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《濕地松叢生芽增殖的研究》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關內容在學術論文-天天文庫。
1、第!"卷第#期西南林學院學報$%&’!"(%’#!))"年*月+,-.(/0,12,-3456231,.623.78,006962:;’!))"濕地松叢生芽增殖的研究!何月秋,葉建仁"",池樹友(南京林業(yè)大學森林資源與環(huán)境學院,江蘇南京!&))#<)摘要:以濕地松無菌苗頂芽為外植體,誘導濕地松叢生芽的形成,誘導率可達&))=’研究激素水平、基本培養(yǎng)基、繼代周期、蔗糖濃度對濕地松叢生芽增殖的影響,結果表明:當>?@/為&ABC0,(//為)’)#ABC0時,最高增殖率可達D"’<&=,最高增值倍數(shù)為EF&&;在"種基本培養(yǎng)基G8.,5HI,&C!I2
2、,&C!9G,H>中,G8.比較適合叢生芽的增殖和生長;當培養(yǎng)基中蔗糖濃度為E=時,能夠形成健壯的叢生芽;每隔!)天繼代&次,既能保持外植體的幼嫩狀態(tài),也能提高叢生芽的生長速度’關鍵詞:濕地松;組織培養(yǎng);叢生芽;增殖中圖分類號:2<*&F!E>F)"文獻標識碼:/文章編號:&))#?<&<*(!))"))#?))&E?)E濕地松是一種優(yōu)良的造林樹種,其生長迅速,中冷藏E周后,取出用洗潔精清洗干凈,)’&=高錳干形通直,松脂含量高,對松材線蟲和松毛蟲具有酸鉀溶液浸泡&!K,流水沖洗&K,在超凈工作臺較強的抵抗性,在我國南方廣為引種栽植’然而,上剝除種
3、殼,<)=酒精浸泡#)L,無菌水沖洗#次,由于松針褐斑?。?"#$%&’()#($$#)#&*$)的嚴重危然后用)’&=的氯化汞溶液浸泡#AMN,無菌水沖害,其進一步的發(fā)展受到了很大的限制[&]’目前,洗EO"次’移入HG/培養(yǎng)基中培養(yǎng)成無菌苗,備所建立的濕地松抗病種子園已經進入結實階段’用F組織培養(yǎng)方法能夠快速、高效繁殖優(yōu)良材料以滿!"#叢生芽的誘導足生產的需求,緩解抗性種子供不應求的矛盾’切取培養(yǎng)!)O!"P的濕地松無菌苗帶子葉頂南京林業(yè)大學自&**D年開展?jié)竦厮煽顾舍樅职撸?]芽進行叢生芽的誘導,誘導培養(yǎng)基在朱麗華的病無性系的組織培養(yǎng)研究工作
4、以來,以子葉為外基礎上稍加改進’植體誘導濕地松的愈傷組織,并建立其懸浮培養(yǎng)!"$叢生芽的增殖體系[!,#]’隨著研究工作的進一步開展,目前以濕在誘導培養(yǎng)基上接種的外植體,待叢生芽長地松成熟胚、離體胚無菌苗、無菌實生苗等為外植至!QA左右,切取單芽置于添加有不同濃度的>體,成功地建立其器官發(fā)生的組織培養(yǎng)再生體系,[E,"]?@/和(//的G8.培養(yǎng)基上進行增殖實驗’并且獲得的試管苗移栽成活’盡管濕地松叢生篩選出比較適合的激素水平(>?@/&ABC0,(//芽的誘導率很高(*"=以上),其叢生芽的生根率也在>)=以上,試管苗移栽成活率達到D)=,但叢)
5、’)#ABC0)后,在此基礎上同步進行叢生芽增殖生芽的增殖比較困難,增殖系數(shù)不高,并且隨著增的基本培養(yǎng)基的篩選,繼代周期、繼代次數(shù)的篩殖代數(shù)的增加,叢生芽出現(xiàn)生長勢衰弱、老化、死選,蔗糖濃度的篩選’亡等現(xiàn)象’因此,為實現(xiàn)濕地松抗病家系的試管!"%培養(yǎng)條件苗工廠化生產,系統(tǒng)研究叢生芽的增殖非常必要’以上培養(yǎng)基在誘導叢生芽時,添加#)BC0蔗糖,而在叢生芽增殖時則添加E)BC0蔗糖;卡拉膠!材料與方法<’)BC0,;4"’D;&!&J高溫高壓滅菌&"AMN’整!"!外植體的培養(yǎng)個培養(yǎng)過程均在光照培養(yǎng)室中完成,溫度!"R精選優(yōu)良的抗性濕地松種子放置在EJ
6、冰箱!J,每日光照&EK,光照強度!)))ST’!收稿日期:!))"?)>?)*""為通訊作者基金項目:江蘇省高等學校研究生創(chuàng)新計劃F萬方數(shù)據(jù)作者簡介:何月秋(&*<"?),女,四川大邑人,博士生,主要從事抗病育種方面的學習與研究’第-期何月秋等:濕地松叢生芽增殖的研究’.!"#計算方式表’3,,不同濃度對濕地松叢生芽誘導的影響!個月后統(tǒng)計芽的誘導率和增殖倍數(shù)")*+,3,,外植體分化數(shù)誘導率叢生芽生長勢*’)*’)%個%個%#(%/0·1(%/0·1誘導率(#)$分化芽數(shù)(個)%接種芽數(shù)(個)-".("(!-(-(’((芽點很小,生長緩慢&’((
7、#-".("(--(-(’((芽點較小,生長緩慢增值倍數(shù)$有效芽數(shù)(個)%接種芽數(shù)(個)-".("(4-(-(’((芽點大,生長迅速-".("(.-(-(’((芽點較大,生長迅速$結果與分析$"$濕地松叢生芽的增殖$"!濕地松叢生芽的誘導相關資料顯示,多數(shù)研究者能夠建立濕地松本試驗結果表明,盡管單獨使用細胞分裂素)組織培養(yǎng)的再生體系,以獲得其再生植株"而對*+,就能誘導濕地松叢生芽的分化(以-"./0%1誘導成芽叢后的中間繁殖體如何大量快速繁殖研為宜,誘導率達)2"!(#),但分化后的叢生芽生長究較少"本試驗探討影響濕地松叢生芽增殖的不比較緩慢,且
8、老化嚴重"由表’可知,當培養(yǎng)基中同激素濃度及激素組合,并已經能夠誘導出生長添加適量的3,,時,無菌苗頂芽的叢生芽誘導率正常