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1、皮膚鱗癌組織中MMP【關鍵詞】皮膚腫瘤;免疫組織化學;明膠酶B;抗原CD34;微血管密度 ExpressionofMMP9inskinsquamouscellcarcinomaanditssignificanceinmicroangiogenesis 【Abstract】AIM:TodetecttheroleandthesignificanceofMMP9inmicroangiogenesisinskinsquamouscellcarcinoma(SCC)andtoobservetherelationbeticrovesseldensity(MVD)in
2、SCC.METHODS:ImmunohistochemicalSPstainingineMMP9expressionandthechangeofMVDunderlightmicroscopein45casesofSCC,19casesofBoalskin.RESULTS:TheexpressionofMMP9inSCCgroupalskingroup(P=0.028,P0.05).ThelevelofMVDinSCCgroupalskingroup(P0.05).CONCLUSION:MMP9ishighlyexpressedinSCC,andmaybeon
3、eofimportantfactorsinangiogenesisofSCC. 【Keys;carcinoma,squamouscellimmunohistochemistry;gelatinaseB;antigens,CD34;microvesseldensity 【摘要】目的:探討皮膚鱗狀細胞癌(SCC)發(fā)生發(fā)展過程中基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP9)對微血管生成的意義.方法:SCC45例,Boan等〔1〕研究表明MMPs在腫瘤血管生成中也有重要作用.明膠酶是MMPs的一個亞類,包括基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP2)和基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP9),近年MMP9與
4、腫瘤血管生成的關系逐漸被重視.MMP9不僅是降解基底膜和ECM的關鍵酶,而且在腫瘤間質(zhì)血管生成中起重要作用.在皮膚鱗癌中,有關MMP9的研究報道很少,其結果也不完全一致.我們通過免疫組織化學技術檢測Boouscellcarcinoma,SCC)組織中MMP9和CD34的表達,并對MMP9的表達與微血管密度(MVD)做定量分析,探討皮膚鱗狀細胞癌、BoAb(MAB0245)和CD34mAb((MAB0034),免疫組化SP試劑盒(KIT9710)及DAB試劑盒均購自福州邁新生物技術有限公司. 1.2方法所有組織均經(jīng)40g/L甲醛液固定,常規(guī)石蠟包埋切片,連續(xù)
5、切片5張,厚約4μm.采用SP法,免疫組化染色程序按試劑盒說明書進行.陽性對照采用自身對照,用PBS代替一抗和二抗進行陰性對照.MMP9和CD34均采用高溫高壓抗原修復.MMP9結果判定:在不知任何背景資料的情形下,采用雙盲法進行判定,以腫瘤細胞膜和/或細胞質(zhì)出現(xiàn)淡棕黃色顆粒為陽性,并按著色強弱分級:無色為0,淺黃色為1,深黃色為2,棕黃色為3;著色范圍以在10×40高倍鏡下隨機選區(qū)5個視野(每個視野記數(shù)100個細胞)計數(shù)陽性細胞所占的百分數(shù)均值:<25%為1,25%~49%為2,50%為3.上述兩項相加為MMP9的表達強度積分:<2為陰性,<3為弱陽性(+
6、),3~4為陽性(),>4為強陽性().MVD計數(shù)參照文獻〔3-4〕方法進行微血管計數(shù),先在低倍鏡(×100)下觀察確定血管密度最高處,在(×200)視野下選擇3個高血管密度區(qū),計算單位視野(×200)平均血管數(shù).單個內(nèi)皮細胞或內(nèi)皮細胞簇,均作為一個血管計數(shù),而直徑大于約8個紅細胞的血管,有較厚肌層的血管以及硬化區(qū)的血管不在計數(shù)范圍內(nèi). 統(tǒng)計學處理:采用SPSS10.0統(tǒng)計軟件包進行處理,根據(jù)資料類型組間比較分別采用方差分析和χ2檢驗,P0.05為有統(tǒng)計學意義. 2結果 2.1MMP9MMP9陽性改變?yōu)榧毎|(zhì)或細胞膜呈棕黃色,偶爾可見細胞核著色,陽性顆
7、粒多呈團塊狀.正常人皮膚組織中MMP9呈弱陽性表達,主要表達于顆粒層和棘細胞層,真皮層中纖維樣細胞、單一核細胞等見陽性染色.BD組織中表皮全層均有MMP9均勻彌漫表達.SCC中MMP9在癌巢組織彌漫分布,以腫瘤周邊表達強烈(圖1)MMP9表達在正常皮膚組、BoMP9在SCC組中高于BoMP9高于正常皮膚組(P=0.028,P0.05).在SCC組中MMP9的表達與患者的年齡、性別、腫瘤組織的病理分級均無關(P>0.05). 表1MMP9在正常皮膚組、BoanD,StemY,ShpizerT,etal.ExpressionofMMP9,TIMP1,CD34a
8、ndfactor8asprognosticmarke