壯筋續(xù)骨湯對大鼠成骨細(xì)胞堿性磷酸酶比活性、骨鈣素含量和cbfal基因表達(dá)影響的研究

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1、壯筋續(xù)骨湯對大鼠成骨細(xì)胞堿性磷酸酶比活性、骨鈣素含量和Cbfαl基因表達(dá)影響的研究王力鄭甦楊鳳云鄧運明王麗華熊興勇(江西中醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院關(guān)節(jié)骨科,江西南昌330006)摘要:目的探討壯骨續(xù)筋湯對大鼠成骨細(xì)胞功能態(tài)的影響方法采用含藥血清的方法體外培養(yǎng)成骨細(xì)胞,分壯骨續(xù)筋湯組、對照組,觀察各組堿性磷酸酶比活性、骨鈣素含量及Cbfαl基因的表達(dá);結(jié)果壯骨續(xù)筋湯組的堿性磷酸酶比活性、骨鈣素含量及Cbfαl基因的表達(dá)強(qiáng)于對照組(P<0.05)。結(jié)論壯骨續(xù)筋湯能促進(jìn)成骨細(xì)胞功能態(tài)的發(fā)揮。關(guān)鍵詞:壯骨續(xù)筋湯成骨細(xì)

2、胞堿性磷酸酶比活性骨鈣素Cbfαl基因【Abstract】Objective:TostudytheeffectofZhuangguXutongrecipetothefunctionoftheSDrats,osteoblast.Methods:Accordingtothedrugcontainingserummethods,theosteoblastofSDratswerecultured.Theyweredividedrandomlyintotwogroups:ZhuangguXutongrecip

3、egroupandcomparisongroup,thespecificactivityofalkalinityphosphatase(ALP),thecontentsofboneglacontainingprotein(BGP)andtheexpressionofcorebindingfactorα1wereobservedineachgroup;Results:thespecificactivityofALP,thecontentsofboneglacontainingprotein(BGP)a

4、ndtheexpressionofcorebindingfactorα1ofZhuangguXutongrecipegroupwerehigherthancomparisongroup(P<0.05).Conclusion:ZhuangguXutongcanincreasethefunctionoftheSDrats,osteoblast.Keywords:ZhuangguXutongrecipeOsteoblastSpecificactivityofalkalinityphosphataseBon

5、eglacontainingproteinCorebindingfactorα1體外培養(yǎng)細(xì)胞,有兩種基本狀態(tài):即增殖態(tài)和功能態(tài)。功能態(tài)為細(xì)胞進(jìn)行特定功能活動如分泌、傳導(dǎo)、吞噬、收縮等的時期,是細(xì)胞的第二種生存狀態(tài)。本研究以中藥壯筋續(xù)骨湯作為研究對象,采用中藥血清藥理學(xué)的方法體外培養(yǎng)成骨細(xì)胞,觀察其對堿性磷酸酶比活性、骨鈣素含量及Cbfal基因的表達(dá)等功能態(tài)的影響。1實驗材料1.1儀器與試劑倒置相差顯微鏡(日本OLYMPUS)、CO2培養(yǎng)箱(德國Heraeus);DU650紫外分光光度計(美國BECK

6、MAN);α-MEM(HyClone)、新生牛血清(NCS,HyClone)、青-鏈霉素溶液(HyClone)、HEPES(上海生工)、胰蛋白酶(1:250,AMRESCO)、β-甘油磷酸_______________________________________________________________________________基金項目:江西省自然科學(xué)基金課題(課題編號:0640170)locatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthenextdayf

7、ocusedontheassassination.Linping,Zhejiang,1ofwhichliquorwinemasters(WuzhensaidinformationisCarpenter),whogotAfewbayonets,duetomissedfatal,whennightcame鈉(β-GP,Sigma)、地塞米松(Sigma)、VitC(上?;瘜W(xué)試劑公司)、堿性磷酸酶(ALP)和總蛋白試劑盒(南京建成生物工程研究所)、骨鈣素(BGP)放免試劑盒(中國原子能科學(xué)研究所)、DU6

8、50紫外分光光度計(美國BECKMAN);9600基因擴(kuò)增儀(美國PE生物系統(tǒng)公司);GELDOC2000凝膠成像系統(tǒng)(美國BIORAD);MILLI-QBiocel超純水裝置(美國MILLIPORE);64R低溫高速離心機(jī)(美國BECKMAN);TRIZOL試劑(華美);Taq酶(上海生工);反轉(zhuǎn)錄酶(上海生工);引物(上海生工合成)等。1.2壯筋續(xù)骨湯的制備當(dāng)歸10g、菟絲子20g、西黨20g、補(bǔ)骨脂20g、劉寄奴20g、川芎10g、白芍10g、杜仲10g、桂枝1

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