百子蓮組織培養(yǎng)及植株再生研究

《百子蓮組織培養(yǎng)及植株再生研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在學術論文-天天文庫。

1、萬方數(shù)據(jù)·生物技術·北方園藝2011(10)：118～120百子蓮組織培養(yǎng)及植株再生研究胡仲義，何月秋(寧渡城市職業(yè)技術學院環(huán)境學院，浙江奉化315502)摘要：以百子蓮花蕾為外植體，成功建立了其離體再生體系。結果表明：百子蓮花蕾在誘導培養(yǎng)基MS+6-BA4mg／L+NAA0．1mg／L可分化出不定芽；在MS+6一BA2mg／L+NAAo．2H堰／L+GA30．1mg／L培養(yǎng)基上，百子蓮不定芽增殖倍數(shù)可達到5．07；百子蓮不定芽適宜的生根培養(yǎng)基為1／2MS+NAA0．1mg／L+AC0．1∥L，生根率可達100％，且百子蓮組培苗移栽1個月后

2、成活率可達到95％以上。關鍵詞：百子蓮；花蕾；不定芽；植株再生中圖分類號：S682．1+9文獻標識碼：B文章編號：1001--0009(2011)lo—0118一03百子蓮(Agapanthuspraecoxssp．)是原產于南非的多年生根莖類花卉，又名非洲百合、百子蘭、藍花君子蘭、紫穗蘭等，素有“愛情之花”的美譽，目前研究者對其分類地位還不統(tǒng)一，曾被歸為百合科(Liliaceae)、蔥科(Alliaceae)或石蒜科(Amaryllidaceae)的亞科(Agapan-thoideae)，近期還有學者將其單獨歸為一科一非洲百合科(Agap

3、anthceae)[1]。百子蓮植株秀麗，葉色濃綠，花莖挺立，花型優(yōu)雅，花色淡雅，不但是非常理想的地被和花境植物材料，而且也是很好的鮮切花材料，同時也可用作藥用成分的提取，目前已成功應用在上海世博綠化景觀[2]，這必將在上海及周邊城市綠化景觀上起到示范效應，市場對百子蓮需求將逐步加大，開發(fā)前景廣闊。我國于2000年對百子蓮進行引種栽培，栽培研究發(fā)現(xiàn)，百子蓮多數(shù)不結果或種子不能萌芽或分化嚴重，生產上多采用分株方法進行種苗繁殖，但繁殖速度緩慢、繁殖系數(shù)低，且小苗生長不快，需栽培4～5a才能開花；而組織培養(yǎng)的方法則可大大加快百子蓮的繁殖速度，縮短

4、繁殖的周期。同時，百子蓮高效穩(wěn)定的離體再生體系，可為百子蓮的新品種選育提供良好的操作平臺。百子蓮屬植物引人我國時間不長，對其組培技術的報道比較少見，僅見康玲[33以百子蓮的根莖部和葉片為外植體進行組培研究，但未獲得生根；中國綠色時報報道上海光兆植物速生技術有限公司獲得了百子蓮的組培苗[4]?，F(xiàn)以百子蓮的花蕾為外植體，獲得了百子蓮的第一作者簡介：胡仲義(1967一)，男，本科，副教授，研究方向為植物基礎。收稿日期：201l—03—18118組培再生體系，為進一步深入研究百子蓮的分類地位和育種技術提供了良好的操作平臺。1材料與方法1．1百子蓮初

5、代培養(yǎng)物的建立以寧波鄞州綠城園藝花卉培育基地種植的百子蓮花蕾為外植體。6月份從田間將百子蓮剛形成的花蕾(長度為1cm左右)連同花梗采回實驗室。先用洗潔精進行表面清洗，后用流水沖洗4～5次。分裝好后移至超凈工作臺用75％乙醇浸泡30S后用0．1％升汞處理振蕩滅菌10min，然后用無菌水沖洗5～6遍，再用消毒濾紙吸干表面水分，然后用解剖刀將花蕾苞片剝除，并對半剖開接種至MS+6-BA4．0n影L+NAA0．1n影L和MS+6-BA4．0rag／L+NAA1．0m∥L2種誘導培養(yǎng)基。1．2百子蓮不定芽的增殖培養(yǎng)將已經(jīng)分化的百子蓮不定芽切割下來，以

6、每3個或以上的不定芽為1芽叢轉接至以MS為基本培養(yǎng)基，以不同6一BA、NAA、GA3等作為植物生長調節(jié)物質進行調配。其中6-BA設1．o、2．0、3．0mg／L，NAA設0．1、0．2、0．3mg／L，GA3設0．05、0．1、0．2mg／L3個水平，采用b(34)正交實驗設計，共9個增殖培養(yǎng)基，每種增殖培養(yǎng)基接種30個不定芽，3次重復。定期觀察并記錄不定芽增殖情況，30d后統(tǒng)計各組試驗的新芽個數(shù)、新芽生長情況。1．3百子蓮不定芽的生根培養(yǎng)待不定芽長至2～3cm左右，將其轉入以1／2MS為基本培養(yǎng)基添加NAA為o、0．05、0．1mg／L和

7、1．0g／I．AC的生根培養(yǎng)基中，每5d觀察并記錄不定芽生根情況，20d后統(tǒng)計根長及苗生長狀況。以上培養(yǎng)基中除生萬方數(shù)據(jù)北方園藝2011(10)：118～120·生物技術·根階段白糖的濃度為1．5％而外，其他階段白糖均為3％，瓊脂為0．7％，pH調至6．0。培養(yǎng)室內控制恒溫(25±1)℃，光照為40“mol·rIr2·S-1，光照時間為每天14h，3次重復，每個試驗包括30個外植體。2結果與分析2．1百子蓮花蕾誘導分化結果百子蓮花蕾在誘導培養(yǎng)基中l(wèi)Od后開始膨大，15d后花蕾開始展開，20d后花瓣開始枯萎，部分子房膨大轉綠并形成少量芽點，3

8、0d后芽點逐漸長大葉子伸長(圖l—a)。觀察發(fā)現(xiàn)，培養(yǎng)基MS+6-BA4．0mg／L+NAA0．1mg／L可誘導百子蓮形成較多愈傷組織，并分化形成多而且細弱的不定芽，芽可增殖；而