澤瀉水提物、醇提物的制備及對小白鼠降脂作用的研究

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1、澤瀉水提物、醇提物的制備及對小白鼠降脂作用的研究作者：錢文彬龐紅薛大權(quán)席蘭艷張海燕【摘要】　　目的：比較澤瀉水提物、醇提物對高脂飲食小白鼠的降脂作用。方法：利用正交試驗(yàn)選擇澤瀉水提、醇提的最佳方案，通過藥理實(shí)驗(yàn)方法，以實(shí)驗(yàn)動(dòng)物小白鼠的體重、肝重、血脂指標(biāo)、Lee氏指數(shù)為測定指標(biāo)，比較澤瀉水提物、醇提物對高脂飲食小白鼠的降脂作用。結(jié)論：澤瀉水提物、醇提物對肥胖小白鼠均有一定降血脂作用，且兩者的作用無顯著性差異?！娟P(guān)鍵詞】澤瀉；水提物；醇提物；肝重澤瀉是澤瀉科植物澤瀉的干燥塊莖。性寒，味甘、淡，歸腎、膀胱經(jīng)，具有利水滲濕、泄熱等功效，用于小便不利、水腫脹滿、

2、泄瀉、尿少、痰飲、眩暈、熱淋澀痛等癥。臨床應(yīng)用表明［1］，澤瀉具有明顯的利尿作用，還具有降壓、降血脂、抗動(dòng)脈粥樣硬化、抗脂肪肝、降血糖等作用。近年來，對澤瀉降血脂作用的活性成分和藥理實(shí)驗(yàn)研究已較成熟［2，3］，臨床上多用澤瀉水煎劑或醇煎劑，本實(shí)驗(yàn)以澤瀉的主要降脂作用成分23乙酰澤瀉醇B為考察指標(biāo)，通過正交試驗(yàn)選擇澤瀉水提和醇提的最佳方案后，將澤瀉水提物和醇提物分別灌胃小白鼠，旨在觀察兩者對高脂飲食小白鼠的降脂作用，為澤瀉的臨床應(yīng)用提供依據(jù)?！　?實(shí)驗(yàn)材料　　　　藥材　　澤瀉飲片，購自武漢同濟(jì)堂大藥房，產(chǎn)自四川成都。試劑與儀器　　甘油三脂測定試劑盒、總膽

3、固醇測定試劑盒、高密度脂蛋白膽固醇測定試劑盒均購自中生北控生物科技股份有限公司，辛伐他汀膠囊由南通華山藥業(yè)有限公司提供。　　循環(huán)水式多用真空泵、紫外分光光度儀、SANYO低溫冰箱、低速離心機(jī)、分析天平、臺式離心機(jī)。動(dòng)物　　雄性小白鼠50只,由武漢大學(xué)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物房提供，隨機(jī)分為5組,每組10只,各組間體重?zé)o明顯差異。高脂飼料　　在基礎(chǔ)飼料的基礎(chǔ)上添加%膽固醇、10%蛋黃粉、5%豬油［4］。　　2實(shí)驗(yàn)方法.1澤瀉水提物的制備　　根據(jù)傳統(tǒng)湯劑的制劑方法和預(yù)實(shí)驗(yàn)，對影響提取效率的加水量、提取時(shí)間、提取次數(shù)、粉碎度4個(gè)因素進(jìn)行了考察，在平行操作條件下按L9正交表

4、安排了9次實(shí)驗(yàn)，以吸光度為定量指標(biāo)，測得23乙酰澤瀉醇B在波長處(UV)有最大吸收，故在此波長下測吸光度，正交試驗(yàn)所得結(jié)果經(jīng)方差分析直觀表明［5］，各因素影響程度無顯著性差異，結(jié)果表明將澤瀉飲片切成粗顆粒，以10倍量水提取3次，每次1h，所得水提液最優(yōu)。.2澤瀉醇提物的制備　　根據(jù)傳統(tǒng)湯劑的制劑方法和預(yù)試實(shí)驗(yàn)，對影響提取效率的醇濃度、加醇量、提取時(shí)間、提取次數(shù)4個(gè)因素進(jìn)行了考察，在平行實(shí)驗(yàn)操作條件下利用L9正交表安排9次實(shí)驗(yàn),以吸光度為定量指標(biāo)，在波長處(UV)測吸光度［6］，正交試驗(yàn)所得結(jié)果經(jīng)方差分析直觀表明各因素影響程度為有一定差異但并不顯著，故將

5、澤瀉飲片以10倍量80%乙醇回流提取3次，每次2h，所得醇提液最優(yōu)。.3藥理試驗(yàn)的比較研究.造模將50只小白鼠隨機(jī)分為5組，每組10只，各組間體重?zé)o顯著性差異，編號為：1空白組，2肥胖組，3陽性對照組，4水提物組，5醇提物組。其中1組喂以普通飼料，2～5組喂以高脂飲食，連續(xù)飼養(yǎng)兩周。.灌胃分組喂養(yǎng)兩周后，按/10g小鼠/天的劑量，對陽性對照組灌胃辛伐他汀溶液；水提物組與醇提物組各以澤瀉提取物灌胃，連續(xù)灌胃兩周并定期稱5組小鼠的體重。.測定各組小鼠禁食24h，末次給藥5h后，斷頭取血。將血樣3000r/min離心20min后取血清，按照生化試劑盒的說明書操

6、作，用UV1700分別在505nm、500nm、500nm波長處測吸光度，按公式A樣/A標(biāo)·C標(biāo)分別求出血樣中TG、CHO、HDLC的濃度?！　×矿w長：將小鼠處死后，用直尺量取鼠頭尖到肛門的長度，結(jié)合處死前稱得的體重即可得其李氏指數(shù)值*1000/體長）　　稱肝重：將處死的小鼠解剖，取其新鮮肝臟置于分析天平稱重。.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果的計(jì)量資料的均值及標(biāo)準(zhǔn)差均以±s表示，運(yùn)用t檢驗(yàn)法比較各組小白鼠體重、肝重、體重/肝重、Lee氏指數(shù)、血脂的差異性［3］?！　?結(jié)果　　空白組小鼠喂養(yǎng)基礎(chǔ)飼料，造模組小鼠喂養(yǎng)高脂飼料并定期稱重。實(shí)驗(yàn)進(jìn)行第4周后測小鼠血

7、清中TG、CHO、HDLC濃度，比較肥胖組與空白組小鼠體重、肝重、體重/肝重及Lee氏指數(shù),結(jié)果見表1、表2?！　≡炷２⑦B續(xù)給藥2周后比較陽性組、水提物組、醇提物組與肥胖組各時(shí)期的體重增值情況，見表3?！　?shí)驗(yàn)進(jìn)行4周后，測得各組小白鼠的血脂水平、體重和肝重、體重/肝重及Lee氏指數(shù)，比較陽性組、水提物組、醇提物組與肥胖組各指標(biāo),結(jié)果見表4、表5。表1肥胖組與空白組血脂水平的比較注：*P表2肥胖組與空白組生理指標(biāo)比較表3各組小鼠體重增值比較注：*P表4各組小鼠生理指標(biāo)比較表5對各組小白鼠血脂水平的影響注：*P　　4討論　　本研究經(jīng)實(shí)驗(yàn)研究，得到了較佳的

8、澤瀉水提與醇提制備工藝。造模期間，與基礎(chǔ)飼料組相比，高脂飲食組小鼠毛皮紅潤、精力