馬鈴薯脫毒種薯技術醫(yī)學

《馬鈴薯脫毒種薯技術醫(yī)學》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在教育資源-天天文庫。

1、馬鈴薯脫毒種薯生產技術“脫毒種薯”“種薯”是指那些作為種子用的薯塊?！懊摱痉N薯”是指種薯經過一系列物理、化學、生物或其它技術措施清除薯塊體內的病毒后，獲得的經檢測無病毒或極少有病毒侵染的種薯。為什么馬鈴薯種薯需要脫毒:退化:在馬鈴薯栽培過程中，植株的逐年變小，葉片皺縮卷曲，葉色濃淡不均，莖稈矮小細弱，塊莖變形龜裂，產量逐年下降等現(xiàn)象，這種現(xiàn)象叫“退化”。種薯“退化”是引起產量降低和商品性狀變差的主要原因?！巴嘶敝饕?病毒的侵染及其在薯塊內積累。馬鈴薯種薯脫毒和種薯生產程序目前我國馬鈴薯種薯產業(yè)存在的

2、主要問題:我國馬鈴薯脫毒快繁和種薯繁殖技術，具有世界先進水平，但目前我國的種薯質量不容樂觀。脫毒種薯繁育體系不完善，無權威的種薯質量監(jiān)控機構，種薯生產未形成規(guī)模化、產業(yè)化，種薯市場混亂，生產不規(guī)范，無國家統(tǒng)一的種薯質量和病蟲害檢測標準，嚴重影響馬鈴薯的產量和種植者的利益。植物莖尖脫毒技術能夠脫去哪些病毒?經高溫處理后，進行莖尖分生組織培養(yǎng)可以脫除PLRV、PVY、PVX、PVA、PVS、PVM(馬鈴薯M病毒)及PAMV(馬鈴薯雜斑病毒或馬鈴薯奧古巴花葉病毒)。馬鈴薯紡錘塊莖類病毒(PSTV)是一種非常頑固

3、的病害，目前利用莖尖脫毒的方法是很難根除的。PSTV既可以通過田間植株傳毒，又能通過種子帶毒，新育品種的親本如帶有PSTV，其后代很難避免被PSTV侵染，因此在種薯生產和新品種選育中要絕對杜絕PSTV的存在。馬鈴薯S病毒(PVS)也是比較難脫掉的病毒，PVS單獨存在時對產量的影響較小，但在復合侵染時也可以造成嚴重減產。現(xiàn)在PVS在我國已有蔓延趨勢，要生產高質量的種薯必須根除PVS和其它病毒，一般莖尖苗只要脫掉PVS，其它容易脫掉的病毒也隨之脫除。（潛隱花葉病(PVS)）脫毒材料休眠打破及表面消毒:入選塊莖

4、用1％硫脲+5毫克／升赤霉素浸種5分鐘，以打破休眠。用濕潤砂覆埋，置于25℃黑暗條件下催芽。待薯塊頂芽生長至2厘米時，取芽作為外植體用于莖尖脫毒。消毒方法是先用刀片切取2—3厘米的壯芽，將芽在75％的酒精中過一遍(幾秒鐘)，然后用飽和漂白粉上清液或用市售的次氯酸鈉溶液稀釋為5％—7％，浸泡15—20分鐘，然后用無菌水清洗3-4次。一次消毒的芽不能太多，以免消毒后材料放置時間太長，莖尖發(fā)生褐變，對植物組織產生較大的傷害，影響成活率。脫毒材料的熱處理:為提高脫毒效果，應進行材料的熱處理，1.鈍化病毒活性，2.

5、消除馬鈴薯卷葉病毒，3.提高脫毒效果。用手術刀，切取1—1.5毫米左右的莖尖。取下的莖尖接種在不含任何激素的快繁基上培養(yǎng)，于25℃每天光照16小時的培養(yǎng)室培養(yǎng)。待莖尖長至1厘米時轉入光照培養(yǎng)箱培養(yǎng)，以每天16小時光照，36℃的高溫處理6-8周。馬鈴薯莖尖分生組織剝取取經高溫處理后的試管苗的莖尖，在30-40倍解剖鏡下進行莖尖分生組織剝離。用解剖刀小心地除去莖尖周圍的葉片組織，暴露出頂端圓滑的生長點，用解剖針細心切取所需的莖尖分生組織。一般切取莖尖的長度為0.1-0.3毫米，帶有1—2個葉原基。馬鈴薯莖尖分

6、生組織示意圖切取的莖尖分生組織隨即接種到莖尖培養(yǎng)基上，以切面接觸瓊脂，置于培養(yǎng)室進行離體培養(yǎng)。莖尖分生組織培養(yǎng)的容器以15厘米×2厘米的試管為宜，每管盛10毫升培養(yǎng)基接種一個莖尖，同時給試管壁編號并作工作日記，注明接種的品種、試管數、日期等。莖尖培養(yǎng)注意點:莖尖分生組織培養(yǎng)的適宜溫度為22—25℃，光照強度2000—4000Lux，光照時間為每天16小時。注意:植物激素以及有機成分的搭配使用，在對培養(yǎng)基進行激素搭配時應以不使莖尖愈傷化為基本原則，使莖尖直接發(fā)育生長成植株，而不能經愈傷組織再分化發(fā)育成植株，

7、因為經愈傷組織分化的植株很容易使植株分生變異。適宜馬鈴薯莖尖分生組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基：以MS+赤霉素0.1毫克/升+6-芐基腺嘌呤0.1毫克/升+D-泛酸鈣0.2毫克/升+蔗糖2％，瓊脂0.6％，pH5.8，為比較好的培養(yǎng)基組合。經過莖尖脫毒的材料進行病毒檢測目的：第一次擴繁后要對試管苗進行病毒檢測。剝取莖尖的大小直接關系到脫毒效果，一般剝取的莖尖愈小成苗率愈低，但脫毒率高，而培養(yǎng)的莖尖愈大，成苗率愈高，但脫毒率低。因此只有經病毒檢測后，確認是不帶病毒的株系，才能進一步利用，對繼續(xù)帶病毒的株系應淘汰或進行再次

8、脫毒。常見的病毒檢測技術常用的馬鈴薯病毒檢測技術指示植物檢測血清學技術檢測(ELISA)免疫吸附電子顯微鏡檢測現(xiàn)代分子生物學技術檢測。常用的類病毒檢測技術聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)、往返凝膠電泳(RGE)cDNA探針脫毒后的材料需要進行田間試種1.經病毒檢測后確認不帶有病毒的試管苗在進一步大量擴繁或工廠化生產前，還需要進行田間試種觀察鑒定，將每個無病毒株系的試管苗取出一部分，移栽或誘導成試管薯播種到大田試種、觀察，檢驗其是