還原糖測定儀與人工滴定法分析蔗汁還原糖含量的比較

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1、甘蔗糖業(yè)2008年第6期SugarcaneandCanesugar2008年12月還原糖測定儀與人工滴定法分析蔗汁還原糖含量的比較鐘映萍曾練強黃玉南梁磊陳仲華(廣州甘蔗糖業(yè)研究所廣東省甘蔗改良與生物煉制重點實驗室,廣州510316)摘要用全自動還原糖測定儀法測定各甘蔗汁中還原糖含量,其測定結(jié)果標準偏差(RSD)為0.3%~5%,平均標準偏差為1。9%該測定方法操作簡便,結(jié)果重現(xiàn)性好,準確可靠,可作為甘蔗選育、甘蔗制糖領(lǐng)域質(zhì)控參考分析方法。關(guān)鍵詞蔗汁;還原糖;測定儀0前言1材料與方法還原糖含量在一定程度上反映制糖原料和產(chǎn)1.1試驗原料品的質(zhì)量以及生產(chǎn)過程中工藝控制正常與

2、否,如甘蔗,廣州甘蔗糖業(yè)研究所提供。甘蔗的成熟情況、蔗糖的轉(zhuǎn)化、蔗糖貯存性能等。1.2儀器按照國家標準,一級白砂糖要求還原糖分≤0.10榨汁機;sGD—III型全自動還原糖測定儀(山%,因此,蔗汁中還原糖含量的測定是甘蔗制糖東省科學院生物中心研制)。的一項重要指標內(nèi)容。1.3試劑還原糖的測定方法一般有物理法(相對密度1.3.1藥品法、重量法、折光法、旋光法、近紅外光譜法等)、葡萄糖(中國藥品生物制品檢定所);硫酸銅;化學法(蘭一艾農(nóng)法Lane-Eynon、直接滴定法、高次甲基藍;酒石酸甲鈉;氫氧化鈉;亞鐵氰化鉀;錳酸鉀法、斐林試劑法、鐵氰化鉀法、薩氏法雙蒸水;試劑均為

3、分析純。Somogyi、碘量法、縮合反應法、DNS比色法、硫1.3.2斐林試劑的配制酸一酚法、蒽酮法等)、色譜法(HPLC法、Gc法、1.3.2.1斐林試劑甲液紙層析法、薄層色譜法等)、酶法、發(fā)酵法(測不稱取35.0g硫酸銅,加入1%次甲基藍溶液5可發(fā)酵糖)等?。上述測定方法常受蔗汁中其它mL,用蒸餾水溶解后定容至1000mL。非還原糖類物質(zhì)干擾,大多需要經(jīng)過去除蛋白、1.3.2.2斐林試劑乙液澄清等預處理過程,并且存在操作復雜,人為造稱取117.0g酒石酸鉀鈉及126.4g氫氧化鈉,成的誤差較大等缺點。尋找快速、準確、操作方用蒸餾水溶解后加入9.4g亞鐵氰化鉀,完全

4、溶解便的還原糖測定方法很有必要。本文采用全自動后定容至1000mL。還原糖測定儀對甘蔗汁中還原糖進行測定并與斐1.3.3葡萄糖標準溶液的配制林試劑人工滴定方法進行了對比,表明全自動還1.3.3.1l%葡萄糖標準溶液原糖測定儀操作簡便,重現(xiàn)性好,可通過還原糖精密稱取葡萄糖(105℃干燥至恒重)0.50g,含量作為甘蔗選育和制糖工藝控制的指標。加蒸餾水溶解,加入0.5mL鹽酸,用蒸餾水溶解定容于5OOmL容量瓶中,濃度為1mg/mL,備用。.48.鐘映萍等:還原糖測定儀與人工滴定法分析蔗汁還原糖含量的比較1.3.3.2O.45%葡萄糖標準溶液個10mL容量瓶中,加蒸餾水至

5、刻度。用還原糖測吸取1%葡萄糖對照品溶液45mL,加蒸餾水定儀測定上述標準溶液中還原糖含量,每次進樣定容至IO0mL。0.5mL。以測定值Y為縱坐標,還原糖含量x為橫1.4實驗方法坐標,繪制標準曲線。1.4.1全自動還原糖測定儀測定方法葡萄糖測定標準曲線如圖1,圖中縱坐標為測開機,設定參數(shù),啟動程序,儀器自動進入定值Y,橫坐標為還原糖含量x?;貧w方程為穩(wěn)定程序及定標T1值(0.4%葡萄糖),待打印出Y-I.0064X+0.0028,R=0.9999,可見葡萄糖T1值后進行T2值(1%葡萄糖)的標定。定標完成含量在0~1.2%之間時,全自動還原糖測定儀測后,自動進入測定

6、程序,吸取500mL待測甘蔗汁,定結(jié)果具有良好的線性關(guān)系,可以滿足測定要求。待進樣指示燈亮時將待測液注入反應池,反應結(jié)束后儀器自動打印測定結(jié)果。每個樣品平行測定3次,取平均值即可。羅1.4.2斐林人工滴定法/精確吸取斐林甲、乙液各5mL,放人15OmL錐形瓶內(nèi),加蒸餾水10mL及1mLl0%樣品稀釋液,.再用糖液滴定管加入比預備滴定耗用量少0.5mL000020040060080100120140還原耱含愛)左右的0.1%葡萄糖標準液,搖勻后加熱,使其在1~2min內(nèi)沸騰,沸騰30S后勻速滴入0.1%葡萄圖1葡萄糖測定標準曲線糖標準液至藍色消失即為終點,記下沸騰前后共

7、耗用0.1%葡萄糖標準液的毫升數(shù)。2.2斐林試劑人工滴定法測定不同濃度的標準葡萄糖樣品2結(jié)果分析表1為斐林試劑人工滴定法測定不同濃度的標準葡萄糖樣品耗用樣品容積值,表1可見,同一2.1全自動還原糖測定儀測定結(jié)果線性關(guān)系考察濃度的葡萄糖樣品,測定結(jié)果具有一定的穩(wěn)定性取干燥至恒重的無水葡萄糖2.0g,精密稱和重現(xiàn)性。但是利用手工滴定法測定不同葡萄糖定,置10OmL容量瓶中,加0.1mL鹽酸,分別精濃度的線性相關(guān)系數(shù)范圍為0.9110~0.9332,線密吸取上述葡萄糖溶液1、2、3、4、5、6mL于6性相關(guān)性較不明顯于還原糖測定儀的測定結(jié)果。表1斐林試劑人

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