HPLC法測(cè)定扶桑花中槲皮素的含量.doc

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1、HPLC法測(cè)定扶桑花中槲皮素的含量【摘要】目的建立扶?；ㄖ虚纹に氐暮繙y(cè)定方法。方法采用HPLC法，色譜柱為DikmaplatisilODS柱(250mm×4.6mm,5μm)，流動(dòng)相為甲醇0.5%磷酸水溶液(體積比30∶70)，流速1.0mL·min-1，柱溫30℃，檢測(cè)波長360nm。結(jié)果槲皮素進(jìn)樣量在0.0416～0.416μg范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系，平均回收率為98.95%，RSD為1.09%(n=6)。結(jié)論該方法操作簡便、快速、準(zhǔn)確，可用于扶?；ㄋ幉牡馁|(zhì)量控制?！娟P(guān)鍵詞】扶?；?槲皮素;高效液相色譜法　Abstract:ObjectiveTodev

2、elopamethodforthedeterminationofquercetininFlosHibisciRosaesinensis.MethodsHPLCwasperformedusingaDikmaplatisilODScolumn(250mm×4.6mm,5μm)withmethanol0.5%phosphoricacidsolution(30∶70)asmobilephaseunderaflowrateof1.0mL·min-1.Thecolumntemperaturewas30℃,andthedetectionwavelengthwas360nm.Re

3、sultsThecalibrationcurveofquerceinwaslinearwithintherangeof0.0416-0.416μg,andtheaveragerecoverywas98.95%withtheRSDof1.09%(n=6).ConclusionThismethodisconvenient,reproducibleandaccurate,andcanbeusedinqualitycontrolofFlosH.Rosaesinensis.　　Keywords:FlosHibisciRosaesinensis;quercetin;HPLC　

4、扶?；?FlosHibisciRosaesinensis)為錦葵科植物朱槿(HibiscusrosasinensisL.)的花，原產(chǎn)于我國，現(xiàn)廣泛栽培于熱帶、亞熱帶地區(qū)，是我國及印度、斯里蘭卡等國家和地區(qū)常用的民間藥。據(jù)本草記載，扶?；ㄖ髦畏螣峥人?、咯血、鼻衄、崩漏、白帶、痢疾、赤白濁、癰腫毒瘡等癥[1]。近年來，印度、巴基斯坦等國家對(duì)扶桑花抗生育(抑制排卵和著床、抑制精子生成)、抗腫瘤、抗痙攣、促生發(fā)、保護(hù)心臟、降血壓、降血糖、降血脂[2～5]等活性進(jìn)行了廣泛研究，揭示了扶?；O其重要的開發(fā)價(jià)值。我國對(duì)扶?；ǖ乃帉W(xué)研究和臨床應(yīng)用較少，其豐富的資源亟需開發(fā)?！　∧?/p>

5、前，我國扶?；▋H有地方質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，且僅對(duì)藥材的基源和性狀進(jìn)行鑒別[6]，尚無藥效成分含量測(cè)定等方面鑒別的報(bào)道。扶?；ê卸喾N黃酮類化合物[1]，其中，槲皮素及其糖苷具有抗氧化、抗腫瘤、抗流感、抗衰老、抗血栓、降血壓、護(hù)心等作用[7]，是扶桑花的主要藥效成分之一，主要以槲皮素3二葡萄糖甙、槲皮素3，7二葡萄糖甙等形式存在[1]。槲皮素的含量測(cè)定主要采用高效液相色譜法，但因槲皮素的存在形式不同而測(cè)定的色譜條件各異[8,9]。本文對(duì)扶?；ㄖ虚纹に氐奶崛〖癏PLC測(cè)定方法進(jìn)行分析，為完善扶?；ㄋ幉馁|(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、擴(kuò)大其臨床應(yīng)用奠定基礎(chǔ)?！　?儀器與試藥4　　儀器：上海天美LC

6、2000型高效液相色譜系統(tǒng)(LC2030紫外檢測(cè)器、T2000P色譜工作站);德國賽多利斯BP211D精密電子天平?！　≡囁帲洪纹に貙?duì)照品(中國藥品生物制品檢定所，批號(hào)100081200406，供含量測(cè)定用)。扶?；ú勺詮V州、中山、惠州等地，經(jīng)廣東藥學(xué)院中藥鑒定學(xué)教研室劉基柱老師鑒定為錦葵科木槿屬植物扶桑的花。樣品批次見表1，色譜條件分析采用批次2。提取用試劑均為分析純，色譜分析用甲醇、磷酸為色譜純，水為超純水。表1扶?；悠放巍　?方法與結(jié)果　　2.1色譜條件　　色譜柱為DikmaplatisilODS色譜柱(250mm×4.6mm，5μm)，流動(dòng)相為甲醇0.

7、5%磷酸水溶液(體積比30∶70)，流速1.0mL·min-1，檢測(cè)波長360nm，柱溫30℃，進(jìn)樣量20μL。理論板數(shù)按槲皮素計(jì)算大于5000，分離度大于1.5。色譜圖見圖1?！　?.2溶液的制備　　2.2.1對(duì)照品溶液的制備精密稱取槲皮素對(duì)照品適量，加甲醇制成104μg·mL-1的溶液，即得?！　?.2.2供試品溶液的制備將扶桑花藥材陰干，粉碎，過3號(hào)篩，取粉末約1g，精密稱定，加甲醇50mL，加熱回流1h，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)?0%鹽酸15mL溶解，加熱回流1h，迅速冷卻，用石油醚萃取3次，每次15mL，合并水相，蒸干，殘?jiān)蛹状既芙獠⒍ㄈ葜?/p>