3只試管編號(hào)，按表3操作。表3酶的激活劑和抑制劑對(duì)酶活性的影響mL編號(hào)1230.9%NaCl溶液1——1%CuSO4溶液—1—