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《SNT2847-2011水貂阿留申病檢疫技術(shù)規(guī)范.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、版權(quán)所有·禁止翻制、電子發(fā)售中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)犛犖／犜２８４７—２０１１水貂阿留申病檢疫技術(shù)規(guī)范犙狌犪狉犪狀狋犻狀犲狆狉狅狋狅犮狅犾犳狅狉犪犾犲狌狋犻犪狀犱犻狊犲犪狊犲狅犳犿犻狀犽２０１１０２２５發(fā)布２０１１０７０１實施中華人民共和國發(fā)布國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局犛犖／犜２８４７—２０１１版權(quán)所有·禁止翻制、電子發(fā)售前言本標(biāo)準(zhǔn)按照ＧＢ／Ｔ１．１—２００９給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由國家認(rèn)證認(rèn)可監(jiān)督管理委員會提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：中華人民共和國吉林出入境檢驗檢疫局、中華人民共和國北京出入境檢驗檢疫局、中華人民共和國江蘇出入境檢驗檢疫局、中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究
2、所。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：王偉利、孟慶峰、柏亞鐸、肖成蕊、孟日增、石建平、姜焱、宋戰(zhàn)昀、閆喜軍、劉和平、羅雁非、王振國。Ⅰ犛犖／犜２８４７—２０１１版權(quán)所有·禁止翻制、電子發(fā)售水貂阿留申病檢疫技術(shù)規(guī)范１范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了水貂阿留申病的檢疫技術(shù)規(guī)范，包括病原分離鑒定、對流免疫電泳、ＰＣＲ及熒光ＰＣＲ等鑒別診斷技術(shù)。本標(biāo)準(zhǔn)適用于進(jìn)出境水貂的阿留申病檢疫、疫情監(jiān)測和流行病學(xué)調(diào)查。２規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。ＧＢ／Ｔ６６８２分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法３
3、臨床診斷３．１概況水貂阿留申病（ａｌｅｕｔｉａｎｄｉｓｅａｓｅ，ＡＤ）又稱漿細(xì)胞增多癥，是一種由主要侵害水貂免疫細(xì)胞的阿留申病毒（ａｌｅｕｔｉａｎｄｉｓｅａｓｅｖｉｒｕｓ，ＡＤＶ）引起的，導(dǎo)致自身免疫系統(tǒng)紊亂并逐漸衰竭，同時并發(fā)強烈的自身免疫的慢性傳染性疾病。３．２發(fā)病癥狀病貂精神沉郁，嗜睡，渴欲猛增，常在水槽中暴飲，食欲時好時壞；貧血，抓捕時齒齦易出血，可視黏膜蒼白，口腔黏膜、齒齦和軟腭上出現(xiàn)出血和潰瘍；排煤焦樣便，多死于尿毒癥，進(jìn)行性消瘦，生長緩慢，營養(yǎng)不良，體重減輕。病程數(shù)周、數(shù)月不等。個別貂具有神經(jīng)癥狀，表現(xiàn)抽搐、痙攣、步態(tài)蹣跚，共濟失調(diào)或后肢麻痹等癥狀。３．３病理變化血液
4、變化主要表現(xiàn)在漿細(xì)胞增多和血清丙種球蛋白量增加。丙種球蛋白可從正常貂的１ｇ／１００ｍＬ血清，增至４ｇ／１００ｍＬ～５ｇ／１００ｍＬ。病理剖檢變化死貂尸體高度消瘦，多數(shù)病例有腹水，表現(xiàn)肝變性或不同程度的腫脹，質(zhì)地增厚、淤血、呈紅褐色，實質(zhì)內(nèi)有小壞死灶；腎腫大，充血，表面散在斑點狀出血，高低不平，腎小球的基膜模糊不清，出現(xiàn)萎縮；脾和淋巴結(jié)顯著腫大，呈暗紅色；心臟擴張；肺氣腫、有出血點；腦膜充血。３．４流行病學(xué)病貂和隱性感染水貂是本病的傳染源，病毒通過糞便、唾液、尿液等途徑排除和擴散，通過消化道、呼吸道感染，也可通過胎盤直接傳染給后代。本病常年流行，沒有年齡、性別的明顯區(qū)別，成年水貂感染
5、率高于育成水貂，新生仔獸感染率較低，隨著月齡逐日增加，該病對母貂危害更大，病貂幾乎均以死亡告終。秋、冬交際變冷的季節(jié)，感染水貂的發(fā)病率和死亡率明顯高于其他季節(jié)。由于本病在臨床上主要是經(jīng)過緩慢，呈隱性感染較多，臨床癥狀不典型，且易與其他疾病相混淆，根據(jù)本病在流行病學(xué)、癥狀和病理變化只能作出初步診斷。進(jìn)一步確診須通過實驗室檢查。１犛犖／犜２８４７—２０１１版權(quán)所有·禁止翻制、電子發(fā)售４病原分離鑒定４．１儀器、試劑與材料４．１．１儀器生物安全柜、二氧化碳培養(yǎng)箱、倒置顯微鏡、高速冷凍離心機、組織勻漿器。移液器［移液器（２００μＬ～１０００μＬ、２０μＬ～２００μＬ）、吸管（５ｍＬ、１０ｍＬ
6、）］細(xì)胞培養(yǎng)瓶。４．１．２材料與試劑除特別說明以外，本標(biāo)準(zhǔn)所用試劑均為分析純，試驗用水應(yīng)符合ＧＢ／Ｔ６６８２分析實驗室用水規(guī)格。培養(yǎng)液、維持液、胰蛋白酶溶液（配制方法見Ａ．１～Ａ．５）、新生犢牛血清、青霉素、鏈霉素。４．１．３細(xì)胞貓腎傳代細(xì)胞（ＣＲＦＫ）。４．２病料采集與處理４．２．１組織臟器的采集與處理無菌取病貂的肝、腎、脾、腸細(xì)膜淋巴結(jié)等組織臟器各２ｇ，按１∶１０的比例用不含犢牛血清的ＤＭＥＭ培養(yǎng)液制成勻漿，反復(fù)凍融三次，３０００ｒ／ｍｉｎ離心３０ｍｉｎ，取上清液經(jīng)０．２２μｍ微孔濾膜過濾，加入抗菌素至終濃度為青霉素２００ＩＵ／ｍＬ，鏈霉素２００μｇ／ｍＬ，冷藏備用。４．２．２
7、糞便、尿、血清及全血樣品采集與處理４．２．２．１取糞便２ｇ，按１∶１０的比例用不含犢牛血清的ＤＭＥＭ培養(yǎng)液制成懸液，然后１２０００ｒ／ｍｉｎ，離心３０ｍｉｎ，取上清液經(jīng)０．２２μｍ微孔濾膜過濾，加入抗菌素至終濃度為青霉素２０００ＩＵ／ｍＬ，鏈霉素２０００μｇ／ｍＬ，冷藏備用。４．２．２．２取尿液樣品５ｍＬ，１２０００ｒ／ｍｉｎ離心３０ｍｉｎ，取上清液經(jīng)０．２２μｍ微孔濾膜過濾，加入抗菌素至終濃度為青霉素２０００ＩＵ／ｍＬ，鏈霉素２０００μｇ／ｍＬ，冷藏備用。４．２．２
