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《雙特異性抗體與抗體融合蛋白》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、雙特異性抗體2雙特異性抗體概述構(gòu)建策略應(yīng)用3概述雙特異性抗體：抗體兩個結(jié)合點表現(xiàn)為不同的特異性，即分別結(jié)合不同表位。如，一個結(jié)合靶細胞（如腫瘤細胞），另一結(jié)合藥物或免疫效應(yīng)細胞（如蓖麻毒素、抗癌藥物、細胞毒性細胞）4雙特異性抗體56雙特異性抗體的功用：提高療效，減少副作用。主要用于靶向治療。7構(gòu)建策略雙特異性抗體的靶標(biāo)一個結(jié)合治療靶標(biāo)，另一個指向體內(nèi)效應(yīng)細胞T細胞TCRCD3CD28構(gòu)建策略雙特異性抗體的靶標(biāo)一個結(jié)合治療靶標(biāo)，另一個指向體內(nèi)效應(yīng)細胞吞噬細胞/APCFcγR、CR9構(gòu)建策略雙特異性
2、抗體的靶標(biāo)一個結(jié)合治療靶標(biāo)，另一個指向體內(nèi)效應(yīng)細胞NK細胞FcγR、CD5610雙特異性抗體的效應(yīng)靶效應(yīng)細胞靶分子效應(yīng)T細胞TCR/CD3,CD2殺傷腫瘤細胞NK細胞FcγRIII,CD44,CD56,CD38殺傷腫瘤細胞病毒感染細胞中性粒細胞FcγRI,CR3,FcαRI殺傷腫瘤細胞病毒感染細胞單核巨噬細胞FcγRI,CR3,FcαRI殺傷腫瘤細胞病毒感染細胞樹突狀細胞FcγR抗原遞呈紅細胞CR1免疫粘附11構(gòu)建策略雙特異性抗體的構(gòu)建方法雜化雜交瘤技術(shù)將具有某種特異性（如抗瘤細胞）的McAb細
3、胞株與具有抗第二抗原（如蓖麻毒蛋白）的小鼠脾細胞進行融合，即產(chǎn)生出雜化雜交瘤細胞株的二價瘤體。12雜化雜交瘤技術(shù)產(chǎn)生的雙特異性抗體13雜化雜交瘤分泌的抗體形式保持原特異性抗體分子：L1H1-H1L1，L2H2-H2L2重鏈特異性相同的配對抗體分子：L1H1-H1L2，L1H2-H2L1L2H1-H1L2，L1H2-H2L2重鏈、輕鏈特異性不同的配對抗體分子：L1H1-H2L2，L1H2-H1L2L1H1-H2L1，L2H2-H1L214只有L1H1-H2L2才是所需的雙特異性抗體15雜化雜交瘤方
4、法的不足產(chǎn)量低，僅占10%產(chǎn)物需篩選，費時費力瘤株不穩(wěn)定16構(gòu)建策略雙特異性抗體的構(gòu)建方法化學(xué)交聯(lián)法Nisonoff和Rivers最早開始研究化學(xué)交聯(lián)無需經(jīng)過細胞融合，比較簡便易行。通常利用重鏈與輕鏈這間的二硫鏈經(jīng)還原和再氧化，將兩種不同特異性抗體的半分子結(jié)合在一起?；蛴秒p功能交聯(lián)劑，如鄰苯酸酯等，把兩個抗體半分子交聯(lián)在一起。17化學(xué)交聯(lián)的雙特異性抗體18構(gòu)建策略雙特異性抗體的構(gòu)建方法化學(xué)交聯(lián)法用于制備雙功能抗體的McAb可以是完整分子，也可是經(jīng)胃酶水解獲得F（abˊ）2片段。后者在減少鼠源免疫
5、原性方面，效果較好。19構(gòu)建策略雙特異性抗體的構(gòu)建方法基因工程技術(shù)利用分子生物學(xué)技術(shù)設(shè)計產(chǎn)生雙功能抗體常見有四種構(gòu)建形式，多為小分子抗體。20末端半胱氨酸殘基（Cys）共價交聯(lián)在兩種scFv分子C末端分別帶上自由的Cys，通過常規(guī)二硫鍵共價交聯(lián)，形成雙特異性抗體VLAVHALCysVLBVHBLCys-S-S-21單鏈雙特異性抗體將兩種scFv分子基因用linker連接在一起，然后表達形成雙特異性抗體VLAVHALVLBVHBLL22微型雙特異性抗體利用專門二聚化結(jié)構(gòu)將兩種scFv分子連接在一起
6、，形成雙特異性抗體如利用fos和jun基因的亮氨酸拉鏈序列：VLAVHALfosVLBVHBLjun23雙體型雙特異性抗體將兩種不同抗體的VH和VL用較短的linker連接形成兩種不同單鏈，當(dāng)它們共表達時，其相互間連接在一起，形成雙特異性抗體1993，Holliger24雙特異性抗體的應(yīng)用免疫診斷腫瘤放射顯影腫瘤藥物殺傷腫瘤的免疫殺傷乳腺癌、淋巴母細胞白血病、神經(jīng)膠質(zhì)瘤25抗體免疫偶聯(lián)物26抗體免疫偶聯(lián)物概述小分子藥物與抗體偶聯(lián)物毒素及大分子多肽藥物與抗體偶聯(lián)物應(yīng)用27概述抗體免疫偶聯(lián)物將單抗與
7、“彈頭”藥物偶聯(lián)在一起，以提高藥物作用的特異性，主要用于腫瘤治療。如，Mylotarg—抗CD33單抗偶聯(lián)加里奇霉素，治療老年人急性髓細胞性白血病，2000年上市。28與單抗偶聯(lián)的常用“彈頭”藥物類別名稱植物毒素蓖麻毒素，相思豆毒素，皂角苷微生物毒素綠膿桿菌外毒素，白喉毒素抗代謝藥物氨基蝶呤，甲氨蝶呤，阿糖胞苷，5-氟尿嘧啶，5-氟脫氧尿苷蒽環(huán)類藥物阿霉素柔紅霉素嗎啉阿霉素烷基化藥物順鉑苯丙氨酸氮芥絲裂霉素C抗有絲分裂藥物長春花堿秋水仙堿鬼臼毒素抗生素博萊霉素加里奇霉素平陽霉素29小分子藥物與抗
8、體偶聯(lián)物一個單抗可偶聯(lián)一個至數(shù)十個小分子藥物?？贵w分子中的多個基團可以用于連接，如巰基，氨基，羥基，胍基，羧基，糖基等。30小分子藥物與抗體偶聯(lián)物直接偶聯(lián)物將藥物與單抗直接連接在一起不同的小分子藥物往往需選擇不同的交聯(lián)劑。2-亞胺四氫噻吩(2-IT)可在具氨基的化合物上引入巰基31小分子藥物與抗體偶聯(lián)物直接偶聯(lián)物將藥物與單抗直接連接在一起不同的小分子藥物往往需選擇不同的交聯(lián)劑。SPDP(N-琥珀酰亞胺-3-(2-吡啶二硫基)-丙酸酯)可將巰基引入抗體如，阿霉素與抗子宮內(nèi)膜腺癌單抗偶聯(lián)，效果提高5
