化學(xué)發(fā)光檢測(cè)

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1、專業(yè)技術(shù)資料第一章化學(xué)發(fā)光技術(shù)一、免疫學(xué)檢測(cè)發(fā)展階段免疫學(xué)檢測(cè)主要是利用抗原和抗體的特異性反應(yīng)進(jìn)行檢測(cè)的一種手段，由于其可以利用同位素、酶、化學(xué)發(fā)光物質(zhì)等對(duì)檢測(cè)信號(hào)進(jìn)行放大和顯示，因此常被用于檢測(cè)蛋白質(zhì)、激素等微量物質(zhì)。我國(guó)免疫學(xué)的檢測(cè)基本歷經(jīng)了以下幾個(gè)過(guò)程，如圖1.1所示?；瘜W(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)（CLIA）酶聯(lián)免疫檢測(cè)（ELISA）放射免疫檢測(cè)（RIA）20世紀(jì)60年代70年代90年代時(shí)間圖1.1免疫學(xué)檢測(cè)發(fā)展階段盡管免疫診斷在臨床診斷中占據(jù)著非常重要的地位，但是從我國(guó)臨床免疫診斷現(xiàn)狀來(lái)看，無(wú)論是臨床應(yīng)用方面，還是產(chǎn)業(yè)化角度，都處于相對(duì)比較落后的狀態(tài)，亟待改進(jìn)。下表１.１就此做一

2、比較：表1.1中國(guó)免疫診斷現(xiàn)狀中國(guó)國(guó)際（歐美為主）放射免疫法　?。ǎ遥桑粒d起于20世紀(jì)70年代，現(xiàn)仍普遍使用于縣級(jí)以上醫(yī)院；．產(chǎn)品處于衰退期；．廠商試劑與儀器共同開發(fā)，試劑基本系列化。．興起于20世紀(jì)60年代，現(xiàn)已基本退出臨床應(yīng)用；．產(chǎn)品生命周期已終結(jié)；．廠商試劑和儀器共同開發(fā)，試劑基本系列化。酶聯(lián)免疫法　?。ǎ牛蹋桑樱粒d起于20世紀(jì)80年代，現(xiàn)普遍使用于各級(jí)臨床機(jī)構(gòu)，為我國(guó)臨床免疫診斷的基本方法；．產(chǎn)品處于成熟期；．廠商試劑與儀器共同開發(fā)，試劑尚未系列化。．興起于20世紀(jì)70年代，現(xiàn)仍在臨床應(yīng)用；．產(chǎn)品處于衰退期；．廠商試劑與儀器共同開發(fā)，試劑基本系列化?；瘜W(xué)發(fā)光免

3、疫法（ＣＬＩＡ）．導(dǎo)入于20世紀(jì)90年代，現(xiàn)個(gè)別較大醫(yī)院開展個(gè)別項(xiàng)目；．產(chǎn)品處于導(dǎo)入期或成長(zhǎng)期；．無(wú)廠商開發(fā)生產(chǎn)，完全依賴進(jìn)口。．興起于20世紀(jì)80年代，現(xiàn)已被臨床普遍使用，成為臨床免疫診斷的支柱方法；．產(chǎn)品處于成熟期；．廠商試劑與儀器共同開發(fā)，儀器自動(dòng)化程度高，試劑系列化狀態(tài)好。Word文檔下載可編輯專業(yè)技術(shù)資料由以上分析不難看出，化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)是大勢(shì)所趨；而取代進(jìn)口，發(fā)展我國(guó)的化學(xué)發(fā)光檢測(cè)事業(yè)，正是臨床檢驗(yàn)界著手發(fā)展的方向。由此，我公司自1998年立項(xiàng)至今，致利于化學(xué)發(fā)光檢測(cè)方案設(shè)計(jì)，自行開發(fā)了具有國(guó)內(nèi)領(lǐng)先水平的化學(xué)發(fā)光底物，與國(guó)外知名檢測(cè)儀器生產(chǎn)商聯(lián)合開發(fā)了化學(xué)發(fā)光全

4、自動(dòng)、半自動(dòng)檢測(cè)儀，并自行設(shè)計(jì)開發(fā)了化學(xué)發(fā)光管理軟件，而今形成了儀器、試劑、軟件全面配套，為我國(guó)的臨床檢驗(yàn)界提供了一套完善的解決方案。一、化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)【概述】本世紀(jì)70年代中期Arakawe首次報(bào)道用發(fā)光信號(hào)進(jìn)行酶免疫分析，利用發(fā)光的化學(xué)反應(yīng)分析超微量物質(zhì)，特別是用于臨床免疫分析中檢驗(yàn)超微量活性物質(zhì)。目前，這一技術(shù)已從實(shí)驗(yàn)室的稀有技術(shù)過(guò)渡到臨床醫(yī)學(xué)的常規(guī)檢測(cè)手段?；瘜W(xué)發(fā)光免疫分析（ChemiluminescenceImmunoassay，CLIA）是將化學(xué)發(fā)光或生物發(fā)光體系與免疫反應(yīng)相結(jié)合，用于檢測(cè)微量抗原或抗體的一種新型標(biāo)記免疫測(cè)定技術(shù)。其檢測(cè)原理與放射免疫（RIA

5、）和酶免疫（EIA）相似，不同這處是以發(fā)光物質(zhì)代替放射性核素或酶作為標(biāo)記物，并藉助其自身的發(fā)光強(qiáng)度直接進(jìn)行測(cè)定?；瘜W(xué)發(fā)光免疫分析既具有放射免疫的高靈敏度，又具有酶聯(lián)免疫的操作簡(jiǎn)便、快速的特點(diǎn)，易于標(biāo)準(zhǔn)化操作。且測(cè)試中不使用有害的試劑，試劑保持期長(zhǎng)，應(yīng)用于生物學(xué)、醫(yī)學(xué)研究和臨床實(shí)驗(yàn)診斷工作，成為非放射性免疫分析法中最有前途的方法之一。【原理】在化學(xué)發(fā)光免疫分析中包含兩個(gè)部分，即免疫反應(yīng)系統(tǒng)和化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)。免疫反應(yīng)系統(tǒng)，其基本原理同酶聯(lián)免疫技術(shù)（ELISA），常采用雙抗體夾心法、競(jìng)爭(zhēng)法、間接法等反應(yīng)模式，如圖1.2，1.3，1.4所示。如圖1.2雙抗體夾心法反應(yīng)原理示意圖Word

6、文檔下載可編輯專業(yè)技術(shù)資料化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)的原理在于免疫反應(yīng)中的酶作用于發(fā)光底物。發(fā)光底物在酶的作用下，底物發(fā)生化學(xué)反應(yīng)并釋放出大量的能量，產(chǎn)生激發(fā)態(tài)的中間體。這種激發(fā)態(tài)中間體，當(dāng)其回到穩(wěn)定的基態(tài)時(shí)，可同時(shí)發(fā)射出光子。利用發(fā)光信號(hào)測(cè)量?jī)x器即可測(cè)量光量子產(chǎn)額，該光量子產(chǎn)額與樣品中的待測(cè)物質(zhì)的量成正比。由此可以建立標(biāo)準(zhǔn)曲線并計(jì)算樣品中待測(cè)物質(zhì)的含量。具體說(shuō)來(lái)，我們采用的是辣根過(guò)氧化物酶（HRP）催化魯米諾（Luminol）底物發(fā)光系統(tǒng)，如圖1.5所示。我們的核心技術(shù)之一在于自行研制開發(fā)的發(fā)光底物系統(tǒng)，該系統(tǒng)與國(guó)外同類產(chǎn)品的比較表明，不僅主要性能指標(biāo)達(dá)到了國(guó)外產(chǎn)品水平，并且由于自行生產(chǎn)

7、，因此大大降低了發(fā)光底物的成本。在該底物系統(tǒng)中，我們采用特殊的復(fù)合型增強(qiáng)劑，發(fā)光快，強(qiáng)度高，發(fā)光平臺(tái)期長(zhǎng)，可達(dá)30~60分鐘，因此完全可以滿足臨床檢測(cè)的需要。其發(fā)光平臺(tái)期測(cè)定結(jié)果如圖1.6所示（1）與放免（RIA）產(chǎn)品比較　　與放射免疫試劑（RIA）比較，化學(xué)發(fā)光避免了放射性核素的污染以及對(duì)操作人員的傷害，大大縮短了反應(yīng)時(shí)間，同時(shí)兼具高靈敏度的優(yōu)勢(shì)。（2）與酶免（ELISA）產(chǎn)品比較靈敏度與可測(cè)范圍遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于酶免產(chǎn)品，兼具ELISA法簡(jiǎn)便的操作方法與較短的反應(yīng)時(shí)間。（3）與進(jìn)口全自動(dòng)發(fā)光比較試劑成本遠(yuǎn)遠(yuǎn)低