海馬結(jié)構(gòu)在大鼠空間辨別性學(xué)習(xí)記憶中突觸變化綜述.doc

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1、海馬結(jié)構(gòu)在大鼠空間辨別性學(xué)習(xí)記憶中突觸變化綜述08教本鄭俠婭08103214135(溫州大學(xué)教師教育學(xué)院,浙江溫州325035)摘耍目的:探究海馬結(jié)構(gòu)在大鼠空間辨別的學(xué)習(xí)記憶活動(dòng)中的突觸的變化。方法:電子顯微鏡下對模型大鼠和對照大鼠的海馬結(jié)構(gòu)內(nèi)突觸復(fù)合體的形態(tài)進(jìn)行了對比觀察。結(jié)果:(I)模型大鼠海馬CA3區(qū)多形層內(nèi)多為神經(jīng)纖維,英中無髓纖維占多數(shù),有髓纖維很少。在無髓纖維間見到形狀不規(guī)則的軸突終末與周圍的樹突和樹突棘分別形成軸一樹突觸和軸棘突觸,后者多見。突觸前膨大內(nèi)充滿圓形清亮、無核心的突觸小泡和線粒體。突觸后成分多為樹突棘并在多處與突觸

2、前膜形成活性區(qū),樹突棘內(nèi)見到棘器。⑵對照大鼠海馬C八3區(qū)多形層內(nèi)含有大量無髓纖維并見到較少的軸一樹突觸。該突觸形狀規(guī)則且活性帶面積較小,突觸后成分多為一個(gè),突觸小泡清亮、形無核心,偶見線粒體。⑶經(jīng)Ti~染色的兩組大鼠海馬CA3區(qū)多形層的超微結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是銀顆粒僅沉積在苔鮮纖維的髓鞘內(nèi)和苔醉纖維的大終扣內(nèi),線粒體、樹突干和樹突棘內(nèi)均無銀顆粒。結(jié)論:正常生理活動(dòng)和空間辨別性學(xué)習(xí)記憶活動(dòng)均可引致大鼠海馬C八3區(qū)多形層突觸可塑性變化,但兩者在形態(tài)上有所不同。關(guān)鍵字空間辨別性學(xué)習(xí)記憶海馬突觸模型前言作者以往在大鼠海馬結(jié)構(gòu)神經(jīng)元在空間辨別性學(xué)習(xí)記憶活動(dòng)吋的

3、形態(tài)學(xué)可塑性研究中發(fā)現(xiàn)空間辨別性學(xué)習(xí)記憶活動(dòng)可引致大鼠海馬CA3區(qū)多形層內(nèi)有纖維出芽。新芽是否形成突觸則是決定其是否有生理功能的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。為此,本實(shí)驗(yàn)在電子顯微鏡下對空間辨別性習(xí)記憶模型組大鼠和對照組大鼠海馬結(jié)構(gòu)內(nèi)突觸復(fù)合體進(jìn)行了對比觀察,尋找超微結(jié)構(gòu)的組差異,即由空間辨別性學(xué)習(xí)記憶活動(dòng)引致大鼠海馬結(jié)構(gòu)的突觸形態(tài)學(xué)可塑性變化的特征。突觸可塑性(synapticplasticity)是神經(jīng)元形態(tài)學(xué)可塑性的一個(gè)重要方面。作者在大鼠海馬結(jié)構(gòu)在空間辨別性學(xué)習(xí)記憶時(shí)的突觸形態(tài)學(xué)觀察中發(fā)現(xiàn)獲得辯別性學(xué)習(xí)記憶功能的大鼠海馬結(jié)構(gòu)內(nèi)神經(jīng)纖維出芽和新的突觸形成

4、[1]。經(jīng)比較觀察發(fā)現(xiàn)新形成的突觸在形態(tài)學(xué)上具有苔蘇纖維形成的突觸特征。為了進(jìn)一步探討大鼠海馬結(jié)構(gòu)在突間辨別性學(xué)習(xí)記憶吋突觸形態(tài)可塑性,本實(shí)驗(yàn)在電子顯微鏡照片上對空間辨別性學(xué)習(xí)記憶模型大鼠和對照大鼠海馬結(jié)構(gòu)內(nèi)突觸復(fù)合體進(jìn)行了的體視學(xué)指標(biāo)的對比性測算,尋找由空間辨別性學(xué)習(xí)記憶活動(dòng)引致大鼠海馬結(jié)構(gòu)的突觸形態(tài)學(xué)可塑性變化的數(shù)量關(guān)系。1材料和方法1.1材料5只空間辨別性學(xué)習(xí)記憶的大鼠模型⑵和5只對照大鼠經(jīng)腹腔注射復(fù)合麻醉劑(3ml/kg)麻醉,經(jīng)左心室升主動(dòng)脈灌流固定,先灌入生理鹽水50ml,繼Z灌入含4%多聚甲醛的0?lmol/L磷酸緩沖液(pH

5、7?4,4°C)300mlo取腦并剝離海馬,用振動(dòng)切片機(jī)進(jìn)行垂直于海馬長軸的冠狀面切片,片厚50Umo從每只大鼠的海馬切片中隨機(jī)選3張切片,共計(jì)30張切片。mol/l磷酸緩沖液沖洗,再經(jīng)上升梯度乙醇脫水,100%丙酮透明,丙酮與618(1:1)預(yù)浸,純618平板包埋。于立體顯微鏡下辨認(rèn)C八3區(qū)的多形層取材,修塊。把從每一只大鼠隨機(jī)選取的3張切片中再隨機(jī)選取的一張切片在LKB切片機(jī)上超簿切片,最后再從每一大鼠的超簿切片屮隨機(jī)選取3張超簿切片撈T200冃的銅網(wǎng)。常規(guī)拘椽酸鉛和醋酸軸雙染。⑶取樣方法從每只大鼠的3個(gè)銅網(wǎng)中隨選取一個(gè)銅網(wǎng),在一張切片

6、上分左上、下和右上、下以及中央5個(gè)視野于JEM—lOOCXn型電子顯微鏡下拍照備測。1.2方法1.2.1取材。氧化娥室溫下后固定切片2小時(shí),用0?01mol/LPBS沖洗,乙醇脫水,丙酮透明'丙酮與618(1:1)預(yù)浸,純618平板包埋。立體顯微鏡下確認(rèn)CA3區(qū)的多形層再取材、修塊。從每一只大鼠隨機(jī)選取的3張切片中再隨機(jī)選取一張切片在LKB切片機(jī)上超薄切片,再從一大鼠的超薄切片屮隨機(jī)選3張撈于200目的銅網(wǎng)。常規(guī)鉛和鈾雙染。1.2.2取樣本方法。從每只大鼠的3個(gè)銅網(wǎng)中隨機(jī)選一個(gè)銅網(wǎng),在一張切片上分左上、左下和右上、右下以及中央5個(gè)視野于JE

7、M-100CXII型電子顯微鏡下放大20000倍拍照。1.2.3體視學(xué)參數(shù)的測算方法。在模型組(M)和對照組(C)各5只大鼠的電鏡照片中隨機(jī)各取6張,各組共計(jì)30張照片上測算海馬CA3區(qū)多形層內(nèi)突觸的數(shù)密度(Nvs),突觸活性區(qū)的膜面積密度,突觸小泡的體積和數(shù)密度,線粒體的體積和數(shù)密度。2結(jié)果2.1模型大鼠海馬C八3區(qū)多形層的超微結(jié)構(gòu)模型大鼠海馬C八3區(qū)多形層內(nèi)是以神經(jīng)纖維為主要成份,其中無髓纖維占多數(shù),冇髓纖維很少。在無髓纖維間可見兩種形態(tài)不同的突觸。一種突觸的結(jié)構(gòu)特點(diǎn),表現(xiàn)在突觸前成分上,是突觸前膨大大且不規(guī)則,其內(nèi)充滿各種類型突觸小泡

8、,以清亮圓形無核心小泡為主還有扁平有核心小泡和大囊泡,并可見到多個(gè)結(jié)構(gòu)發(fā)達(dá)的線粒體聚積;表現(xiàn)在突觸后成份上,是該突觸具有多個(gè)突觸后分成并與之形成多個(gè)活性區(qū),此突觸后成份多為樹突棘

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