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1、PBS緩沖液的配方發(fā)布日期:2008-11-11熱門指數(shù):865PBS是最普遍不過(guò)的實(shí)驗(yàn)室緩沖液，但其配方各異。以下是我的總結(jié)：母液的配制：0.2MNa2HPO4：稱取71.6gNa2HPO4-12H2O，溶于1000ml水0.2MNaH2PO4：稱取31.2gNaH2PO4-2H2O，溶于1000ml水各種濃度PB(pH=7.4)的配制：先配0.2MPB(pH=7.4，100ml)：取19ml0.2mol/L的NaH2PO4，81ml0.2mol/L的Na2HPO4,即可。然后只需將0.2MPB(pH=7.4)按相應(yīng)比例適當(dāng)稀釋即可，如：0.1MPB（
2、PH=7.4）：取500ml0.2MPB，加水稀釋至1000ml即可。0.01MPB（PH=7.4）：取50ml0.2MPB，加水稀釋至1000ml即可。0.02MPB（PH=7.4）：取100ml0.2MPB，加水稀釋至1000ml即可。若需要NaCL的話，加入NaCL至0.9%（g/100ml）即可。另：其它各種另PH值的0.2MPB（100ml)配方：pH0.2MNaH2PO4（ml）0.2MNa2HPO4（ml）5.793.56.55.89285.990106.087.712.36.185156.281.518.56.377.522.56.473
3、.526.56.568.531.56.662.537.56.756.543.56.851496.945557.038627.133677.228727.323777.419ml81ml7.516847.613877.710.50.57.88.591.57.97938.05.394.7分子生物學(xué)常用溶液配制發(fā)布日期:2008-8-25熱門指數(shù):3471分子生物學(xué)常用溶液配制一、分子生物學(xué)常用貯存液的配制1．30%丙烯酰胺溶液【配制方法】將29g丙烯酰胺和1gN，N’-亞甲雙丙烯酰胺溶于總體積為60ml的水中。加熱至37℃溶解之，補(bǔ)加水至終體積為100ml。
4、用濾器（0.45μm孔徑）過(guò)濾除菌，查證該溶液的pH值應(yīng)不大于7.0，置棕色瓶中保存于室溫?！咀⒁狻勘０肪哂泻軓?qiáng)的神經(jīng)毒性并可以通過(guò)皮膚吸收，其作用具累積性。稱量丙烯酰胺和亞甲雙丙烯酰胺時(shí)應(yīng)戴手套和面具。可認(rèn)為聚丙烯酰胺無(wú)毒，但也應(yīng)謹(jǐn)慎操作，因?yàn)樗€可能會(huì)含有少量未聚合材料。一些價(jià)格較低的丙烯酰胺和雙丙烯酰胺通常含有一些金屬離子，在丙烯酰胺貯存液中加入大約0.2體積的單床混合樹脂（MB-1Mallinckrodt），攪拌過(guò)夜，然后用Whatman1號(hào)濾紙過(guò)濾以純化之。在貯存期間，丙烯酰胺和雙丙烯酰胺會(huì)緩慢轉(zhuǎn)化成丙烯酰和雙丙烯酸。2．40%丙烯酰胺【配
5、制方法】把380g丙烯酰胺（DNA測(cè)序級(jí)）和20gN，N’-亞甲雙丙烯酰胺溶于總體積為600ml的蒸餾水中。繼續(xù)按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法處理，但加熱溶解后應(yīng)以蒸餾水補(bǔ)足至終體積為1L?！咀⒁狻恳娚鲜雠渲?0%丙烯酰胺的說(shuō)明,40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列測(cè)定。3．放線菌素D溶液【配制方法】把20mg放線菌素D溶解于4ml100%乙醇中，1:10稀釋貯存液，用100%乙醇作空白對(duì)照讀取OD440值。放線菌素D（分子量為1255）純品在水溶液中的摩爾消化系數(shù)為21，900，故而1mg/ml的放線菌素D溶液在440nm處的吸光值為0.182，放線菌
6、素D的貯存液應(yīng)放在包有箔片的試管中，保存于-20℃。【注意】放線菌素D是致畸劑和致癌劑,配制該溶液時(shí)必須戴手套并在通風(fēng)櫥內(nèi)操作,而不能在開放在實(shí)驗(yàn)桌面上進(jìn)行,謹(jǐn)防吸入藥粉或讓其接觸到眼睛或皮膚。藥廠提供的作治療用途的放線菌素D制品常含有糖或鹽等添加劑。只要通過(guò)測(cè)量貯存液在440nm波長(zhǎng)處的光吸收確定放線菌素D的濃度，這類制品便可用于抑制自身引導(dǎo)作用。4．0.1mol/L腺苷三磷酸（ATP）溶液【配制方法】在0.8ml水中溶解60mgATP,用0.1mol/LNaOH調(diào)至pH值至7.0，用蒸餾水定容1ml，分裝成小份保存于-70℃5．10mol/L乙酸酰溶
7、液【配制方法】把770g乙酸酰溶解于800ml水中，加水定容至1L后過(guò)濾除菌。6．10%過(guò)硫酸銨溶液【配制方法】把1g過(guò)硫酸銨溶解于終量為10ml的水溶液中，該溶液可在4℃保存數(shù)周。7．BCIP溶液【配制方法】把0.5g的5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸二鈉鹽（BCIP）溶解于10ml100%的二甲基甲酰胺中，保存于4℃8．2×BES緩沖鹽溶液【配制方法】用總體積90ml的蒸餾水溶解1.07g鹽溶液BES[N，N-雙（2-羥乙基）-2-氨基乙磺酸]、1.6gNaCl和0.027gNa2HPO4，室溫下用HCl調(diào)節(jié)該溶液的pH值至6.96、然后加入蒸餾水定容至
8、100ml，用0.22μm濾器過(guò)濾除菌，分裝成小份，保存于-20℃。9．1mol
