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《atpb基因反義寡核苷酸對人卵巢癌skovipl細胞順鉑敏感性影響的初步探討》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、復旦大學碩士學位論文ＡＴＰ７Ｂ基因反義寡核苷酸對人卵巢癌ＳＫＯＶ３ｉｐｌ細胞順鉑敏感性影響的初步探討（中文摘要）卵巢癌是婦科常見腫瘤，其死亡率居婦科腫瘤之首。卵巢癌臨床治療采取以手術為主，化療為輔的綜合治療。但原發(fā)性或獲得性順鉑耐藥是卵巢癌患者生存率提高的主要障礙之一。Ｐ型三磷酸腺苷酶（ＡＴＰＴＢ）是一種銅轉(zhuǎn)運ＡＴＰ酶。研究發(fā)現(xiàn)ＡＴＰＴＢ在卵巢癌ＳＫＯＶ３ｉｐｌ中高表達，并且ＡＴＦ７Ｂ基因與順鉑耐藥有關。反義寡核苷酸技術利用堿基互補配對原理使反義核酸與靶ｍＲＮＡ結(jié)合，形成ＲＮＡ－ＤＮＡ復合物，激活
2、ＲＮａｓｅＨ，降解ｍＲＮＡ，以達到抑制靶基因表達的目的。本研究旨在探討ＡＴＰ７Ｂ反義寡核苷酸對卵巢癌ＳＫＯＶ３ｉｐｌ細胞順鉑敏感性的影響。本課題共分二部分：１．針對ＡＴＰ７Ｂ基因反義寡核苷酸對人卵巢癌ＳＫＯＶ３ｉｐｌ細胞株ＡＴＰ７Ｂ表達的影響；２．ＡＴＰ７Ｂ基因反義寡核苷酸對人卵巢癌ＳＫＯＶ３ｉｐｌ細胞順鉑敏感性的影響。第一部分針對ＡＴＰ７Ｂ基因反義寡核苷酸對人卵巢癌ＳＫＯＶ３ｉｐｌ細胞株ＡＴＰ７Ｂ表達的影響目的探討針對ＡＴＰ７Ｂ基因的反義寡核苷酸對人卵巢癌ＳＫＯＶ３ｉｐｌ細胞株ＡＴＰ７Ｂ表達的
3、影響。方法人工合成包含ＡＴＩ＇７ＢｍＲＮＡ翻譯起始位點的反義寡核苷酸片段及正義寡核苷酸片段作為對照。用脂質(zhì)體ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ．２０００（ＬＦ）將反義寡核苷酸片段及正義寡核苷酸片段轉(zhuǎn)染卵巢癌ＳＫＯＶ３ｉｐｌ細胞，用ＲＴ－ＰＣＲ法，流式細胞測定法，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ檢測ＳＫＯＶ３ｉｐｌ細胞轉(zhuǎn)染后，ＡＴＰ７Ｂ基因ｍＲＮＡ、蛋白表復旦大學碩士學位論文達的變化。結(jié)果ＳＫＯＶ３ｉｐｌ細胞以及轉(zhuǎn)染反義寡核苷酸片段后ＡＴＰＴＢ與８．ａｃｔｉｎｍＲＮＡ的光密度比值分別為０．８３１±０．０６和０．
4、２０３±０．０７（Ｐ＜０．０１）。流式細胞法檢測細胞內(nèi)ＡＴＰ７Ｂ蛋白的熒光強度由轉(zhuǎn)染前的７９．４２±４．０４下降到５０．８７±５．４７（Ｐ＜０．０５）。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ檢測ＳＫＯＶ３ｉｐｌ細胞以及轉(zhuǎn)染反義寡核苷酸片段后，ＡＴＰ７Ｂ與Ａｃｔｉｎ蛋白的光密度比值分別為２．６０±０．４４和１．０１±０．０６（Ｐ＜０．０１）。而轉(zhuǎn)染正義寡核苷酸片段及ＬＦ的ＳＫＯＶ３ｉｐｌ細胞中，上述指標無統(tǒng)計學差異（Ｐ＞Ｏ．０５）。結(jié)論ＡＴＰ７ＢＡＴＰＴＢ基因反義寡核苷酸片段能顯著抑制卵巢癌ＳＫＯＶ３ｉｐｌ細胞ｎ
5、ｌＲＮＡ和蛋白表達。關鍵詞ＡＴＰ７Ｂ反義寡核苷酸ＳＫＯＶ３ｉｐｌ第二部分ＡＴＰＴＢ基因反義寡核苷酸對人卵巢癌ＳＫＯＶ３ｉｐｌ細胞順鉑敏感性的影響目的探討ＡＴｌｒ７Ｂ基因反義寡核苷酸片段對人卵巢癌ＳＫＯＶ３ｉｐｌ細胞順鉑敏感性的影響。方法人工合成包含ＡＴＰ７ＢｍＲＮＡ翻譯起始位點的反義寡核苷酸片段及正義寡核苷酸片段作為對照。用脂質(zhì)體ｌｉｐｏｆｅｅｔａｍｉｎｅ．２０００（ＬＦ）將反義寡核苷酸片段及正義寡核苷酸片段轉(zhuǎn)染卵巢癌ＳＫＯＶ３ｉｐｌ細胞，用ＭＴＴ法檢測ＳＫＯＶ３ｉｐｌ細胞轉(zhuǎn)染后，細胞半
6、數(shù)抑制濃度（１Ｃ５０）的變化。結(jié)果轉(zhuǎn)染ＡＴＰ７Ｂ反義寡核苷酸后，ＭＴｒ檢測ＩＣ５０由轉(zhuǎn)染前的１２６．６３４－１２．０６／ｔＭ下降為８０．９０±２０．０９／ａＭ（Ｐ＜Ｏ．０１）。而轉(zhuǎn)染正義寡核苷酸片段及ＬＦ的ＳＫＯＶ３ｉｐｌ細胞中，上述指標無統(tǒng)計學差異（Ｐ＞０．０５）。結(jié)論ＡＴＰ７Ｂ基因反義寡核苷酸能增加ＳＫＯＶ３ｉｐｌ細胞對順鉑的敏感性。關鍵詞Ａ】ｙ危反義寡蕾晤酸ｓＫｏｖ≯石耐藥ＭＴＴ法２復旦大學碩士學位論文ＥｆｆｅｃｔｓｏｆａｎｔｉｓｅｎｓｅｏｎｇｏｄｅｏｘｙｎｕｃＩｅｏｔｉｄｅｏｆ
7、ＡＴＰ７ＢｇｅｎｅｏｎｃｉｓｐｌａｔｉｎｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙｉｎｈｕｍａｎｏｖａｒｉａｎｌｉｎｅＳＫＯＶ３ｉｐｌ（Ａｂｓｔｒａｃ０ｃａｎｃｅｒｃｅｌｌＯｖａｒｉａｎｃａｎｃｅｒｉｓｏｎｅｏｆｔｈｅｌｅａｄｉｎｇｃａｕｓｅｓｏｆｄｅａｔｈａｍｏｎｇｇｙｎｅｃｏｌｏｇｉｃｍａｌｉｇｎａｎｃｉｅｓ．Ｏｐｔｉｍａｌｃｙｔｏｒｅｄｕｃｔｉｖｅｓｕｒｇｅｒｙｆｏｌｌｏｗｅｄｂｙｓｙｓｔｅｍｉｃｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙｈａｓｂｅｃｏｍｅｔｈｅｃｕｒｒｅｎｔｓｔａｎｄ
8、ａｒｄｔｈｅｒａｐｙｆｏｒｏｖａｒｉａｎｃ，ａｎｃｃｒｐａｔｉｅｎｔｓ．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｉｎｔｒｉｎｓｉｃｏｒａｃｑｕｉｒｅｄｃｉｓｐｌａｔｉｎｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｉｓａｍａｊｏｒｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｐｒｏｂｌｅｍｆｏｒＣａｌｌｃｅｒｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ．ＡＴＰ７Ｂｉｓａｃｏｐｐｅｒ－ｔｒａｎｓｐｏｒｔｉｎｇＰ－ｔｙｐｏａｄｅｎｏｓｉｎｅｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ．ＩｔｗａｓｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｄｔｈａｔｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｏｆＡＴＰ
