農(nóng)藥殘留快速檢測技術綜述

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1、農(nóng)藥殘留快速檢測技術研究進展鄧敏姬鄧敏航鄭琪黃卿儀易蜀婷摘要：主要綜述了農(nóng)藥殘留檢測技術中目前廣泛應用的酶抑制檢測法、酶聯(lián)免疫檢測法、活體生物測定法、生物傳感器法和儀器分析法等快速測定方法的原理、優(yōu)缺點及其進展，指出了農(nóng)藥殘留快速檢測技術中存在的問題和發(fā)展方向。關鍵詞：農(nóng)藥殘留；酶抑制；酶聯(lián)免疫；活體生物測定；生物傳感器；速測Abstract：Summaryofthepesticideresiduesinthemaindetectiontechniqueiscurrentlywidelyusedintheenzymeinhibitionassay,enzyme-l

2、inkedimmunosorbentassay,invivobioassay,biologicalsensorsandanalysisequipment,suchastherapiddeterminationoftheprinciples,strengthsandweaknessesandprogress.Pointedoutthetechnologyforrapiddetectionofpesticideresidueproblemsanddevelopmentdirection.Keywords:pesticideresidues;enzymeinhibito

3、r;enzyme-linkedimmunosorbentassay;vivobioassay;biologicalsensors;speedtest正文：長期以來，由于人們在防治農(nóng)作物病蟲害過程中不合理和超劑量使用化學農(nóng)藥，導致農(nóng)產(chǎn)品中的農(nóng)藥殘留量越來越高，影響了農(nóng)產(chǎn)品的出口和人民的健康，也破壞了農(nóng)業(yè)生態(tài)環(huán)境。當前世界各國政府正在不斷加強農(nóng)藥殘留的監(jiān)測工作，對農(nóng)藥殘留檢測靈敏度和效率的要求逐步提高，對快速檢測分析新技術的開發(fā)也日益重視。常規(guī)的農(nóng)藥殘留分析方法如液相色譜法(HPLC)、氣相色譜法(GC)、質譜(MS)法等，均存在著樣品前處理復雜、儀器設備昂貴、分析費

4、時長、要求熟練的技術人員才能完成等問題。由于這些方法不能滿足樣品現(xiàn)場快速檢測的要求，迫使人們運用新的原理和方法去開發(fā)特異性強、靈敏度高、方便快捷、準確安全的快速檢測新技術。本文主要綜述了目前廣泛應用的酶抑制法、酶聯(lián)免疫分析方法、活體生物測定方法和生物傳感器法等快速測定方法的研究進展。1．酶抑制法1.1酶抑制法是一種簡便、靈敏、經(jīng)濟的快速檢測方法，是相對成熟的一種對部分農(nóng)藥進行殘留速測技術。它基于有機磷農(nóng)藥對酶活性的抑制作用，適用于有機磷和氨基甲酸酪類農(nóng)藥。[1,2]在目前條件下，酶抑制法是凈化蔬菜市場的一種有效可行的方法，其優(yōu)點是能對抑制膽堿酯酶的農(nóng)藥品種進行快速

5、靈敏的檢測、樣品前處理簡單、檢測時間短、所需儀器設備簡單、適用于現(xiàn)場測定。缺點是使用的酶基質和顯色劑有一定的特異性，需控制的條件比較多。[3]1.2影響因素[1]：1)溫度和PH對酶促反應的影響:酶的活性都隨著溫度的升高先升高后降低;2)時間對酶促反應的影響；3）溫度和農(nóng)藥品種對農(nóng)藥抑制作用的影響:在一定的溫度范圍內(nèi)(25-45℃)植物酯酶和乙酰膽堿酯酶受到農(nóng)藥的抑制作用都是隨著溫度的升高而增強；4）時間對農(nóng)藥抑制作用的影響:抑制時間越長，農(nóng)藥的抑制作用越強。1.3酶抑制法根據(jù)所使用的酶的種類不同可大致分為兩類:膽堿酯酶法和植物酯酶法。[1]1.3.1膽堿酯酶法原

6、理：乙酰膽堿酯酶(AChE)抑制法的檢測原理以乙酰膽堿為底物，在AChE的作用下，乙酰膽堿水解成膽堿和乙酸，膽堿和二硫對硝基苯甲酸(DTNB)產(chǎn)生顯色反應，使反應液呈黃色。[1]locatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthenextdayfocusedontheassassination.Linping,Zhejiang,1ofwhichliquorwinemasters(WuzhensaidinformationisCarpenter),whogotAfewbayonets,duetomissedfatal,whennight

7、came特點：操作簡單測定所需的時間短不需要貴重的儀器費用較低適合于現(xiàn)場的快速檢測，AChE抑制法雖然在回收率和精密度上較經(jīng)典方法差一些，但可以滿足半定量的要求適合于我國的小規(guī)模分散式的農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)與經(jīng)銷體系。另外，各種農(nóng)藥因其化學結構和作用機理不同對AChE的抑制能力也不相同，氧化型有機磷的抑制能力較強，AChE抑制法對其的靈敏度較高最小檢出濃度較低；而硫代型有機磷的抑制能力較差，最小檢出濃度較高；但辛硫磷因為含有肟基選擇毒力大大增強最小，檢出濃度較低；對氨基甲酸酯類農(nóng)藥的檢測靈敏度相對都比較高。1.3.1.1比色法[4]比色法是酶抑制法農(nóng)藥殘留快速檢測測定技術中

8、最常采用的