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1、GluR1在大鼠海馬結(jié)構(gòu)的表達(dá)作者：蔣馬莉，韓太真,楊東偉【關(guān)鍵詞】海馬 ExpressionofGluR1inthehippocampusofrats 【Abstract】AIM:ToinvestigatetheexpressionofAMPAreceptorsubunitGluR1inthehippocampusofrats.METHODS:TheexpressionanddistributionofGluR1inhippocampusofratswereexaminedbyusingSPimmunohistochemicalstainingmethod.RESU
2、LTS:TherewasawidespreadexpressionofGluR1inthehippocampusofadultrats,especiallyinstratumpyramidalcell,stratumorientandstratumlucidumofCA3region,andinterneuronofdentategyrus.PositiveexpressionwasmainlylocatedinthecytomembraneandprocessesoftheneuronsintheCA1area,andalsointhecytoplasmintheCA3
3、area.CONCLUSION:TheexpressionofGluR1inthehippocampalCA1andCA3areaisdifferent.Thisdifferencemaybeattributedtothedifferentfunctionsindifferenthippocampalsubregions. 【Keywords】receptors,AMPA;GluR1;hippocampus;immunohistochemistry 【摘要】目的：觀察AMPA受體亞單位GluR1在大鼠海馬的表達(dá).方法：在多聚甲醛固定的海馬切片上，用免疫組化SP法觀察G
4、luR1在正常成年大鼠海馬結(jié)構(gòu)的表達(dá)與分布.結(jié)果：GluR1在正常大鼠海馬有廣泛表達(dá)，在CA3區(qū)的起層、錐體細(xì)胞層和透明層及齒狀回門區(qū)內(nèi)的中間神經(jīng)元表達(dá)最強(qiáng).陽性表達(dá)在CA1區(qū)主要見于神經(jīng)元的胞膜和突起，而在CA3區(qū)還可見于胞質(zhì).結(jié)論：GluR1在海馬CA1區(qū)和CA3區(qū)的表達(dá)不同，這種差異可能與海馬不同區(qū)域具有不同功能有關(guān). 【關(guān)鍵詞】受體,AMPA；GluR1；海馬；免疫組織化學(xué) 0引言 αamino3hydroxyl5methyl4isoxazolepropionicacid(AMPA)受體在中樞神經(jīng)系統(tǒng)介導(dǎo)大多數(shù)快速興奮性突觸傳遞，在長時(shí)程增強(qiáng)（LTP）、長時(shí)
5、程抑制（LTD）和學(xué)習(xí)記憶等方面均具有重要作用［1］.GluR1是海馬神經(jīng)元AMPA受體的重要組成部分,它對(duì)于突觸可塑性及空間記憶的保留是必需的［2］.但是GluR1究竟在海馬不同區(qū)域的分布特征如何，仍不清楚.我們觀察了GluR1在海馬的分布，以探討其分布與功能之間的聯(lián)系. 1材料和方法4 1.1材料SD雌性大鼠6只，體質(zhì)量220~260g（由西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供），用顆粒型大鼠飼料喂養(yǎng)，自由飲水，動(dòng)物房溫度維持于(21±1)℃，光暗周期為12h∶12h,交替時(shí)間為7∶00am.AMPA受體亞單位GluR1抗體購自Sigma公司，SP組化試劑盒和DAB顯
6、色試劑盒購自北京中山生物公司. 1.2方法動(dòng)物用20g・L-1戊巴比妥鈉按45mg・kg-1腹腔注射麻醉后打開胸腔，經(jīng)心臟快速灌注生理鹽水100mL,再用40g・L-1多聚甲醛(PB配制,PH7.4)300mL灌注固定.取全腦，修塊，浸入40g・L-1多聚甲醛中后固定，4℃過夜.用振蕩切片機(jī)作冠狀連續(xù)切片，片厚40μm.切片隔3張取1張，共4片，做漂浮染色.反應(yīng)步驟為：①0.1mol・L-1PBS漂洗,3×5min；②3mL・L-1H2O2處理30min，封閉內(nèi)源性過氧化物酶,然后用0.
7、1mol・L-1PBS漂洗,3×5min；③10g・L-1Triton室溫孵育1h;0.1mol・L-1PBS漂洗,3×5min；④正常羊血清封閉，室溫1h；⑤兔抗GluR1抗體，4℃，72h；0.1mol・L-1PBS漂洗,5×5min；⑥生物素化羊抗兔抗體室溫1h；0.1mol・L-1PBS漂洗,5×5min；⑦SP復(fù)合物室溫1h;0.1mol・L-1PBS漂洗,5×5min；⑧DAB顯色；⑨裱片，常規(guī)脫水,透明,中性樹膠封片.陰性對(duì)照用正
