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1、抗人肝癌免疫毫微粒的制備及體外免疫學(xué)性質(zhì)的摘要目的：構(gòu)建人肝癌特異的免疫毫微粒，探討免疫毫微粒體外對(duì)靶細(xì)胞的特異性結(jié)合特性及殺傷活性。方法：采用異型雙功能交聯(lián)劑SPDP將人肝癌單抗HAb18與載米托蒽醌的白蛋白毫微粒化學(xué)偶聯(lián)，構(gòu)建人肝癌特異的免疫毫微粒;采用玻片凝集試驗(yàn)，免疫熒光法及熒光染色阻斷法，花環(huán)形成實(shí)驗(yàn)及花環(huán)形成阻斷實(shí)驗(yàn)，掃描電鏡，3H-TdR摻入試驗(yàn)證明抗體與載藥毫微粒偶聯(lián)及免疫毫微粒能特異性結(jié)合并殺傷靶細(xì)胞SMMC-7721人肝癌株。結(jié)果：HAb18抗體已偶聯(lián)到載藥毫微粒上;免疫毫微粒能良好地與靶細(xì)胞特異性結(jié)合，對(duì)靶細(xì)胞具有劑量依賴性、選擇性殺傷作用。結(jié)論：SPDP偶聯(lián)方法能
2、用于構(gòu)建免疫毫微粒;人肝癌特異免疫毫微粒體外能特異性結(jié)合并殺傷人肝癌細(xì)胞株。關(guān)鍵詞毫微粒單克隆抗體人肝癌米托蒽醌中國(guó)圖書分類號(hào)R392.2R730.61Preparationandimmunologicalcharacterizationofmitoxantrone-loadedimmuno-nanoparticlesagainsthumanhepatomaLIUXiao-BoCAIMei-Ying(DepartmentofImmunology,edicalSciences,Chengdu610041)AbstractObjective：Toconstructhumanhepatoma-
3、specificimmunonanoparticlesandobserveinvitrobindingandkillingoftargetcellsbytheimmunonanoparticles.Methods:HeterobifunctionalcrosslinkerSPDPanhepatoma)itoxantrone-loadedbovineserumalbuminnanoparticles(DHAQ-BSA-NP).Alotofinvitroexperiments,suchasslideagglutinationtest,immunofluorescentassay,immuno
4、fluorescentblockingtest,rossetformationtest,rossetformationblockingtestandscanningelectronmicroscopyetc,couplingofantibodiestonanoparticlesandspecificbindingofimmunonanoparticlesmunonanoparticlestotargetcells.Results:McAbHAb18munonanoparticlescouldbindspecificallytohumanhepatomaSMMC-7721cellsande
5、xertselectivekillingeffectsonthetargetcellsethodforconstructingimmunonanoparticles.Humanhepatoma-specific-immunonanoparticleshavecapacityofinvitroselectivecoatingandkillinghumanhepatomacellline.Keyanhepatoma將化療藥物吸附、包裹或夾嵌在白蛋白等生物可降解材料中制成毫微粒(Nanoparticles，NP)，應(yīng)用于腫瘤治療是目前藥劑學(xué)中研究熱點(diǎn)[1，2]。毫微粒具有載藥量大、緩釋藥物、藥
6、物無(wú)需化學(xué)偶聯(lián)而以游離形式被包封等多重優(yōu)點(diǎn)，此外它具有靶向給藥特性，即能將藥物選擇性濃集于病變部位，而不分布或少分布在其它正常部位[1，3]。然而毫微粒的這種靶向給藥是器官被動(dòng)靶向，無(wú)主動(dòng)靶向結(jié)合癌細(xì)胞作用，因此毫微粒釋藥殺傷癌細(xì)胞同時(shí)，不可避免對(duì)正常組織造成損傷[4]。將腫瘤特異性抗體吸附或交聯(lián)到載藥毫微粒上，制備抗體導(dǎo)向的毫微粒即免疫毫微粒(Immunonanoparticles)，將具有載藥量大、緩釋藥物、主動(dòng)靶向性抗癌作用等多種特性，是一種新型的腫瘤導(dǎo)向治療制劑[4-6]。我們將抗人肝癌單克隆抗體HAb18與載米托蒽醌(Mitoxantrone,DHAQ)的牛血清白蛋白毫微粒(D
7、HAQ-BSA-NP)共價(jià)交聯(lián)，構(gòu)建了人肝癌特異的免疫毫微粒(HAb18-DHAQ-BSA-NP)。本文報(bào)道了此免疫毫微粒的制備、體外免疫學(xué)結(jié)合特性及其選擇性抗瘤作用。1材料與方法1.1DHAQ-BSA-NP凍干品本校藥學(xué)院張志榮教授惠贈(zèng)，批號(hào)981216，4℃保存?zhèn)溆谩?.2抗體抗人肝癌單克隆抗體HAb18由第四軍醫(yī)大學(xué)病理教研室陳志南教授惠贈(zèng)。抗人SIgA單抗4E3純品由本室自制，本研究中用作對(duì)照抗體。免抗小鼠IgG抗血清，F(xiàn)I
