熱休克蛋白70,90在口腔鱗癌及癌前病變中的表達(dá)及意義論文

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1、熱休克蛋白70,90在口腔鱗癌及癌前病變中的表達(dá)及意義論文殷操,沈麗佳,謝思明,謝立群【關(guān)鍵詞】熱休克蛋白;HSP70;HSP90;口腔癌;口腔扁平苔蘚【Abstract】AIM:Todetecttheexpressionofheatshockprotein70,90(HSP70,HSP90)inoralsquamouscellcarcinoma(OSCC)andoralprecancerouslesionsandinvestigatetherolesofHSP70andHSP90.METHODS:S

2、ABCimmunohistochemicalmethodsaloralmucosa.RESULTS:TherateofthepositiveorhighexpressionofHSP70inOLParkablyhigherthanthoseofnormaloralmucosa,oralleukoplakiaandOSCC(P0.05).Theratesofpositiveorloalmucosaandoralleukoplakia(P0.05).CONCLUSION:BothHSP70andHSP90

3、mayplayaroleinorallichenplanus.HSP90mayberelatedouscellcarcinoma,OSCC)及癌前病變中的表達(dá)和作用的研究較少,為此,我們通過(guò)檢測(cè)HSP70及HSP90在OSCC及其癌前病變中的表達(dá),探討HSP70,90在OSCC發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的作用.1材料和方法1.1材料1999/2003年本院手術(shù)及活檢標(biāo)本94例(患者術(shù)前均未采用化療、放療),其中正常口腔黏膜(normaloralmucosa,NOM)10例,口腔扁平苔蘚(orallichenpla

4、nus,OLP)22例,口腔白斑(oralleukoplakia,OLK)20例,OSCC共42例,按照其分化程度分為I級(jí)20例,II級(jí)12例,III級(jí)10例.所有標(biāo)本均經(jīng)HE染色,并經(jīng)口腔病理專(zhuān)家確診.鼠抗人HSP70mAb(濃縮型)、鼠抗人HSP90mAb(濃縮型)均購(gòu)自DAKO公司,工作濃度分別為1∶300和1∶200.SABC法試劑盒及DAB顯色液均購(gòu)自DAKO公司.1.2方法常規(guī)石蠟連續(xù)切片4μm,常規(guī)脫蠟、梯度乙醇水化至水,微波修復(fù),自然冷卻至室溫.采用SABC法免疫組織化學(xué)染色,DAB顯

5、色3~5min,蘇木素復(fù)染5min,鹽酸乙醇分化數(shù)秒,流水返藍(lán)15min,梯度乙醇脫水,二甲苯透明,中性樹(shù)膠封片.用TBS代替一抗作為空白對(duì)照,已知陽(yáng)性片作陽(yáng)性對(duì)照.結(jié)果在光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行觀察.HSP70陽(yáng)性定位于胞質(zhì)及胞膜,HSP90陽(yáng)性定位于胞質(zhì),呈黃色或棕黃色顆粒.采用雙盲法統(tǒng)計(jì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果.隨機(jī)選取10個(gè)高倍視野進(jìn)行計(jì)數(shù),計(jì)數(shù)陽(yáng)性細(xì)胞所占的百分比,根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞的比例分為以下四個(gè)等級(jí):5%為陰性(-),5%~25%為弱陽(yáng)性(±),26%~75%為陽(yáng)性(+),75%為強(qiáng)陽(yáng)性().統(tǒng)計(jì)學(xué)分析:采用SPS

6、S12.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì),因各組指標(biāo)均為等級(jí)資料,故其組間的比較采用非參數(shù)秩和檢驗(yàn)Kruskal,OLK,OSCC三組間經(jīng)非參數(shù)秩和檢驗(yàn),χ2=5.058,P=0.080.05,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義.將這三組合并為非OLP組后與OLP組相比,χ2=12.948,P=0.0000.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,提示HSP70在OLP中表達(dá)上調(diào).OSCC各級(jí)相比,χ2=0.006,P=0.9970.05,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義.2.2HSP90的表達(dá)見(jiàn)表1.HSP90在口腔正常黏膜中以陰性表達(dá)為主,占70%(7/10);

7、在OLP組中主要以陽(yáng)性和弱陽(yáng)性為主,占73%(16/22).在OLK組中主要以陰性和弱陽(yáng)性表達(dá)為主(圖1C),占70%(14/20).OSCC組中則以弱陽(yáng)性和陽(yáng)性表達(dá)為主(圖1D),占62%(26/42).各組間經(jīng)非參數(shù)秩和檢驗(yàn)Kruskal與OLK相比,χ2=1.091,P=0.2960.05,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義.OLP與OSCC相比,χ2=0.747,P=0.3870.05,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義.將OLP與OSCC合并成一組,NOM與OLK合并成另一組后相比,χ2=9.149,.freelRNA在OLP

8、中表達(dá)增強(qiáng),提示HSP70在OLP的發(fā)生中起著重要的作用.HSP90家族是一類(lèi)可溶性蛋白,能特異地與多種細(xì)胞功能蛋白結(jié)合而改變其功能狀態(tài).已發(fā)現(xiàn)在其他腫瘤中HSP90與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、預(yù)后密切相關(guān)[5-6].我們的研究表明,HSP90在OLP中表達(dá)上調(diào),提示在OLP中除了HSP70外,還可通過(guò)刺激HSP90的表達(dá)來(lái)參與應(yīng)激反應(yīng),對(duì)機(jī)體起到一定的保護(hù)作用.同時(shí)我們的研究還表明HSP90在OSCC中的表達(dá)上調(diào),并且與OSCC的分化程度相關(guān),在分化較低的癌細(xì)

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