澤瀉水提物、醇提物的制備及對小白鼠降脂作用的研究

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1、澤瀉水提物、醇提物的制備及對小白鼠降脂作用的研究作者：錢文彬龐紅薛大權(quán)席蘭艷張海燕【摘要】　　目的：比較澤瀉水提物、醇提物對高脂飲食小白鼠的降脂作用。方法：利用正交試驗選擇澤瀉水提、醇提的最佳方案，通過藥理實驗方法，以實驗動物小白鼠的體重、肝重、血脂指標(biāo)、Lee氏指數(shù)為測定指標(biāo)，比較澤瀉水提物、醇提物對高脂飲食小白鼠的降脂作用。結(jié)論：澤瀉水提物、醇提物對肥胖小白鼠均有一定降血脂作用，且兩者的作用無顯著性差異（P＞0.05）?！娟P(guān)鍵詞】澤瀉；水提物；醇提物；肝重　　澤瀉是澤瀉科植物澤瀉的干燥塊莖。性寒，味甘、淡，歸腎、膀胱經(jīng)，具有利水滲濕、泄熱等功效，用于小便不利、水腫脹滿

2、、泄瀉、尿少、痰飲、眩暈、熱淋澀痛等癥。臨床應(yīng)用表明［1］，澤瀉具有明顯的利尿作用，還具有降壓、降血脂、抗動脈粥樣硬化、抗脂肪肝、降血糖等作用。近年來，對澤瀉降血脂作用的活性成分和藥理實驗研究已較成熟［2，3］，臨床上多用澤瀉水煎劑或醇煎劑，本實驗以澤瀉的主要降脂作用成分23乙酰澤瀉醇B為考察指標(biāo)，通過正交試驗選擇澤瀉水提和醇提的最佳方案后，將澤瀉水提物和醇提物分別灌胃小白鼠，旨在觀察兩者對高脂飲食小白鼠的降脂作用，為澤瀉的臨床應(yīng)用提供依據(jù)?！　?實驗材料　　　　1.1藥材　　澤瀉飲片，購自武漢同濟堂大藥房，產(chǎn)自四川成都。　　1.2試劑與儀器　　甘油三脂（TG）測定試劑

3、盒（酶終點法）、總膽固醇（CHO）測定試劑盒（酶終點法）、高密度脂蛋白膽固醇（HDLC）測定試劑盒（磷鎢酸鎂沉淀法）均購自中生北控生物科技股份有限公司，辛伐他汀膠囊由南通華山藥業(yè)有限公司提供?！　⊙h(huán)水式多用真空泵（鞏義市英峪高科儀器廠，型號SHB）、紫外分光光度儀（日本島津公司，型號UV1700）、SANYO低溫冰箱、低速離心機（北京醫(yī)用離心機廠，型號HHS）、分析天平、臺式離心機（上海安亭科學(xué)儀器廠，型號TGL16B）?！　?.3動物　　雄性小白鼠50只,由武漢大學(xué)醫(yī)學(xué)院動物房提供，隨機分為5組,每組10只,各組間體重?zé)o明顯差異?！　?.4高脂飼料　　在基

4、礎(chǔ)飼料的基礎(chǔ)上添加0.5%膽固醇、10%蛋黃粉、5%豬油［4］。　　2實驗方法　　2.1澤瀉水提物的制備　　根據(jù)傳統(tǒng)湯劑的制劑方法和預(yù)實驗，對影響提取效率的加水量、提取時間、提取次數(shù)、粉碎度4個因素進(jìn)行了考察，在平行操作條件下按L9（34）正交表安排了9次實驗，以吸光度為定量指標(biāo)，測得23乙酰澤瀉醇B在203.8nm波長處(UV)有最大吸收，故在此波長下測吸光度，正交試驗所得結(jié)果經(jīng)方差分析直觀表明［5］，各因素影響程度無顯著性差異，結(jié)果表明將澤瀉飲片切成粗顆粒，以10倍量水提取3次，每次1h，所得水提液最優(yōu)。　　2.2澤瀉醇提物的制備　　根據(jù)傳統(tǒng)湯劑的制劑方法和預(yù)試實驗

5、，對影響提取效率的醇濃度、加醇量、提取時間、提取次數(shù)4個因素進(jìn)行了考察，在平行實驗操作條件下利用L9（34）正交表安排9次實驗,以吸光度為定量指標(biāo)，在203.8nm波長處(UV)測吸光度［6］，正交試驗所得結(jié)果經(jīng)方差分析直觀表明各因素影響程度為有一定差異但并不顯著，故將澤瀉飲片以10倍量80%乙醇回流提取3次，每次2h，所得醇提液最優(yōu)。　　2.3藥理試驗的比較研究　　2.3.1造模將50只小白鼠隨機分為5組，每組10只，各組間體重?zé)o顯著性差異，編號為：1空白組，2肥胖組，3陽性對照組，4水提物組，5醇提物組。其中1組喂以普通飼料，2～5組喂以高脂飲食，連續(xù)飼養(yǎng)兩周?！　?

6、.3.2灌胃分組喂養(yǎng)兩周后，按0.2ml/10g小鼠/天的劑量，對陽性對照組灌胃辛伐他汀溶液（0.13mg/ml）；水提物組與醇提物組各以澤瀉提取物灌胃（均為0.3g/ml生藥液），連續(xù)灌胃兩周并定期稱5組小鼠的體重。　　2.3.3測定各組小鼠禁食24h，末次給藥5h后，斷頭取血。將血樣3000r/min離心20min后取血清，按照生化試劑盒的說明書操作，用UV1700分別在505nm、500nm、500nm波長處測吸光度，按公式A樣/A標(biāo)·C標(biāo)分別求出血樣中TG、CHO、HDLC的濃度?！　×矿w長：將小鼠處死后，用直尺量取鼠頭尖到肛門的長度，結(jié)合處死前稱得的體重即可

7、得其李氏指數(shù)值（Lee氏指數(shù)=體重1/3（g）*1000/體長（cm））　　稱肝重：將處死的小鼠解剖，取其新鮮肝臟置于分析天平稱重?！　?.4統(tǒng)計學(xué)處理　　實驗結(jié)果的計量資料的均值及標(biāo)準(zhǔn)差均以±s表示，運用t檢驗法比較各組小白鼠體重、肝重、體重/肝重、Lee氏指數(shù)、血脂的差異性［3］?！　?結(jié)果　　空白組小鼠喂養(yǎng)基礎(chǔ)飼料，造模組小鼠喂養(yǎng)高脂飼料并定期稱重。實驗進(jìn)行第4周后測小鼠血清中TG、CHO、HDLC濃度，比較肥胖組與空白組小鼠體重、肝重、體重/肝重及Lee氏指數(shù),結(jié)果見表1、表2。　　造模并連續(xù)給藥2周后比較陽性組、水