淺談熱休克蛋白70，90在口腔鱗癌及癌前病變中的表達及意義

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1、淺談熱休克蛋白70，90在口腔鱗癌及癌前病變中的表達及意義：殷操，沈麗佳，謝思明，謝立群【熱休克蛋白；HSP70；HSP90；口腔癌；口腔扁平苔蘚【AbstractAIM:Todetecttheexpressionofheatshockprotein70,90(HSP70,HSP90)inoralsquamouscellcarcinoma(OSCC)andoralprecancerouslesionsandinvestigatetherolesofHSP70andHSP90.METHODS:SABCimmunohistochemicalmeth

2、odsaloralmucosa.RESULTS:TherateofthepositiveorhighexpressionofHSP70inOLParkablyhigherthanthoseofnormaloralmucosa,oralleukoplakiaandOSCC（P%26lt;0.05）.Theratesofpositiveorloalmucosaandoralleukoplakia（P%26lt;0.05）.CONCLUSION:BothHSP70andHSP90mayplayaroleinorallichenplanus.HSP90

3、mayberelatedouscellcarcinoma，OSCC）及癌前病變中的表達和功能的探究較少，為此，我們通過檢測HSP70及HSP90在OSCC及其癌前病變中的表達，探索HSP70，90在OSCC發(fā)生發(fā)展過程中的功能.1材料和方法1.1材料1999/2003年本院手術(shù)及活檢標本94例（患者術(shù)前均未采用化療、放療），其中正?？谇火つぃ╪ormaloralmucosa，NOM）10例，口腔扁平苔蘚（orallichenplanus，OLP）22例，口腔白斑（oralleukoplakia，OLK）20例，OSCC共42例，按照其分化程度分

4、為I級20例，II級12例，III級10例.所有標本均經(jīng)HE染色，并經(jīng)口腔病理專家確診.鼠抗人HSP70mAb（濃縮型）、鼠抗人HSP90mAb（濃縮型）均購自DAKO公司，工作濃度分別為1∶300和1∶200.SABC法試劑盒及DAB顯色液均購自DAKO公司.1.2方法常規(guī)石蠟連續(xù)切片4μm，常規(guī)脫蠟、梯度乙醇水化至水，微波修復(fù)，自然冷卻至室溫.采用SABC法免疫組織化學染色，DAB顯色3～5min，蘇木素復(fù)染5min，鹽酸乙醇分化數(shù)秒，流水返藍15min，梯度乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片.用TBS代替一抗作為空缺對照，已知陽性片作陽性

5、對照.結(jié)果在光學顯微鏡下進行觀察.HSP70陽性定位于胞質(zhì)及胞膜，HSP90陽性定位于胞質(zhì)，呈黃色或棕黃色顆粒.采用雙盲法統(tǒng)計實驗結(jié)果.隨機選取10個高倍視野進行計數(shù)，計數(shù)陽性細胞所占的百分比，根據(jù)陽性細胞的比例分為以下四個等級：%26lt;5%為陰性（-），5%～25%為弱陽性（±），26%～75%為陽性（＋），%26gt;75%為強陽性（）.統(tǒng)計學分析：采用SPSS12.0統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計，因各組指標均為等級資料，故其組間的比較采用非參數(shù)秩和檢驗Kruskal,OLK,OSCC三組間經(jīng)非參數(shù)秩和檢驗，χ2＝5.058，P＝0.08%26g

6、t;0.05，差異無統(tǒng)計學意義.將這三組合并為非OLP組后和OLP組相比，χ2=12.948，P＝0.000%26lt;0.05，有統(tǒng)計學意義，提示HSP70在OLP中表達上調(diào).OSCC各級相比，χ2＝0.006，P＝0.997%26gt;0.05，差異無統(tǒng)計學意義.2.2HSP90的表達見表1.HSP90在口腔正常黏膜中以陰性表達為主，占70%（7/10）；在OLP組中主要以陽性和弱陽性為主，占73%（16/22）.在OLK組中主要以陰性和弱陽性表達為主（圖1C），占70%（14/20）.OSCC組中則以弱陽性和陽性表達為主（圖1D），占62

7、%（26/42）.各組間經(jīng)非參數(shù)秩和檢驗Kruskal和OLK相比，χ2＝1.091，P=0.296%26gt;0.05，差異無統(tǒng)計學意義.OLP和OSCC相比，χ2＝0.747，P＝0.387%26gt;0.05，差異無統(tǒng)計學意義.將OLP和OSCC合并成一組，NOM和OLK合并成另一組后相比，χ2＝9.149,P=0.002%26lt;0.05，提示HSP90在OLP,OSCC組中表達上調(diào).OSCC各級相比，χ2＝7.066，P=0.029%26lt;0.05，以O(shè)SCCI級表達較低，提示HSP90和OSCC分化程度有關(guān).3討論生物細胞在受

8、到各種理化因素刺激后發(fā)生應(yīng)激反應(yīng)，誘導(dǎo)HSP的合成.HSP廣泛存在于原核和真核A：扁平苔蘚HSP70；B：口腔鱗癌中HSP70陽性表達；C：口腔白斑H