實(shí)驗(yàn)三唾液淀粉酶的活性觀察.ppt

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1、實(shí)驗(yàn)三、唾液淀粉酶的活性觀察指導(dǎo)老師：劉建昌、池雪林一、目的掌握溫度、pH、激活劑和抑制劑如何影響酶的催化活性及其影響機(jī)理。二、原理酶是由活細(xì)胞分泌的生物催化劑。酶促化學(xué)反應(yīng)進(jìn)行的能力即稱為酶活性（酶活力）在一定條件下，能使酶活性達(dá)到最高時(shí)的溫度即酶的最適溫度而能使酶活性達(dá)到最高時(shí)的pH即酶的最適pH能使酶由無活性變?yōu)橛谢钚曰蚴姑富钚栽龈叩奈镔|(zhì)稱為酶的激活劑能降低酶活性卻又不使酶變性的物質(zhì)叫酶的抑制劑。本實(shí)驗(yàn)用唾液淀粉酶為材料來觀察酶活性受理化因素影響的情況。唾液中含有唾液淀粉酶，唾液淀粉酶的底物是淀粉。淀粉在該酶的催化下會(huì)隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而出現(xiàn)不同程度的水解，從而得到各種糊精乃至麥芽糖、

2、少量葡萄糖等水解產(chǎn)物。而碘液能指示淀粉的水解程度。淀粉糊精麥芽糖+少量葡糖淀粉酶淀粉酶紫紅、暗褐或紅色加碘（藍(lán)色）棕黃色三、試劑及器材（1）0.5％（w/v）淀粉溶液要求新鮮配制。（2）稀碘溶液（3）不同pH溶液①pH5.0緩沖液②pH6.8緩沖液③pH8.0緩沖液（4）0.5％（w/v）蔗糖溶液（5）斑氏試劑（6）1％（w/v）NaCl溶液（7）1％（w/v）CuSO4溶液（8）白瓷板（或比色板）（9）恒溫水浴鍋（10）電爐四、操作1..唾液淀粉酶應(yīng)用液的制備（1）每人取一個(gè)干凈的飲水杯，裝上蒸餾水。（2）先用蒸餾水漱口，將口腔內(nèi)的食物殘?jiān)謇砀蓛?。?）口含約20mL蒸餾水，做咀嚼動(dòng)

3、作1-2min，以分泌較多的唾液。然后將口腔中的唾液吐入一個(gè)干凈的小燒杯中。2．溫度對(duì)酶活性的影響（1）取3支試管，按表4-2進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。試管管號(hào)1230.5％淀粉(mL)555pH6.8緩沖液(mL)0.50.50.5稀釋唾液(mL)0.50.50.5不同溫度（℃）冰水浴37℃水浴沸水?。?）在干凈的比色板上，于各孔分別滴2滴碘液。（3）每隔1min從第2支試管中取反應(yīng)液1滴，與比色板孔穴中的碘液混合，觀察顏色的變化。（4）待第2支試管中的反應(yīng)液與碘液混合后顏色不再變化時(shí)，取出試管，向各試管滴加碘液3滴。觀察記錄各管顏色。說明溫度對(duì)酶活性的影響。3．pH對(duì)酶活性的影響（1）取3支試管，按

4、表4-3編號(hào)后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。管號(hào)1230.5％淀粉(mL)222不同pH的緩沖液（mL）pH5.02——pH6.8—2—pH8.0——2稀釋唾液(滴)101010搖勻后，將各管置37℃水浴中處理。（2）每隔1min從pH6.8的試管中取1滴反應(yīng)液滴于白瓷板上，隨后滴加稀碘液1滴，觀察顏色變化。（3）待顏色呈棕色時(shí)，向各管中加稀碘液3滴。觀察各管顏色，比較各管中淀粉水解的程度。解釋pH對(duì)酶活性的影響。4．酶的專一性（1）取2支試管，按4-4編號(hào)后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。（2）將各管搖勻后，一起放入37℃水浴處理10min。（3）取出試管，分別加入斑氏試劑2ml,混勻。（4）將各管置于沸水浴中煮沸10-20m

5、in。觀察并解釋結(jié)果。管號(hào)120.5％淀扮(mL)2—0.5%蔗糖(mL)—2稀釋唾液(mL)11管號(hào)1230.5％淀扮(mL)333pH6.8緩沖液(mL)0.50.50.51％硫酸銅镕液(mL)—1`1％氯化鈉溶液(mL)—1—蒸餾水(mL)1—稀釋唾液(mL)1115．唾液淀粉酶的激活劑和抑制劑（1）取3支試管，按表4-5編號(hào)后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。（2）將各管搖勻后，一起放入37℃水浴保溫。（3）每隔1min從第2支試管中取出1滴反應(yīng)液滴于白瓷板上，滴加稀碘液1滴，觀察其顏色變化。（3）待顏色呈棕色時(shí)，向各管中加稀碘液1-3滴。觀察各管顏色，比較各管中淀粉水解的程度，并解釋之。