白芨快速繁殖體系的建立

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1、摘要摘要白芨(Bletillastriata)是蘭科(Orchidaceae)白芨屬(Bletilla)多年生草本植物,具有較高的觀賞與藥用價(jià)值。本文以野生白芨種子為材料,采用TTC染色法研究了不同貯藏時(shí)間對(duì)白芨種子活力的影響;采用正交實(shí)驗(yàn)方法,分別以6-BA、NAA、TDZ和蝸牛酶濃度、溫度以及處理時(shí)間為處理?xiàng)l件,研究了上述因子對(duì)種子無(wú)菌萌發(fā)的影響;分別用從白芨根分離出的9種真菌在燕麥培養(yǎng)基上與白芨種子共生培養(yǎng),研究單一菌株對(duì)種子萌發(fā)的影響;以種子無(wú)菌培養(yǎng)出來(lái)的原球莖為材料,以正交設(shè)計(jì)法分析3種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑(6-BA、NAA、TDZ)對(duì)原

2、球莖的增殖與分化的影響;同時(shí)探討了不同基本培養(yǎng)基、不同濃度的活性炭和植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑NAA對(duì)生根的影響;采用不同基質(zhì)移栽試管苗,統(tǒng)計(jì)不同移栽基質(zhì)配比條件下對(duì)白芨幼苗的成活率及生長(zhǎng)狀況。將從根部分離出來(lái)的A、B、C、F等4種菌種,以懸浮液的形式,接種到移栽試管苗的基質(zhì)中,統(tǒng)計(jì)試管苗成活率和測(cè)量株高的生長(zhǎng)量,探究共生真菌對(duì)白芨苗的移栽成活率及生長(zhǎng)的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:1、種子的活力隨著貯藏時(shí)間的增加,活力逐漸降低,但沒(méi)有明顯影響。貯藏時(shí)間為7d、30d、60d時(shí),種子活力分別是95.2%、94.3%、93.5%。2、白芨種子在MS+1.5mg/L6

3、-BA+0.5mg/LNAA+0.03mg/LTDZ的培養(yǎng)基下,萌發(fā)率可達(dá)91.6%,發(fā)芽率整齊。在水溫25℃、處理40min,濃度為3%蝸牛酶處理后,種子萌發(fā)率可達(dá)93.4%。分離的9種菌株中,菌株A、B、C和F有一定的提高種子萌發(fā)率的作用,菌株A萌發(fā)率23.5%、菌株B22.6%、菌株C29.7%和菌株F28.9%。菌株C處理的種子有少量長(zhǎng)出第2片葉,可能對(duì)幼苗的生長(zhǎng)有促進(jìn)作用;D、E、G、H、I等5種菌株處理的種子萌發(fā)率均低于對(duì)照組。3、原球莖增殖的最適培養(yǎng)基為MS+0.4mg/LNAA+0.9mg/L6-BA+0.06mg/LTDZ,

4、增殖率為123.4%,并且6-BA對(duì)原球莖增殖和分化作用顯著,NAA和TDZ作用不顯著;原球莖分化的最適培養(yǎng)基為MS+0.6mg/L6-BA+0.2mg/LTDZ+1.5mg/LNAA,分化率為69.4%;生根的最佳培養(yǎng)基為1/2MS+0.05%活性炭+0.5mg/LNAA,生根率為97.3%。4、移栽30d后,試管苗的存活率相差不大,均能達(dá)到93.6%以上。但植株生長(zhǎng)狀況差別很大,以基質(zhì)為樹(shù)皮、刨花和鋸末為3:6:1苗床的小苗,葉片開(kāi)展,II摘要長(zhǎng)勢(shì)旺盛;A、B、C和F等4種菌株,對(duì)試管苗的成活率影響相差不大,分別為64.44%、68.89

5、%、66.67%、62.22%。關(guān)鍵詞:白芨;無(wú)菌播種;共生培養(yǎng);蝸牛酶;增殖;移栽IIIABSTRACTABSTRACTBletillastriatawasbelongedtocampanulaceaecodonopsisperennation,andhadhighornamentalandmedicalvalue.Inthispaper,thetissuecultureandrapidpropagationofBletillastriata(Thunb.)Reichb.F.wereexplored.Thewildseedwasserved

6、asexperimentalmaterials,andTTCstainmethodwasusedtoexploretheeffectofdifferentstorgeonseedvigor.Theinfluenceofexperimentalfactor,including6-BA,NAA,TDZ,andsnailenzymeconcentrationandprocessingtime,onseedsterilegerminationwasresearched.Theeffectofthreeplantgrowthregulator(NAA,

7、TDZ,6-BA)onmultiplicationproliferationanddifferentiationwasstudied,whiletheinfluenceofdifferentmedium,activecarbon,andNAAonroot.Thethreeplantgrowthregulators(NAA,TDZ,6-BA)ontheproliferationanddifferentiationoftheoriginalbulbsanalyzedbyorhthogonaldesign.Atthesametime,theplan

8、tgrowthregulatorNAAanddifferentconcentrationsofactivatedcarbonwithdifferentbasicme

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