櫻桃離體培養(yǎng)研究進展

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1、櫻桃離體培養(yǎng)研究進展山東農業(yè)科學ShandongAgriculturalSciences2005年第6期櫻桃離體培養(yǎng)研究進展鄭紅軍,劉慶忠(山東省果樹研究所,山東泰安271000)摘要:本文著重介紹了莖尖,莖段培養(yǎng)在櫻桃上的應用,莖尖,莖段培養(yǎng)的技術要點及主要影響因素,組培苗的生根培養(yǎng)及馴化移栽,以及櫻桃葉片,不定根和幼胚離體培養(yǎng)的研究進展.并對櫻桃離體培養(yǎng)存在的問題和不足提出了三點建議.關鍵詞:櫻桃;離體培養(yǎng)中圖分類號:$662.9文獻標識號:A文章編號:1001-4942(2005)06?0069-04櫻桃(Prunus)的離體培養(yǎng)研究始于2O世紀8O年代[.?,經過2O多年的發(fā)展,目前

2、已在莖尖和莖段培養(yǎng),葉片離體培養(yǎng),不定根培養(yǎng),胚培養(yǎng)等方面取得了重要進展.1莖尖,莖段培養(yǎng)1.1應用在櫻桃的離體培養(yǎng)中.以莖尖,莖段作為外植體最為廣泛.目前已在Colt,SD一13,Gisela等砧木[],甜櫻桃紅燈,莫利,大紫等15個品種[",烏克蘭大櫻桃["],中國櫻桃烏皮[2,中華矮櫻桃[2",草原櫻桃希望和阿泰斯卡婭【.=]及酸櫻桃[2上培養(yǎng)成功.有的被應用于培育無病毒苗木,快速繁殖及建立試管苗無菌體系的實踐中.采用莖尖,莖段培養(yǎng)可以在短期內大大提高繁殖率.在MS培養(yǎng)基上.pH為5.8時烏克蘭大櫻桃繼代培養(yǎng)45天左右,增殖系數可達11C"].草原櫻桃培養(yǎng)3O天后,增殖系數高達5.6C

3、..莫利甜櫻桃繼代培養(yǎng)45天增殖系數可達1O.4C.烏皮櫻桃在MS和FH培養(yǎng)基中繼代培養(yǎng)3O天.增殖倍數在7～12之間[..莖尖,莖段培養(yǎng)是培育無病毒植株的一個重要途徑.櫻桃病毒病普遍而嚴重,并且還不能徹底脫除.2O世紀9O年代以后大量采用熱處理和莖尖培養(yǎng)相結合培育無病毒苗木的方法在櫻桃上得到了廣泛的應用[2".在果樹育種中用莖尖,莖段培養(yǎng)的方法可大大縮短育種年限.據研究,櫻桃莖尖培養(yǎng)有5～7的試管苗可以誘導發(fā)生變異[1,利用這些變異進行果樹營養(yǎng)系選種具有重要意義.寧淑香等[g]已建立了6種櫻桃砧木的無性系.無性系的建立,可以為櫻桃生產提供大量整齊一致,抗病抗寒的優(yōu)良砧木.為櫻桃生產的工廠化

4、育苗奠定了基礎.同時,也為櫻桃提供脫毒苗.培育抗寒高產優(yōu)質的苗木提供了前期基礎.1.2莖尖,莖段培養(yǎng)的技術要點及影響因素1.2.1品種大多數植物組織培養(yǎng)時外植體的誘導及試管苗生根,不同種類品種,不同無性系間均存在一定差異.寧淑香等[1]發(fā)現(xiàn),6種櫻桃砧木在同一培養(yǎng)基中分化收稿日期;2005—04—01存在著差異.1.2.2取材及接種時期不同取材時期及接種時期影響莖尖培養(yǎng)成活率.覃蘭英等[2']試驗表明:櫻桃休眠后取材,其成活率均高于生長期,休眠前期.王然等【=報道,矮櫻桃在3～5月取材.只需進行一次消毒,外植體的污染率可控制在8.3以下,且在繼代培養(yǎng)時.芽的增殖情況優(yōu)于其它時期取材的芽.代紅

5、艷等[1試驗認為甜櫻桃夏季取材,可供接種的莖尖數較少,但成苗率較高(27.3～37.5);冬季取材,枝條上可供接種的莖尖數較多,但成苗率低(8.3～23.7).1.2.3外植體的選擇在莖尖,莖段培養(yǎng)中.由于品種不同,選材有所不同.矮化砧木SD一13C,Colt【'],日本抗寒砧木北海道["],中華矮櫻桃[.",莫利甜櫻桃[],烏克蘭大櫻桃["皆取萌動芽枝條或嫩梢作外植體培養(yǎng)成苗;草原櫻桃于越冬前和早春萌芽前取1年生枝條上的腋芽∞],甜櫻桃紅燈,大紫,雷尼爾等["],XephyeC],毛櫻桃[皆取冬季休眠芽作外植體,烏皮櫻桃[2,大櫻桃矮化砧木GiselaCo]取休眠枝條作外植體培養(yǎng)成苗.這些

6、研究表明.不同的櫻桃品種莖尖,莖段培養(yǎng)所選用的外植體材料不同.這是由不同品種的生理特性所決定的.1.2.4外植體的消毒消毒方法因植物材料的種類和采集時期不同而不同,但一般的方法為:①外植體的前處理,即將外植體浸入稀釋的肥皂液中浸泡,再用軟刷或油畫筆輕輕刷洗外植體表面,除去外植體表面的塵土和部分菌體,然后用自來水沖洗.除去皂液和污物[2.②接種前的消毒,先用7O～75乙醇浸蘸1O～50s,再用0.1HgCI2浸泡5～10min,最后用無菌水沖洗4～5次.用0.1HgCI.在消毒時間為5～15rain的范圍內,其滅菌效果相同,以滅菌5rain最好,且試管苗增殖比較容易.1.2.5培養(yǎng)基在離體培養(yǎng)

7、條件下,不同的植物要求不同的培養(yǎng)基.同一種培養(yǎng)物在不同的培養(yǎng)基上又有不同的表現(xiàn).莖尖,莖段培養(yǎng)多以MS為基本培養(yǎng)基,但也有L培養(yǎng)基釘,Fl'培養(yǎng)基[鎬],WPM培養(yǎng)基,Knop培養(yǎng)基,sc培養(yǎng)基等["釘,總的看來,MS培養(yǎng)基或加以改良的MS培養(yǎng)基即可滿足需要.69蔗糖是常用的碳源[2,也可用白糖代替蔗糖以降低成本[50圳.周素平等【6用食用冰糖代替蔗糖,對毛櫻桃試管苗的生長,生根率和根長均無明顯差異,且可大大