基因突變鑒定

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1、基因突變的鑒定(2010-07-0517:37:50)轉(zhuǎn)載▼標(biāo)簽：雜談一．植物形態(tài)突變的鑒定經(jīng)人工誘發(fā)或自然發(fā)生的變異是否屬于真實(shí)的基因突變，是顯性突變還是隱性突變，突變頻率的高低等，都應(yīng)進(jìn)行鑒定。1．真實(shí)遺傳變異的鑒定??變異有可遺傳的變異，有不可遺傳的變異?；虮旧戆l(fā)生化學(xué)性質(zhì)的變化而引起的變異是可以遺傳的，因環(huán)境條件而導(dǎo)致的表現(xiàn)型變異是不遺傳的。所以，在誘變處理材料的后代中一旦發(fā)現(xiàn)與原始親本不同的變異體，首先要鑒定它是否真實(shí)遺傳。例如，在農(nóng)作物誘變育種過(guò)程中，某種高桿植物經(jīng)理化因素處理后，在其后代中發(fā)現(xiàn)個(gè)別矮桿植株，這種變異究竟是基因突變引起的呢？還是

2、由環(huán)境條件引起的呢？二者如何鑒別呢？??把變異體與原來(lái)的親本種植在土壤條件和栽培條件均勻一致的環(huán)境下，若變異體與原始親本的表現(xiàn)大體相似，即原來(lái)的變異消失了，說(shuō)明它不是遺傳的變異；反之，若變異體與原始親本不同，仍然表現(xiàn)為矮桿，說(shuō)明它是基因突變的結(jié)果。2．如何鑒別顯性突變和隱性突變??利用雜交試驗(yàn)的方法，可以區(qū)分顯性突變還是隱性突變。以上例而言，讓矮桿突變體植株與原始親本雜交，若F1表現(xiàn)高桿，F(xiàn)2中既有高桿，也有矮桿植株，說(shuō)明矮桿突變是隱性突變。若是顯性突變情況又如何呢？F1表現(xiàn)為矮桿，F(xiàn)2中矮桿：高桿為3：1。3．利用花粉直感現(xiàn)象估算配子的突變率??為了測(cè)定玉

3、米子粒非甜籽變?yōu)樘鹆＃⊿u→su）的基因突變頻率，以甜粒玉米純合體作母本，用經(jīng)誘變處理過(guò)的非甜粒純合體的花粉授粉。susu×SuSu??在正常情況下，非甜（Su）對(duì)甜(su)為顯性，授粉后的果穗應(yīng)該完全是非甜粒種子，假如在果穗上發(fā)現(xiàn)甜粒種子，就可以認(rèn)為是Su花粉經(jīng)誘發(fā)處理以后發(fā)生了Su→su突變，并可計(jì)算出突變頻率。44．如何鑒別禾谷類作物的體細(xì)胞突變??稻麥等禾谷類作物有分蘗存在，經(jīng)誘變處理的種子長(zhǎng)成的植株其體細(xì)胞突變往往只存在于個(gè)別分蘗上，因而只影響單個(gè)的穗子。假如是顯性突變，很容易在M1代發(fā)現(xiàn)，M1按單穗分別收獲，將M1中表現(xiàn)突變性狀的穗子單獨(dú)種植，M

4、2如發(fā)生分離，還必須種植M3代，才能確定顯性植株是純合體還是雜合體。若是隱性突變，也必須分株、分穗收獲，下一代按穗種植，即每一個(gè)M1穗上的子粒種成一行（M2），突變體在M2代同時(shí)表現(xiàn)、純合。一般地說(shuō)，鑒別工作在M2代即可通過(guò)。當(dāng)然進(jìn)一步的遺傳研究是另一回事。??以大麥為例，說(shuō)明隱性突變的鑒別過(guò)程。假定有一大麥植株有一個(gè)分蘗發(fā)生了隱性突變（A-a），其它分蘗保持原來(lái)的基因型（AA），但在M1代卻沒有表型特征，M1代成熟時(shí)按單穗分別收獲，以便穗行播種。在M2代中，帶有突變基因的那個(gè)穗行大約有四分之一的植株表現(xiàn)為突變性狀（aa），其余的穗行都表現(xiàn)正常。隱性突變的鑒

5、別到此就可以了。假如要做進(jìn)一步的驗(yàn)證，可以將M2代按株收獲，種成M3代株系。來(lái)自于M1代突變穗的那些M3中，將有2/4的株行又分離出1/4的突變體，說(shuō)明它們?cè)贛2是Aa雜合體；1/4的株行完全表現(xiàn)為突變性狀，它們?cè)贛2代就是aa純合體，也有1/4的株系全部為正常性狀，它們?cè)贛2代是AA純合體。來(lái)自M1代非突變穗的那些株行當(dāng)然表現(xiàn)為原來(lái)的性狀。二．微生物中生化突變的鑒定??以x-ray或uv照射紅色面包霉的分生孢子，可以誘發(fā)突變。讓誘變過(guò)的分生孢子與相對(duì)交配型的野生型分生孢子融合（交配），產(chǎn)生分離的子囊孢子。從子囊中取出子囊孢子，分別培養(yǎng)在完全培養(yǎng)基上。突變型

6、和野生型都能在完全培養(yǎng)基上生長(zhǎng)和發(fā)育。從完全培養(yǎng)基上生長(zhǎng)起來(lái)的菌絲體又形成分生孢子。取出一部分分生孢子培養(yǎng)在基本培養(yǎng)基上，觀察他們的生長(zhǎng)狀況，若生長(zhǎng)正常，表示沒有發(fā)生突變，如果不能生長(zhǎng)，表明可能發(fā)生了突變。到底發(fā)生了什么突變呢？還要繼續(xù)分析。把突變型的分生孢子從完全培養(yǎng)基中取出來(lái)，分別培養(yǎng)在加入不同氨基酸或不同維生素的培養(yǎng)基中。若突變型在加入了某種aa的基本培養(yǎng)基中不能生長(zhǎng)，說(shuō)明這一突變與此aa無(wú)關(guān)，若突變型在加了某種aa的基本培養(yǎng)基中能正常生長(zhǎng)，說(shuō)明該突變型是合成該種aa的基因發(fā)生了突變，失去了合成這種aa的能力，在基本培養(yǎng)基（不含有這種aa）中不能生長(zhǎng)，

7、若加入該種aa，突變體就能生長(zhǎng)。若該突變體在含有賴氨酸（lys）的基本培養(yǎng)基中能夠生長(zhǎng)，就將其命名為lys營(yíng)養(yǎng)缺陷型，或賴氨酸依賴型（lys-），對(duì)應(yīng)的野生型用lys+表示之。三．果蠅中突變基因的檢測(cè)Morgan等人在小小的果蠅中發(fā)現(xiàn)了幾百種突變型，并用于遺傳學(xué)研究。但是定量地檢測(cè)新突變，還有賴于Morgan的學(xué)生Muller所發(fā)展的幾種獨(dú)創(chuàng)性技術(shù)?，F(xiàn)介紹用Muller-5技術(shù)檢出果蠅x-chr.上的隱性突變，特別是致死突變的步驟。Muller-5品系，是人工創(chuàng)造的一個(gè)果蠅品系。它的X-chr.上帶一個(gè)棒眼基因B，一個(gè)杏色眼wa和一個(gè)倒位區(qū)段。倒位區(qū)段的存在

8、可以抑制雜合體的交換重組。4用經(jīng)誘變處理的雄蠅，與M