SNT2099-2008進(jìn)出口食品中綠膿桿菌檢測(cè)方法.pdf

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1、版權(quán)所有·禁止翻制、電子傳閱、發(fā)售中華人民共和國(guó)出入境檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)犛犖／犜２０９９—２００８進(jìn)出口食品中綠膿桿菌檢測(cè)方法犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犘狊犲狌犱狅犿狅狀犪狊犪犲狉狌犵犻狀狅狊犪犻狀犳狅狅犱犳狅狉犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋２００８０７１７發(fā)布２００９０２０１實(shí)施中華人民共和國(guó)發(fā)布國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局食品伙伴網(wǎng)http://www.foodmate.net版權(quán)所有·禁止翻制、電子傳閱、發(fā)售犛犖／犜２０９９—２００８前言本標(biāo)準(zhǔn)的附錄Ａ、附錄Ｂ均為規(guī)范性附錄。本標(biāo)準(zhǔn)由國(guó)家認(rèn)證認(rèn)可監(jiān)督管理委員會(huì)提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起

2、草單位：中華人民共和國(guó)福建出入境檢驗(yàn)檢疫局、中國(guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：鄭晶、黃曉蓉、趙貴明、翁國(guó)柱、吳蕓蕓、鄭麟毅、陳彬、邵碧英。本標(biāo)準(zhǔn)系首次發(fā)布的出入境檢驗(yàn)檢疫標(biāo)準(zhǔn)。Ⅰ食品伙伴網(wǎng)http://www.foodmate.net版權(quán)所有·禁止翻制、電子傳閱、發(fā)售犛犖／犜２０９９—２００８進(jìn)出口食品中綠膿桿菌檢測(cè)方法１范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品中綠膿桿菌的定性和定量檢測(cè)方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于各類食品中的綠膿桿菌檢測(cè)，可參考此法檢測(cè)水的綠膿桿菌。２規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過(guò)本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后

3、所有的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵(lì)根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。ＧＢ／Ｔ４７８９．２８—２００３食品微生物學(xué)檢驗(yàn)染色法、培養(yǎng)基和試劑ＧＢ／Ｔ６６８２分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法３術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。３．１綠膿桿菌屬假單胞菌屬（狆狊犲狌犱狅犿狅狀犪狊）亦名為銅綠假單胞菌，具莢膜、鞭毛，為無(wú)芽胞的革蘭氏陰性桿菌，能分解蛋白質(zhì)，發(fā)酵糖類能力較低，能產(chǎn)生兩種水溶性色素：一種是綠膿菌素，為藍(lán)綠色的吩嗪類化合物，無(wú)熒光性，另一

4、種為熒光素，呈綠色。４設(shè)備和材料４．１恒溫培養(yǎng)箱：３６℃±１℃、４２℃。４．２顯微鏡：帶油鏡頭。４．３均質(zhì)器。４．４高壓滅菌器。４．５天平：精度０．１ｇ。４．６ＶＩＴＥＫ全自動(dòng)微生物鑒定系統(tǒng)或類似設(shè)備。注：ＶＩＴＥＫ是由法國(guó)生物梅里埃公司提供的產(chǎn)品的商品名。給出這一信息是為了方便本標(biāo)準(zhǔn)的使用者，并不表示對(duì)該產(chǎn)品的認(rèn)可。如果其他等效產(chǎn)品具有相同的效果，則可使用這些等效產(chǎn)品。４．７吸管：１ｍＬ，分刻度０．１ｍＬ；１０ｍＬ，分刻度１ｍＬ。４．８可調(diào)移液器：１０μＬ～１００μＬ，１００μＬ～１０００μＬ。４．９試管：１５ｍｍ×１００ｍｍ。４．１０滅

5、菌平皿：直徑９０ｍｍ，底部平整的玻璃或一次性塑料滅菌平皿。４．１１滅菌的樣品處理器具：鑷子、剪刀、勺子。４．１２質(zhì)控菌株：綠膿桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株ＡＴＣＣ９０２７，惡臭假單胞菌ＡＴＣＣ４９１２８或其他經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的具有相同生物學(xué)特征的同類菌株。５培養(yǎng)基和試劑除另有規(guī)定外，所用試劑均為分析純，試驗(yàn)用水應(yīng)符合ＧＢ／Ｔ６６８２的規(guī)定。５．１ＳＣＤＬＰ增菌液：見(jiàn)第Ａ．１章。５．２磷酸鹽緩沖稀釋液：見(jiàn)第Ａ．２章。１食品伙伴網(wǎng)http://www.foodmate.net版權(quán)所有·禁止翻制、電子傳閱、發(fā)售犛犖／犜２０９９—２００８５．３假單胞菌ＣＦＣ選擇性培養(yǎng)基：

6、見(jiàn)第Ａ．３章。５．４假單胞菌ＣＮ選擇性培養(yǎng)基：見(jiàn)第Ａ．４章。５．５氧化酶試驗(yàn)：按ＧＢ／Ｔ４７８９．２８—２００３中３．１８規(guī)定。５．６乙酰胺培養(yǎng)基：見(jiàn)第Ａ．５章。５．７葡萄糖酸鹽培養(yǎng)基：見(jiàn)第Ａ．６章。５．８精氨酸雙水解酶培養(yǎng)基：見(jiàn)第Ａ．７章。５．９硝酸鹽蛋白胨水培養(yǎng)基：見(jiàn)第Ａ．８章。５．１０明膠培養(yǎng)基：見(jiàn)第Ａ．９章。５．１１賴氨酸脫羧酶培養(yǎng)基；見(jiàn)第Ａ．１０章。５．１２營(yíng)養(yǎng)瓊脂：見(jiàn)第Ａ．１１章。５．１３ＡＰＩ２０ＮＥ測(cè)試條。５．１４ＧＮＩ＋測(cè)試卡。注：ＡＰＩ２０ＮＥ測(cè)試條和ＧＮＩ＋測(cè)試卡是由法國(guó)生物梅里埃公司提供的產(chǎn)品的商品名。給出這一信息是

7、為了方便本標(biāo)準(zhǔn)的使用者，并不表示對(duì)該產(chǎn)品的認(rèn)可。如果其他等效產(chǎn)品具有相同的效果，則可使用這些等效產(chǎn)品。６檢驗(yàn)程序６．１方法提要食品中綠膿桿菌的檢驗(yàn)方法是通過(guò)選擇性增菌、分離、生化鑒定等方法對(duì)食品中可能存在的綠膿桿菌進(jìn)行定性和定量的檢驗(yàn)。６．２檢驗(yàn)程序綠膿桿菌的檢驗(yàn)程序見(jiàn)圖１。圖１綠膿桿菌檢驗(yàn)程序示意圖２食品伙伴網(wǎng)http://www.foodmate.net版權(quán)所有·禁止翻制、電子傳閱、發(fā)售犛犖／犜２０９９—２００８７檢驗(yàn)步驟７．１樣品的存放如為冷凍樣品，應(yīng)于２℃～５℃解凍，且不超過(guò)１８ｈ，若不能及時(shí)檢驗(yàn)，應(yīng)置于小于－１５℃保存。非冷凍的易

8、腐樣品應(yīng)盡可能及時(shí)檢驗(yàn)，若不能及時(shí)檢驗(yàn)，應(yīng)置于４℃冰箱保存，并在２４ｈ內(nèi)檢驗(yàn)。７．２綠膿桿菌定性檢驗(yàn)７．２．１按無(wú)菌操作取檢樣２５ｇ（２５ｍＬ）至２２５ｍＬＳＣＤＬＰ增菌液中，充