正常孕婦不同孕周血清中shlag的水平

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1、正常孕婦不同孕周血清中sHLAG的水平：侯彩英,閔保華,王珺,姚元慶【摘要】目的:探討正常妊娠婦女不同孕周血清可溶性人類白細(xì)胞抗原G(sHLAG)在妊娠過(guò)程中的作用。方法:采用ELISA法檢測(cè)20例正常孕婦不同孕周血清中的sHLAG水平。結(jié)果:血清sHLAG的水平在正常妊娠的早、中、晚孕期的均值依次為（11.96±4.27）μg/L、（11.50±4.17）μg/L、（10.72±3.40）μg/L;差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:血清sHLAG的水平在正常妊娠的整個(gè)過(guò)程中差別不大,對(duì)維持胎兒的正常發(fā)育具

2、有重要意義?！娟P(guān)鍵詞】sHLAG;正常妊娠;免疫耐受妊娠過(guò)程中,帶有父源性人類白細(xì)胞抗原（HLA）的胎兒,直接接觸富含免疫活性細(xì)胞的母體蛻膜,理應(yīng)受到母體免疫系統(tǒng)識(shí)別,產(chǎn)生以細(xì)胞免疫為主的免疫應(yīng)答而遭到母體的排斥。但事實(shí)相反,母體對(duì)胎兒形成免疫耐受,大多數(shù)胎兒在母體子宮內(nèi)安然生長(zhǎng)近10個(gè)月,直至分娩。母胎免疫耐受現(xiàn)象的維持涉及諸多因素,其中HLAG誘導(dǎo)的母胎耐受是目前關(guān)注的熱點(diǎn)。HLAG的多態(tài)性較低且呈組織選擇性分布,主要分布在不表達(dá)HLAA、B的母胎界面絨毛外滋養(yǎng)細(xì)胞上。HLAG獨(dú)特的表達(dá)方式以

3、及在原因不明的習(xí)慣性流產(chǎn)、產(chǎn)前子癇等病理妊娠個(gè)體中母胎界面組織缺乏HLAG表達(dá)或表達(dá)降低,推測(cè)HLAG可能在妊娠過(guò)程中起重要作用［1］。同時(shí),在人類輔助生殖技術(shù)中,在胚胎的培養(yǎng)液中可檢出可溶性HLAG,并推測(cè)分泌sHLAG是胚胎能夠著床的先決條件［2,3］。因此,研究HLAG基因在妊娠中的作用,對(duì)于了解母胎耐受的機(jī)制具有重要意義,對(duì)人類輔助生殖技術(shù)可能提供有益的提示。1對(duì)象和方法1.1研究對(duì)象選擇2006-10/2007-11在唐都醫(yī)院產(chǎn)科門診建卡及分娩的初產(chǎn)婦120名,隨訪其妊娠結(jié)局,建卡時(shí)孕周

4、均≤12周,從中隨機(jī)抽取正常分娩初產(chǎn)婦20例進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)研究,平均年齡為（26.3±3）歲,早、中、晚孕期平均孕周分別為（8.5±0.7）周、（18.4±0.4）周、（37.8±1.0）周,嬰兒體重平均為（3060±344）g;分娩時(shí)均實(shí)行剖宮產(chǎn),無(wú)吸煙及孕期服用大量藥物史,無(wú)孕期感染及內(nèi)科疾病、輸血、免疫治療史。既往無(wú)高血壓、心臟病、貧血、糖尿病及肝腎病史。1.2方法建卡孕婦分別于建卡時(shí)、中孕、臨產(chǎn)前及抽取肘靜脈血,分離血清,置于-80℃凍存。采用ELISA法（試劑盒購(gòu)自捷克Biovendor公司）檢測(cè)sH

5、LAG的水平,具體操作嚴(yán)格按試劑盒的說(shuō)明書進(jìn)行。本實(shí)驗(yàn)測(cè)定的為總的sHLAG水平。選用奧地利TECAN128C340酶標(biāo)儀測(cè)定吸光度（A）值,波長(zhǎng)為450nm。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析:采用Excel軟件和SPSSl3.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,結(jié)果以x±s表示,組間比較采用t檢驗(yàn),以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2結(jié)果ELISA法檢測(cè)結(jié)果表明,20例正常孕婦早、中、晚孕期血清sHLAG的水平,依次為（11.96±4.27）μg/L、（11.50±4.17）μg/L、（10.72±3.40）μg/L,3期之間比較無(wú)

6、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。3討論相對(duì)于經(jīng)典HLAⅠ類抗原,HLAG屬非經(jīng)典HLAⅠ類抗原。具有3個(gè)主要特征:①有限的分子多態(tài)性;②選擇性的組織分布,主要分布在母胎界面絨毛外細(xì)胞滋養(yǎng)層上;③可變的mRNA剪接形成不同異構(gòu)體分子,其中4種為膜結(jié)合型分子,即HLAG1、G2、G3和G4;另外3種為可溶性分子,即HLAG5、G6、G7。它的生殖免疫學(xué)功能主要表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:①抑制自然殺傷(naturalkill,NK)細(xì)胞的殺傷活性［4］。在胚胎著床期間,子宮蛻膜有大量浸潤(rùn)的免疫活性細(xì)胞,其

7、中70%～80%是NK細(xì)胞,HLAG能抑制NK細(xì)胞的殺傷活性,從而在母胎免疫耐受上起重要作用。②通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞因子的釋放來(lái)抑制NK細(xì)胞的非特異性免疫反應(yīng),進(jìn)一步抑制NK細(xì)胞的殺傷作用［5］。③抑制T細(xì)胞殺傷功能［6］。T細(xì)胞占妊娠早期子宮蛻膜淋巴細(xì)胞的20%～30%,HLAG可抑制蛻膜和外周血細(xì)胞毒性T細(xì)胞(cytotoxicTlymphocyte,CTL)的細(xì)胞殺傷作用,保護(hù)胎兒免受母體CTL細(xì)胞的殺傷。④誘導(dǎo)T細(xì)胞的凋亡［7］。目前發(fā)現(xiàn)人體外周血、臍帶血、羊水及卵細(xì)胞培養(yǎng)液中均有sHLAG存在,且存

8、在妊娠各階段,而且孕婦血清中sHLAG水平明顯高于非孕婦［8］。另有研究指出,sHLAG低表達(dá)就不能有效地誘導(dǎo)CD8T細(xì)胞凋亡,從而便可能導(dǎo)致原因不明的習(xí)慣性流產(chǎn)的發(fā)生［9］。母體的這種免疫機(jī)制十分復(fù)雜,與諸多因素有關(guān),但首先認(rèn)為母胎耐受的產(chǎn)生和維持主要取決于胚胎的滋養(yǎng)細(xì)胞表達(dá)HLAG、TLX抗原及補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白等分子。實(shí)驗(yàn)證明,可溶性的HLAG與CD8分子結(jié)合后,可誘導(dǎo)CD8+淋巴細(xì)胞合成分泌FasL,通