《植物離體繁殖》PPT課件

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1、第五章植物離體繁殖2006-4-3植物離體繁殖(Propagationinvitro)植物快繁或微繁（Micropropagation）指利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)對(duì)外植體進(jìn)行離體培養(yǎng)，使其在短期內(nèi)獲得遺傳性一致的大量再生植株的方法。是工廠(chǎng)化育苗的技術(shù)基礎(chǔ)。植物快繁與傳統(tǒng)營(yíng)養(yǎng)繁殖相比的優(yōu)點(diǎn)：繁殖效率高。生長(zhǎng)速度快；培養(yǎng)條件可控制性強(qiáng)；占用空間??；管理方便，利于自動(dòng)化控制；便于種質(zhì)交換和保存。第一節(jié)植物快繁的器官形成方式植物快繁的器官再生主要分為五種類(lèi)型：短枝發(fā)生型叢生芽發(fā)生型不定芽發(fā)生型胚狀體發(fā)生型原球

2、莖發(fā)生型一、短枝發(fā)生型類(lèi)似于微型扦插，指外植體攜帶的帶葉莖段，在適宜的培養(yǎng)環(huán)境中萌發(fā)，形成完整植株，再將其剪成帶葉莖段，繼代再成苗的繁殖方法。能一次成苗，遺傳穩(wěn)定，成活率高，但繁殖系數(shù)低。二、叢生芽發(fā)生型是大多數(shù)植物快繁的主要方式。指外植體攜帶的頂芽或腋芽在適宜培養(yǎng)環(huán)境（含有外源細(xì)胞分裂素）中不斷發(fā)生腋芽而呈叢生狀芽，將單個(gè)芽轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中，誘導(dǎo)生根成苗的繁殖方法。不經(jīng)過(guò)愈傷階段，后代變異小，應(yīng)用普遍，也可用于無(wú)病毒苗的生產(chǎn)。三、不定芽發(fā)生型指外植體在適宜培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件下，形成不定芽，后經(jīng)生根

3、培養(yǎng)，獲得完整植株的繁殖方法。分為通過(guò)愈傷組織產(chǎn)生不定芽，和直接產(chǎn)生不定芽?jī)煞N方式。外植體涉及多種器官，如莖段、葉、根、花器官等。是植物快繁的另一種主要方式，繁殖系數(shù)高。但變異率較高，尤其是通過(guò)愈傷途徑產(chǎn)生的植株。ABEC花燭葉片離體培養(yǎng)及植株再生四、胚狀體發(fā)生型指外植體在適宜培養(yǎng)環(huán)境中，經(jīng)誘導(dǎo)產(chǎn)生體細(xì)胞產(chǎn)生體細(xì)胞胚，從而形成小植株的繁殖方法。分為間接途徑（經(jīng)愈傷途徑）和直接途徑兩種。成苗數(shù)量大、速度快、結(jié)構(gòu)完整。但由于對(duì)其發(fā)生及發(fā)育過(guò)程了解不夠，應(yīng)用上還沒(méi)有前兩種廣泛。Directsomatic

4、embryogenesisinBrassicanapus菊花花瓣體細(xì)胞胚胎發(fā)生及體胚發(fā)育過(guò)程的掃描電鏡觀(guān)察針葉松體細(xì)胞胚及體胚萌發(fā)生長(zhǎng)五、原球莖發(fā)生型是蘭科植物特有的一種快繁方式。指莖尖或腋芽外植體經(jīng)培養(yǎng)產(chǎn)生原球莖的繁殖類(lèi)型。原球莖可以增殖形成原球莖叢。大花蕙蘭原球莖增殖與植株再生第二節(jié)植物快繁的程序植物快繁的程序包括四個(gè)階段：無(wú)菌（或初代）培養(yǎng)的建立繁殖體增殖芽苗生根小植株的移栽馴化Ⅰ：無(wú)菌（或初代）培養(yǎng)的建立母株和外植體的選取：母株性狀穩(wěn)定、健壯、無(wú)病蟲(chóng)害污染。無(wú)菌培養(yǎng)物的獲得外植體的啟動(dòng)生長(zhǎng)

5、：愈傷產(chǎn)生、不定芽發(fā)生或外植體芽直接生長(zhǎng)。通過(guò)需要4-6周。Ⅱ：繁殖體增殖培養(yǎng)材料的增殖。主要增殖方式為誘導(dǎo)叢生芽或不定芽產(chǎn)生，再以芽繁殖芽的方式增殖，蘭科植物為原球莖增殖途徑。4-8周繼代一次。一個(gè)芽苗增殖數(shù)量一般為5-25個(gè)或更多，多次繼代可大量繁殖。增殖培養(yǎng)基：適當(dāng)提高細(xì)胞分裂素和礦質(zhì)濃度增殖體的大小和切割方法Ⅲ：芽苗生根離體生根：也稱(chēng)試管內(nèi)生根。降低無(wú)機(jī)鹽濃度，減少或去除細(xì)胞分裂素，增加生長(zhǎng)素濃度?；铙w生根：也稱(chēng)試管外生根。通常芽苗可先在生長(zhǎng)素中快速浸蘸或在含有相對(duì)高濃度生長(zhǎng)素的培養(yǎng)基中培

6、養(yǎng)5-10天，然后移到基質(zhì)中生根。生根培養(yǎng)時(shí)間一般為2-4周。Ⅳ：小植株的移栽馴化移栽：洗去根部的培養(yǎng)基，將小植株移栽入培養(yǎng)基質(zhì)中。馴化管理：移栽初期要保證空氣濕度，減少葉面蒸騰；弱光照。同時(shí)，逐漸降低空氣濕度，使其適應(yīng)自然環(huán)境條件；增加光照強(qiáng)度。另外注意防止病害的發(fā)生。第三節(jié)影響植物快繁的因素植物快繁的目的是以盡可能高的效率生產(chǎn)試管苗，獲得最大的經(jīng)濟(jì)效益。因此，在快繁時(shí)應(yīng)使各種影響因素處于最適合快繁的狀態(tài)。主要影響因素：外植體培養(yǎng)基培養(yǎng)條件繼代培養(yǎng)移栽一、外植體：外植體的來(lái)源：最適的為莖尖、帶芽

7、莖段，也可以利用葉片、子葉、根段、花器官組織等。外植體生理年齡：幼嫩組織分化能力更強(qiáng)。外植體大?。翰荒芴。駝t影響成活率。除非是用于脫毒苗的生產(chǎn)。二、培養(yǎng)基：基本培養(yǎng)基：MS培養(yǎng)基應(yīng)用最為廣泛。對(duì)于某些植物及生根階段，以1/4或1/2MS較好。蔗糖和葡萄糖濃度為2-4%。生根時(shí)稍低。植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑：主要以細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素的配合使用，調(diào)節(jié)外植體的生長(zhǎng)和分化。另外ABA、GA、CCC等也具有不同的作用。培養(yǎng)基的物理特性：以固體培養(yǎng)較為普遍，也有采用液體培養(yǎng)，如蘭花原球莖的增殖。三、培養(yǎng)條件：光照：

8、1000-3000lx，階段Ⅲ可增強(qiáng)。14-16h/天。溫度：與植物的原產(chǎn)地相應(yīng)。一般為25±2℃。有時(shí)可進(jìn)行高溫或低溫的預(yù)處理。濕度：要求環(huán)境相對(duì)濕度不能太低，一般在70-80%。氣體：要求培養(yǎng)基及培養(yǎng)瓶通氣良好，同時(shí)及時(shí)轉(zhuǎn)接。液體培養(yǎng)要求振蕩培養(yǎng)，促進(jìn)氧化交換。四、繼代培養(yǎng)：主要指對(duì)階段Ⅱ增殖形成的芽叢、胚狀體或原球莖等進(jìn)行轉(zhuǎn)接繼代。繼代間隔時(shí)間一般為20天左右。五、移栽：根系結(jié)構(gòu)不完善的試管苗移栽后不易存活。要求根系結(jié)構(gòu)完整，具根毛，再生根的吸收能力強(qiáng)。葉表皮組織不發(fā)達(dá)的試管