vegf、hif－１α在腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及相關(guān)性研究

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1、VEGF、HIF—1a在腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及相關(guān)性研宄吳林薛際航張占普內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院神經(jīng)外科內(nèi)蒙古呼和浩特010050【摘要】目的木研究旨在探討VEGF、HIF-1α在不同病理級(jí)別的腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)情況及二者之間的相關(guān)性，闡明其內(nèi)在機(jī)制，以期在膠質(zhì)瘤的治療方面獲得突破性進(jìn)展.方法采用免疫組織化學(xué)SABC法檢測(cè)VEGF、HIF-1α表達(dá)蛋白在64例不同病理分級(jí)的膠質(zhì)瘤及5例正常腦組織中的表達(dá)情況.結(jié)果VEGF、HIF-1α在正常腦組織中均無(wú)表達(dá);在64例膠質(zhì)瘤中,VEGF陽(yáng)性表達(dá)為45例、占70.3%,HIF—1α陽(yáng)性表達(dá)為4

2、7例、占73?4%,1—II級(jí)、III級(jí)和IV級(jí)間的表達(dá)有顯著性差異(P<0.05).且膠質(zhì)瘤中VEGF的表達(dá)與HIF-1α表達(dá)密切相關(guān)(rs0.720,P<0.01}.結(jié)論VEGF、HIF-1α表達(dá)有一定的相關(guān)性，其表達(dá)與膠質(zhì)瘤的惡性程度成正相關(guān)，共同在膠質(zhì)瘤的血管形成過(guò)程中起重要作用.【關(guān)鍵詞】膠質(zhì)瘤；VEGF;HIF-1α【中圖分類號(hào)】R739.4【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B【文章編號(hào)】1008—6315(2015)12—0354—02腦膠質(zhì)瘤是來(lái)源于神經(jīng)上皮的、顱內(nèi)最常見的惡性腫瘤，約占全部顱內(nèi)腫瘤的40%—50%.其具有血供豐富和侵襲性增殖的生

3、物學(xué)特征，血管生成在其生長(zhǎng)和侵襲過(guò)程中起重要作用.血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)足現(xiàn)枉研究較多的促進(jìn)腫瘤血管生成的物質(zhì),VEGF的表達(dá)受各種因素調(diào)控,缺氧是迄今為止發(fā)現(xiàn)的最強(qiáng)的誘導(dǎo)VEGF表達(dá)因素［1—3】.缺氧誘導(dǎo)因子1(hypoxiainduciblefactor1,HIF—1)是由HIF—1α、HIF—1β組成的異源二聚體轉(zhuǎn)錄因子，其中HIF—1α是專一受氧調(diào)節(jié)的亞單位,決定了HIF-1的活性.VEGF和HIF-1α在腫瘤的新生血管生長(zhǎng)過(guò)程中起到非常重要的作用［4、

4、5］.1.1實(shí)驗(yàn)標(biāo)本收集10年一13年內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)神附屬醫(yī)院經(jīng)外科手術(shù)切除、且保存完好的64例腦膠質(zhì)瘤組織的石蠟標(biāo)本，所有標(biāo)本均經(jīng)病理檢査確診.術(shù)前均未行放、化療，冇完整的臨床病歷資料，其中男性38例，女性26例,年齡18-64歲，平均年齡為38.42歲.膠質(zhì)瘤的分類及分級(jí)診斷標(biāo)準(zhǔn)參照2000年WHO的新標(biāo)準(zhǔn)，包括I一II級(jí)膠質(zhì)瘤26例，其中星形細(xì)胞瘤12例、混合型星形細(xì)胞瘤6例、少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤5例、室管膜瘤3例;III級(jí)膠質(zhì)瘤18例，其中間變性星形細(xì)胞瘤9例、間變性室管膜瘤3例、間變性少突星形細(xì)胞瘤6例;IV級(jí)膠質(zhì)瘤20例、其中膠質(zhì)母細(xì)胞瘤14例、髓母細(xì)胞瘤4例、膠質(zhì)肉瘤2

5、例.(見表1.1)另5例作為對(duì)照的正常腦組織,均取自神經(jīng)外科因急性顱腦損傷行內(nèi)減壓術(shù)的患者，取材后以10%福爾馬林固定，常規(guī)灑精脫水、石蠟包埋,用于免疫組化.1.2主要試劑及方法兔抗人HIF-1α(即用型)多克隆抗體及兔抗人VEGF(即用型)單克隆抗體均購(gòu)自武漢博士德生物技術(shù)有限公司.免疫組化染色試劑盒(SABC)購(gòu)自武漢博士德生物技術(shù)冇限公司.采用SABC法檢測(cè)，按常規(guī)步驟進(jìn)行.1.3結(jié)果判定方法及標(biāo)準(zhǔn)HIF-1α陽(yáng)性表達(dá)部位主要在胞核，而VEGF陽(yáng)性表達(dá)部位主要在胞漿，呈棕色或棕黃色顆粒狀.隨機(jī)觀察10個(gè)高倍鏡視野，按每高倍鏡視野陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)百分比記分

6、:陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)小于5%為0分;陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)為5—25%為1分;陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)為26—50%為2分;陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)為51-75%為3分;陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)大于75%為4分.同吋按著色強(qiáng)度記分:染色弱，呈淡黃色者記為1分;染色中等,呈黃色者記為2分;染色強(qiáng)，呈棕黃色者記為3分.兩種記分的乘積決定病例的陽(yáng)性與否:0分為陰性(一)；1一4分為弱陽(yáng)性(+),5-8分為中度陽(yáng)性(++),9-12分為強(qiáng)陽(yáng)性(+++)[6-、7].實(shí)驗(yàn)中設(shè)立陰性和空閂對(duì)照，以山羊血清代替一抗作為陰性對(duì)照、以PBS代替一抗作為空白對(duì)照，結(jié)果均為陰性.1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理.組間比較應(yīng)用x2

7、檢驗(yàn),HIF—1α與VEGF蛋白兩者關(guān)系用spearman等級(jí)相關(guān)分析，以P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義.2結(jié)果2.1VEGF在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)情況VEGF在5例正常腦組織中均無(wú)陽(yáng)性表達(dá)，在64例膠質(zhì)瘤中45例表達(dá)陽(yáng)性，占70.3%J_II級(jí)、III級(jí)和IV級(jí)間的表達(dá)冇顯著性差異(P<0.05).如表2.1.2.2HIF—1α在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)情況HIF—1α在正常腦組織中無(wú)陽(yáng)性表達(dá)，在64例膠質(zhì)瘤中47例表達(dá)陽(yáng)性，占73.4%.1一II級(jí)、III級(jí)和IV級(jí)間的表