丹參酮IIA對(duì)大鼠肺缺血再灌注損傷細(xì)胞凋亡及相關(guān)蛋白表達(dá)的影響.doc

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1、丹參酮IIA對(duì)大鼠肺缺血再灌注損傷細(xì)胞凋亡及相關(guān)蛋白表達(dá)的影響【摘要】目的研究丹參酮IIA對(duì)大鼠肺缺血再灌注損傷過程中細(xì)胞凋亡以及相關(guān)蛋白表達(dá)的干預(yù)作用。方法健康SD大鼠60只隨機(jī)分成四組，除對(duì)照組外，均建立肺缺血再灌注模型，其中兩組分別加丹參酮IIA和生理鹽水干預(yù)，檢測肺組織濕/干重比、細(xì)胞凋亡率、Bcl2及Caspase3的表達(dá)等指標(biāo)。結(jié)果肺缺血再灌注組與對(duì)照組相比，肺組織濕/干重比明顯增高，流式細(xì)胞儀檢測出現(xiàn)大量的凋亡細(xì)胞，證明該模型制備是成功的;肺缺血再灌注組顯示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的凋亡，Bcl2降低和Caspase3增高與對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;丹參酮組與未干預(yù)組和生理

2、鹽水組比較，Bcl2增高和Caspase3降低均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論丹參酮能夠改善由肺缺血再灌注引起的細(xì)胞凋亡，其機(jī)制可能與丹參酮能干預(yù)肺組織Bcl2和Caspase3蛋白的表達(dá)有關(guān)?！娟P(guān)鍵詞】肺;缺血再灌注;凋亡;Bcl2;Caspase3;丹參酮　　ABSTRACT：ObjectiveToinvestigatetheeffectsofTanshinoneonapoptosisandtherelatedproteinsduringlungischemiareperfusioninjury(LIRI)ofrats.MethodsSixtyratswererandomlyd

3、ividedintofourgroups.ApoptoticcellsinlungtissuewasinspectedbyflowcytometryandHematoxylinandEosinstaining,andtheexpressionofBcl2andcaspase3wasdetectedbyRTPCRandwesternblot.ResultsComparedwithnormalcontrolgroup,apoptoticcellsandtheexpressionofBcl2andCaspase3inLIRImodelgroupweremarkedlyincre

4、ased(P<0.01).Comparedwithmodelgroup,tanshinonecouldsignificantlyinhibitecellapoptosisandtheexpressionofapoptosisrelatedproteinsinlungtissues(P<0.05).ConclusionTanshinonecanprotectlungfromischemiareperfusioninjurybymodulatingtheexpressionofapoptosisrelatedproteinsBcl2andCaspase3.　　KEY

5、WORDS:Lung;Ischemiareferfysioninjury;Apoptosis;Bcl2;Caspase3;Tanshinone　　肺缺血再灌注損傷(lungischemiareperfusioninjury，LIRI)過程中細(xì)胞凋亡過度是導(dǎo)致肺損傷的重要原因之一，凋亡作為LIRI的早期事件，參與了LIRI的病理生理過程[1,2]。丹參酮IIA因其具有毒副作用小、“多靶效應(yīng)”等特點(diǎn)而廣泛應(yīng)用于臨床，尤其在防治缺血再灌注(ischemiareperfusion，IR)損傷方面，具有明顯的保護(hù)作用[3]。本實(shí)驗(yàn)首先建立大鼠肺IR模型，然后觀察丹參酮IIA對(duì)LIRI后肺

6、組織Bcl2、Caspase3表達(dá)和細(xì)胞凋亡的影響，探討丹參酮IIA對(duì)LIRI中細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用及其可能機(jī)制?！　?材料與方法4　　1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組　　成年雄性健康SD大鼠(湖北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供)60只，體質(zhì)量300±25g。隨機(jī)分為正常對(duì)照組(A組，n=6)，除不作缺血處理外，余同其它組;肺缺血再灌注組(B組，n=18);缺血再灌注加生理鹽水組(C組，n=18)，腹腔注射生理鹽水，缺血1h，再灌3h;肺缺血再灌注加丹參酮組(D組，n=18)，腹腔注射丹參酮，劑量為15mg/kg,缺血1h，再灌3h。B、C、D每組又分為三個(gè)亞組，再灌時(shí)間分別為1h、2h、3h，每個(gè)亞組6

7、只大鼠?！　?.2大鼠肺缺血再灌注模型的建立　　實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷闹苽洳捎肊ppinger方法，參考Sekido等模型[4]。取健康SD大鼠，20%水合氯醛(300～350)mg/kg腹腔注射麻醉后，仰臥位固定。行頸部正中切口，分離出氣管、右側(cè)頸靜脈和頸動(dòng)脈，氣管切開、插管，接動(dòng)物呼吸機(jī)行機(jī)械通氣(吸入室內(nèi)空氣，呼吸頻率40次，潮氣量10ml/kg，吸呼比為1∶2)，右側(cè)頸靜脈插管、固定，接微量注射泵;然后經(jīng)左側(cè)第5肋間開胸，游離左肺門，靜脈注射肝素100U。靜息5min后，