蜂膠對2型糖尿病大鼠腎臟的保護(hù)作用

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1、2008年第25卷增刊實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)LABOfLAToRY州IMALSCIENCE·45·蜂膠對2型糖尿病大鼠腎臟的保護(hù)作用劉浩1董娟1崔美芝2楊昕蕾2(哈爾濱醫(yī)科大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院1．檢驗(yàn)科，2．實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，哈爾濱150001)摘要：目的研究蜂膠對2型糖尿病大鼠腎臟的保護(hù)作用。方法大鼠喂高脂高糖飼料4W后腹腔注射鏈尿佐菌素(STZ)造模。將造模成功大鼠隨機(jī)分成兩組：2型糖尿病組(A組，繼續(xù)喂養(yǎng)上述高脂高糖飲食)和加蜂膠喂養(yǎng)組(B組，另加蜂膠喂養(yǎng)12W，0．99d。1只一)。另設(shè)正常大鼠對照組(c組，

2、僅喂基礎(chǔ)飼料)。分別于4、8、12w時(shí)測血糖、血肌酐、尿素氮、尿量、尿蛋白定量；處死大鼠后取左腎做病理切片光鏡下觀察腎組織變化。結(jié)果B組與A組比較：血糖、血肌酐、尿素氮、尿量、尿蛋白定雖均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P(0．01)，病理學(xué)觀察顯示B組大鼠腎組織的病理變化較A組大鼠輕微，但與C組比較仍存在病理改變。結(jié)論蜂膠有降血糖作用對2型糖尿病大鼠的腎臟具有保護(hù)作用。關(guān)鍵詞：蜂膠；2型糖尿病；大鼠；Wistar蜂膠(Propolis)是工蜂從植物嫩芽中有選擇地采集而來的樹脂、混入蜜蜂上腭分泌物及少量蜂蠟加工而成的粘

3、膠狀混合物。蜂膠的成分相當(dāng)復(fù)雜，用現(xiàn)代科學(xué)方法分析蜂膠中含有305種化合物，其中黃酮類71個(gè)、芳香酸及芳香酸酯類59個(gè)、氨基酸25個(gè)，同時(shí)還含有醛、醇、酚、甾體類、烴類?。因此蜂膠具有抗氧化增強(qiáng)免疫力、抗病原微生物、調(diào)節(jié)人體內(nèi)分泌、降低血糖、血脂、血壓、血液黏度、改善微循環(huán)、凈化血液清除自由基、促進(jìn)組織修復(fù)保肝護(hù)肝及抗癌等功效¨1。但是蜂膠對2型糖尿病腎病的作用如何鮮見報(bào)道，本文將動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果報(bào)道如下。1材料和方法1．1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與分組選擇健康的雄性Wismr大鼠36只，體重150～1609，由哈爾濱醫(yī)

4、科大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，許可證號為：SCXK黑20064914；實(shí)驗(yàn)完成地點(diǎn)為本院中心實(shí)驗(yàn)室，實(shí)驗(yàn)室許可證號：SYXK黑20020009。將大鼠按隨機(jī)數(shù)字表法分成2組，正常對照組(C)10只，2型糖尿病模型組(T2DM)26只。1．2造模方法1．2．1正常大鼠對照組(C組)大鼠喂基礎(chǔ)飼料，T2DM組大鼠喂高糖高脂飼料(10％豬油、20％蔗糖、2．5％膽固醇、1．O％膽酸鹽、66．5％基礎(chǔ)飼料)∞，4]，喂養(yǎng)4W后測大鼠血清甘油三酯(Serumtriglyceride，’rG)、膽固醇(T

5、otalcholesterol，TC)、空腹血糖(Fastingbloodglucose，F(xiàn)BG)、及空腹胰島素(Fastinginsulin，F(xiàn)INS)計(jì)算胰島素敏感指數(shù)(1／FBG×FINS)。l，2．2將空腹12h的T2DM組大鼠以30mg／kg劑量一次性腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ)，C組大鼠注射等量的檸檬酸緩沖液。72h后測大鼠FBG及FINS，空腹血糖值≥11．1mmol／L大鼠為糖尿病。FINS測定采用放射免疫法，按Linco公司操作手冊進(jìn)行。STZ溶液的配制方法：將STZ溶解于0．1mm

6、ol／L(pH4．4)檸檬酸鈉一檸檬酸緩沖液中，新鮮配制成3．og／LSTZ溶液p1。I．3藥物干預(yù)治療將造模成功的21只T2DM大鼠再次分成2組即T2DM對照組11只(A組，繼續(xù)喂養(yǎng)高脂高糖飼料)，蜂膠喂養(yǎng)組(B)10只。正常對照C組大鼠喂基礎(chǔ)飼料，B組大鼠喂養(yǎng)高脂高糖飼料加蜂膠。按人與大鼠體表面積折算的等效劑量確定大鼠用量為0．99／ks。(蜂膠購自黑龍江省東北黑蜂開發(fā)有限責(zé)任公司)。1．4標(biāo)本采集1．4．1于實(shí)驗(yàn)的4W、8W、12W時(shí)將大鼠置代謝籠中收集24h尿液，計(jì)尿量、新鮮尿樣3000r／r

7、ain離心15rain，取上清液4ml置于一加℃冰箱保存，待測尿蛋白。1．4．24W、8W時(shí)眼球采血，12W時(shí)股動(dòng)脈采血約3～4mL，3000r／min離心10min，取血清置于一20℃冰箱保存，待測血肌酐、尿素氮。1．4．3處死大鼠取左腎用中性10％甲醛溶液固定，丙酮脫水，二甲苯透明，石蠟包埋，制成5pjn切片，分別進(jìn)行HE和PAS染色，觀察腎臟組織病理變化。．46·MBORA篇黧笳SCIENCE2008年第25卷增刊1．5檢測指標(biāo)及方法血糖采尾血用血糖儀測定(保靈曼公司產(chǎn)品)；血尿素氮(BUN)、

8、肌酐(Scr)、尿蛋白定量(Pro)采用日立7150型全自動(dòng)生化儀測定；腎組織形態(tài)學(xué)觀察用OLYMPUSBXS0型顯微鏡。1．6統(tǒng)計(jì)學(xué)方法用SPSSl0．0軟件分析，數(shù)據(jù)以(i4-s)表示，組間比較用t檢驗(yàn)。2結(jié)果2．1高脂高糖飼料喂養(yǎng)4W后大鼠的體重、TC、TG、FBG、FINS及胰島素敏感指數(shù)的變化結(jié)果見表l、2。從表1、2看出高糖高脂飲食導(dǎo)致T2DM大鼠血脂升高、體重增加過快，F(xiàn)BG、FINS水平升高，胰島素敏感指數(shù)下降，兩組比較差異顯著(P<0．