小球藻多糖的分離純化和組成分析

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1、第!"卷第#期大連水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報(bào)$%&’!"(%’#!))*年+月,-./(01-230140(24567/475.(4$7/54895:;’!))*·研究簡(jiǎn)報(bào)·文章編號(hào)：")))<++=>（!))*）)#<)!+?<)#小球藻多糖的分離純化和組成分析"!!#李亞清，@楊海波，@劉@艷，@王心滿(mǎn)（"’大連理工大學(xué)精細(xì)化工國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，遼寧大連""*)"!；!’大連大學(xué)環(huán)境與化學(xué)工程學(xué)院，遼寧大連""**!!；#’遼寧省朝陽(yáng)師范高等專(zhuān)科學(xué)校生物化學(xué)工藝系，遼寧朝陽(yáng)"!!)))）@摘要：采用凍結(jié)<融化方法，用冷水提取海水小球藻!"#$%&##’A;’多糖，多糖經(jīng)除蛋白、乙醇

2、分級(jí)沉淀、柱層析等一系列步驟處理后，得到組分均一的小球藻多糖（簡(jiǎn)稱(chēng)BC5D<"）。將BC5D<"完全酸水解，用高效陰離子液相色譜對(duì)其溶液進(jìn)行分析，結(jié)果表明：組成多糖BC5D<"的單糖有3<巖藻糖、3<鼠李糖、3

3、細(xì)胞、增強(qiáng)機(jī)體免疫力、抵抗外來(lái)疾病的入侵、促進(jìn)人體受傷組織修復(fù)等作用，還能防止胃潰瘍、高血壓和心腦血管疾病的發(fā)生，是目前國(guó)內(nèi)外研究開(kāi)發(fā)的熱點(diǎn)。多糖是小球藻提取液中眾多活性成分之一，目［"

4、!<氨基葡萄糖均由美國(guó)5QROJ公司生產(chǎn)，其它試劑或溶劑均為0B5級(jí)，由比利時(shí)0PN%A公司生產(chǎn)。!#$"方法"G!G"@分離純化@"）將生長(zhǎng)至平衡期的小球藻液離心（#=))NSOQT）=OQT，獲得新鮮的小球藻藻泥；!）向藻泥中加入=倍體積的去離子水，置于冰箱（

5、數(shù)為+=V），所得的沉淀物即為小球藻粗多糖；*）將粗多糖溶于水，再用體積分?jǐn)?shù)分別為")V、#)V、=)V的乙醇進(jìn)行分級(jí)沉淀，最終得到#個(gè)級(jí)別的多糖，記為BC50、BC5D和BC5B（BC5為英文BI&%N:&&J;%&WAJPPIJNQK:的縮寫(xiě)），其中BC5D的含量較大。取一定量的BC5D加入適量的蒸餾水至完全溶解，用5:;IJK:LM<=)（柱型："G=POX>=G)PO）柱層析，進(jìn)一步純化。上樣后用)G)!O%&S1的(JB&溶液洗脫，流速為)G#O1SOQT，每管收集#O1，［#］然后用蒽酮<硫酸法跟蹤檢測(cè)。收集含糖部分的洗脫液，經(jīng)蒸餾水透析、濃縮，用體積分?jǐn)?shù)為

6、@收稿日期：!))?Y"!Y!=@基金項(xiàng)目：遼寧省博士科研啟動(dòng)基金資助項(xiàng)目（))")=+）@作者簡(jiǎn)介：李亞清（"+*?<），女，副教授。7

7、%）6/7.法。檢測(cè)儀器為：6/7.島津高效液相色譜儀（7.2$&89:/）；;89<=0%5$5示差折光檢測(cè)儀；色譜柱為90>?5&&不銹鋼柱；記錄儀為島津.2=,8。多糖./012$樣品的濃度為%@(7，進(jìn)樣量為%&!7，流速為$)7()*+，流動(dòng)相為$3&@(7的AB.C。$3%3D4紫外光譜和紅外光譜的測(cè)定4用>1’法壓片，然后用AE.F7<92",&型紅外光譜儀測(cè)定；用G:2H""1型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定多糖./012$飽和溶液的吸光值，空白溶液為蒸餾水。［"］$3%354多糖的組成測(cè)定4$）蛋白質(zhì)和淀粉的檢測(cè)4用茚三酮法檢測(cè)