醫(yī)藥學(xué)臨床醫(yī)學(xué)畢業(yè)論文 abc-elisa定量測(cè)定紅細(xì)胞趨化因子受體及其意義

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1、湖南師范大學(xué)本科畢業(yè)論文考籍號(hào):XXXXXXXXX姓名:XXX專業(yè):醫(yī)藥學(xué)臨床醫(yī)學(xué)論文題目:ABC-ELISA定量測(cè)定紅細(xì)胞趨化因子受體及其意義指導(dǎo)老師:XXX二〇一一年十二月十日作者:張樂之,盧曉丹,龔燕芳,郭峰【摘要】目的建立ABC-ELISA定量測(cè)定紅細(xì)胞趨化因子受體(ECKR)的方法并探討其臨床意義。方法分離一定數(shù)量紅細(xì)胞與IL-8結(jié)合,離心后取上清液用ABC-ELISA法檢測(cè)IL-8含量,通過公式計(jì)算紅細(xì)胞趨化因子受體結(jié)合活性;對(duì)該法檢測(cè)IL-8的靈敏度、精密度、準(zhǔn)確度進(jìn)行了探討,并對(duì)31例正常人,25例惡性腫瘤患者和33例銀屑病患者的ECKR進(jìn)行了測(cè)定。

2、結(jié)果該法檢測(cè)IL-8的靈敏度為15.6pg/ml。精密度批內(nèi)平均CV4.69%;批間平均CV9.79%,準(zhǔn)確度平均回收率為97%。31例正常人ECKR為(52.96±10.45)%;25例惡性腫瘤ECKR為(46.07±13.33)%;33例銀屑病人ECKR為(46.87±10.28)%。經(jīng)統(tǒng)計(jì),惡性腫瘤患者和銀屑病患者ECKR均比正常人ECKR要低(P0.05)。結(jié)論該法是一種簡便的定量測(cè)定ECKR的新方法,對(duì)研究紅細(xì)胞免疫、趨化因子及其受體在疾病防治和發(fā)病機(jī)理中的作用有一定價(jià)值?!娟P(guān)鍵詞】紅細(xì)胞趨化因子受體;鏈霉親和素生物素-ELISA;白介素-8;紅細(xì)胞免疫【

3、Abstract】ObjectiveTodevelopaquantitativeABC-ELISAandtoinvestigatetheclinicalsignificanceforhumanerythrocytechemokinereceptor.MethodsIsolatederythrocytesboundtoIL-8.AftercentrifugeIL-8levelsweremeasuredwithABC-ELISAinthesupernatant.Activityoferythrocytechemokinereceptorwerecalculatedbyf

4、ormula.ResultsTheminimumdetectablelimitwas15.6pg/ml.Precision:Themeancoefficientsofvariationwere4.69%forinter-assayand9.79%forintra-assay,respectively.Accuracy:Themeanrecoveryratewas97%.In31normaladults,theECKRbindingactivity(±s%)was52.96±10.45.In25tumors,33psoriasises,itwas46.07±13.33

5、,46.87±10.28respectively.TheECKRbindingactivityofthetumorsandthepsoriasisesdecreasedsignificantly(P0.05)compareswithnormalcontrolgroupbystatistics.ConclusionAquantitativeABC-ELISAforerythrocytechemokinereceptorisasimpleandnewmethod.ThedetectionoftheECKRbindingactivityhasavaluetostudyRB

6、Cimmune,chemokineanditsreceptorinpreventing,treatingandthepathogenesisofthedisease.【Keywords】erythrocytechemokinereceptor;ABC-ELISA;interleukin-8;erythrocyteimmune1982年郭峰[1]在國內(nèi)首先建立了測(cè)定紅細(xì)胞免疫粘附功能的方法,并證明紅細(xì)胞的免疫粘附功能主要是通過CR1實(shí)現(xiàn)的。該法簡便易行,沿用至今。二十年來,紅細(xì)胞免疫研究逐漸深入,已發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞表達(dá)多種天然免疫受體和物質(zhì),如CR1、CR3、CD44、CD

7、58、CD59、DAF、SOD酶和趨化因子受體(CKR)等,其中每個(gè)紅細(xì)胞上的紅細(xì)胞趨化因子受體(ECKR)表達(dá)的數(shù)量比CR1要多[2],但對(duì)ECKR的作用卻知之甚少。因此我們建立了ABC-ELISA定量測(cè)定ECKR方法并初步應(yīng)用于臨床,現(xiàn)報(bào)告如下。1材料與方法1.1材料1.1.1主要實(shí)驗(yàn)試劑和儀器人重組白介素-8(IL-8)純品(北京醫(yī)科大學(xué)分子免疫室產(chǎn)品);人鏈霉親和素生物素-ELISA(ABC-ELISA)試劑盒(法國Diaclone公司產(chǎn)品);微晶纖維素(上海趙屯藥廠產(chǎn)品);α-纖維素(浙江湖州食品化工聯(lián)合公司產(chǎn)品);淋巴細(xì)胞分離液(上海試劑二廠產(chǎn)品);

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