葡萄糖測定SOP_GLU臨床意義_檢驗(yàn)科生化項(xiàng)目SOP

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1、葡萄糖測定文件編號:版本號:頁碼:第頁共頁1檢測原理在5′-三磷酸腺苷(ATP)和鎂存在的條件下,己糖激酶(HK)催化葡萄糖的磷酸化,從而形成葡萄糖-6-磷酸(G-6-P)和二磷酸腺苷(ADP)。煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)存在的條件下,G-6-P隨后被葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G-6-PDH)氧化,繼而生成6-磷酸葡萄糖鹽和還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)。每存在一個摩爾的葡萄糖,一個摩爾的NAD即被還原成一個摩爾的NADH。由NADH引起的吸收率(同時(shí)也是葡萄糖濃度)是用雙波長的(340和

2、383nm)終點(diǎn)技術(shù)測定。葡萄糖+ATPHK葡萄糖-6-磷酸鹽+ADPMG++葡萄糖-6-磷酸鹽+NAD+G-6-PDH6-磷酸葡萄糖鹽+NADH+H+2標(biāo)本采集與處理2.1采血方法空腹采不抗凝靜脈血或氟化鈉抗凝靜脈血2~3ml。2.2標(biāo)本保存肌酐在血清或血漿中冷藏可穩(wěn)定7天,可無限期冷凍保存。肌酐在尿液中在室溫可穩(wěn)定2-3天,冷藏穩(wěn)定5天。2.3注意事項(xiàng)糖酵解將使室溫中放置的正常未離心的凝固血液中的血清葡萄糖每小時(shí)下降大約5%到7%。在分離的但未溶血的無菌血清中,葡萄糖濃度在25°C條件下將保持穩(wěn)

3、定8小時(shí),在4°C條件下將保持穩(wěn)定72小時(shí);在更長的儲存條件下將發(fā)生穩(wěn)定性的變化。3在樣本中加入碘醋酸鈉或者氟化鈉(NaF)后,糖酵解可以被抑制,并且葡萄糖在室溫下最長可以保持穩(wěn)定3天。標(biāo)本應(yīng)避免溶血、脂血、黃疸。3試劑和設(shè)備3.1試劑采用西門子醫(yī)學(xué)診斷產(chǎn)品(上海)有限公司提供的試劑盒。3.1.1試劑組成試劑船1~6孔為HK15U/mL,葡萄糖-6-磷酸鹽30U/mL,NAD8mmol/L,ATP15mmol/L,MG++7.4mmol/L,穩(wěn)定劑,緩沖液,液體。3.1.2試劑準(zhǔn)備直接使用。葡萄糖測

4、定文件編號:版本號:頁碼:第頁共頁3.1.3試劑保存試劑2~8℃保存,有效期內(nèi)穩(wěn)定。3.2質(zhì)控品美國BIORAD液體多項(xiàng)質(zhì)控品。3.3校準(zhǔn)品西門子校準(zhǔn)品。3.4儀器SIEMENSDIMENSIONXpandPlus/RxLMax全自動生化分析系統(tǒng)。4操作程序4.1檢測過程流程簽收樣品→離心→上機(jī)檢測→審核報(bào)告→簽發(fā)報(bào)告→標(biāo)本保存。4.2樣品簽收嚴(yán)格按照標(biāo)本接收程序簽收標(biāo)本。4.3標(biāo)本處理以2500~3000r/min,離心6~10min,分離血清上機(jī)測定。如不能及時(shí)檢測,分離血清于2-8℃保存。4.

5、4標(biāo)本檢測4.4.1手工編排測試項(xiàng)目:樣品按編號裝入樣品架,主屏幕按F1:ENTERDATA,在Position處輸入樣品所在樣品架字母及所在位置號,按enter,在PatientName處選擇性輸入病人名字,按enter,在SampleNo處輸入樣品號,按enter,在Tests處使用檢驗(yàn)鍵或檢驗(yàn)組合鍵選擇相應(yīng)項(xiàng)目,根據(jù)需要選擇相應(yīng)的按鍵改變Mode(按F7:MEXTMODE選擇樣品管類型)、Priority(按F4:NEXTPRIORITY選擇樣品的處理模式)、Fluid(按F8:NEXTFLU

6、ID選擇標(biāo)本類型)。4.4.2雙向條形碼標(biāo)本分離血清后直接運(yùn)行儀器。4.4.3運(yùn)行:輸入完畢后按F3:LOADLIST,確認(rèn)樣品已經(jīng)裝載在樣本盤上,按Run鍵,儀器開始進(jìn)行樣品檢測。4.4.4檢驗(yàn)后標(biāo)本保存標(biāo)本檢驗(yàn)完成后用采血管原蓋蓋緊,保存于標(biāo)本冷藏庫內(nèi),按日期放好,保存期為7天。5校準(zhǔn)程序5.1校準(zhǔn)品準(zhǔn)備和儲存每瓶加2.0ml蒸餾水復(fù)融,輕輕旋轉(zhuǎn)搖勻,室溫放置30min,即可使用。5.2校準(zhǔn)條件在室內(nèi)質(zhì)控失控、更換試劑批號、更換儀器主要配件或進(jìn)行大保養(yǎng)后均需校準(zhǔn)。無特殊情況校準(zhǔn)周期為3個月。葡萄

7、糖測定文件編號:版本號:頁碼:第頁共頁5.3校準(zhǔn)程序主屏幕按F5:PROCESSCTRL→F1:CALIBRATION,按enter→F2:SET-UP&RUN,按項(xiàng)目鍵選擇所需要校準(zhǔn)的項(xiàng)目名稱METHOD,選中相應(yīng)試劑批號LOT,輸入操作者姓名Operator、校準(zhǔn)液貨號CalibratorProduct和批號Lot,以及最低值校準(zhǔn)液在樣品架上的位置StartatPosition,最后把校準(zhǔn)液各個水平的值按照由低到高的順序輸?shù)綄?yīng)位置,按F4:ASSIGNCUPS指定樣品杯,校準(zhǔn)液按順序排列在樣品

8、架上,按F7:LOAD/RUN→F4:RUN或“RUN”運(yùn)行鍵運(yùn)行校準(zhǔn)程序。6質(zhì)量控制程序6.1質(zhì)控品準(zhǔn)備和儲存質(zhì)控品為液體,可以直接使用。原包裝質(zhì)控品-10~-70℃可保存到瓶身有效期,未開啟2~8℃可保存90d,開啟后2~8℃可保存30d。6.2質(zhì)控水平和分析批長度每24小至少進(jìn)行一批,每批2個濃度水平。6.3質(zhì)控操作程序與4.4標(biāo)本檢測步驟相同,只需要按F4:NEXTPRIORITY將ROUTINE修改成QC狀態(tài)。7性能參數(shù)本法線性范圍為0~27.8mmol/L

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