植物離體無性繁殖和脫病毒技術ppt課件

《植物離體無性繁殖和脫病毒技術ppt課件》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在教育資源-天天文庫。

1、第四章植物離體無性繁殖和脫病毒技術第二節(jié)植物脫病毒技術要點概述理解：脫毒苗的意義；了解：1、病毒在植物體內的分布及危害。2、植物脫毒苗的鑒定、保存、應用與繁殖。掌握：1、無病毒苗概念；2、植物脫毒的原理和方法。。無病毒苗是指不含該種植物的主要危害病毒，即經檢測主要病毒在植物內的存在表現(xiàn)陰性反應的苗木。病毒對寄主植物可造成毀滅性危害，導致大幅度減產，甚至全株死亡。潛隱性病毒侵染植物造成癥狀不明顯的慢性危害，不易被發(fā)現(xiàn)，尤其危險。國內外解決作物病蟲害的有效途徑是培育無病毒苗，實施農作物無病毒化栽培。一.病毒在植物體內的分布、傳播及危害1.分布在植物體內的

2、分布具有不均勻性，隨植株不同部位和年齡而異。老葉和成熟組織及器官中病毒含量較高根尖、莖尖生長點約0.1~1mm區(qū)域內，幾乎不含病毒。(原因：分生組織細胞分裂和生長速度快，而病毒在植物體細胞內繁殖速度相對較慢；另外，病毒是通過篩管組織或胞間聯(lián)絲傳播至其他組織細胞的，而莖尖分生組織無分化，沒有維管組織。)2）在旺盛分裂的分生細胞中，代謝活性高，競爭抑制了病毒的復制；3）在植物體內，可能存在著病毒鈍化系統(tǒng)，它在分生組織中比其他任何區(qū)域具有更高的活性。4）在莖尖存在高水平內源生長素，也可能抑制病毒的增殖。（二）植物脫病毒方法物理方法化學方法生物方法高溫處理莖

3、尖培養(yǎng)微體嫁接珠心培養(yǎng)愈傷脫毒熱處理脫毒1.熱處理脫毒法熱處理脫毒原理:病毒DNA分子進入細胞后隨植物細胞DNA一起復制。熱處理并不能殺死病毒，只能鈍化病毒活性，使病毒在植物體內增殖減緩或增殖停止，失去傳染能力。作為一種物理效應可以加速植物細胞的分裂，使植物細胞在與病毒繁殖的競爭中取勝。熱處理的方法：（1）溫湯浸漬處理（2）熱空氣處理脫毒法試驗母株在高溫生長室中生長一段時間，其頂端分生組織比次生分生組織生長迅速，后切取其莖尖分生組織進行離體培養(yǎng)。生長室溫度35-40℃光照3000—10000lx熱處理的優(yōu)缺點優(yōu)點:方法簡單，效果明顯。缺點:1)具有局

4、限性，不能去除所有病毒。只對圓形病毒（蘋果花葉病毒），或對線狀病毒（馬鈴薯卷葉病毒）有效；而對桿狀病毒（千日紅病毒）無效。2)熱處理后只有小部分植株能夠存活。極易使植物材料受熱枯死，造成損失3）延長熱處理時間，病毒鈍化效果好，同時也可能會鈍化植物組織中的抗性因子而降低處理效果。生物學方法包括莖尖分生組織培養(yǎng)、微型嫁接、愈傷組織誘導、珠心組織培養(yǎng)。1、莖尖分生組織培養(yǎng)1）原理及依據(jù)病毒在植物體內分布不均，莖尖處含量最少病毒DNA分子與細胞分裂蛋白質合成競爭2）操作程序外植體經表面消毒滅菌后，在解剖鏡下，經無菌操作切取小莖尖，接種到備用培養(yǎng)基上，放入培養(yǎng)

5、室內進行培養(yǎng)，并及時觀察和記錄培養(yǎng)結果。莖尖培養(yǎng)1）莖尖大小：一般以帶1-2片葉原基為好，大小為0.2-0.3毫米為宜，超過0.5毫米時，脫毒效果差。（外植體過小莖尖存活率低）2）培養(yǎng)基：能使莖尖快速生長、分化的培養(yǎng)基均適于脫毒。3）前處理：切取莖尖之前，植物材料如經過預處理，如熱水或熱空氣處理、低溫處理、藥物處理，均可大大提高脫毒效率。4）培養(yǎng)條件：同一般莖尖培養(yǎng)5）外植體生理狀態(tài)：由活躍生長的芽上切取優(yōu)缺點：莖尖越小，去病毒機會越大，脫毒效果就越好，但同時因為其含營養(yǎng)及水量太低，故培養(yǎng)時對培養(yǎng)基的要求就越高，對剝離技術要求也越高。2、微型嫁接應用

6、微型嫁接的原因：木本植物莖尖培養(yǎng)難以生根形成植株。具體做法：將極小的莖尖（0.14mm~1.0mm）作為接穗嫁接到不帶病毒的種子實生苗砧木上，然后將砧木、接穗一起在培養(yǎng)基上培養(yǎng)。優(yōu)點：接穗在砧木上易成活，故可用很小的莖尖來培養(yǎng)，去除病毒幾率大，獲得無病毒苗的可能性大。微嫁接要求的剝離技術高，嫁接成活率與接穗大小呈正相關，而脫毒率與接穗大小呈負相關脫除病毒的關鍵：①要求剝離技術很高②需要考慮砧木和接穗對營養(yǎng)組成的不同要求；③與接穗的取材季節(jié)有密切關系（蘋果4~6月取材嫁接成活率較高。）3、愈傷組織培養(yǎng)脫毒法（1）原理及依據(jù)a、病毒在植物體內分布不均勻b

7、、病毒復制的能力衰退或丟失c、繼代培養(yǎng)的愈傷組織產生抗性變異（2）技術關鍵誘導再生植株的愈傷組織（3）操作程序植物各種器官或組織誘導產生出愈傷組織，愈傷組織多次繼代，然后從愈傷組織再誘導分化芽，長成植株。愈傷組織培養(yǎng)脫毒法脫毒效果不定，常出現(xiàn)一些變異。4、珠心組織病毒是通過維管組織傳播，而珠心組織和維管束系統(tǒng)無直接聯(lián)系，故可以通過珠心組織離體培養(yǎng)獲得無病毒植株。目前已用該方法去除了柑橘銀屑病、葉脈突出病、柑橘裂皮病、速衰病等病毒。缺點：會有20%~30%左右的變異率，同時無毒苗苗期較長。柑橘要6~8年才能結果。三、植物病毒的檢測及無病毒苗的保存和繁殖

8、植物病毒引起癥狀是各異的，在觀賞植物上由病毒引起外部癥狀主要有以下幾種：（1）變色：褪綠、黃化、花葉、斑駁、