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1、標(biāo)準(zhǔn)實(shí)用PBS緩沖液的配方發(fā)布日期:2008-11-11熱門指數(shù):865PBS是最普遍不過的實(shí)驗(yàn)室緩沖液,但其配方各異。以下是我的總結(jié):母液的配制:0.2MNa2HPO4:稱取71.6gNa2HPO4-12H2O,溶于1000ml水0.2MNaH2PO4:稱取31.2gNaH2PO4-2H2O,溶于1000ml水各種濃度PB(pH=7.4)的配制:先配0.2MPB(pH=7.4,100ml):取19ml0.2mol/L的NaH2PO4,81ml0.2mol/L的Na2HPO4,即可。然后只需將0.2MPB(pH=7.4)按相應(yīng)比例適當(dāng)稀釋即可,如:0.1MPB(PH=7
2、.4):取500ml0.2MPB,加水稀釋至1000ml即可。0.01MPB(PH=7.4):取50ml0.2MPB,加水稀釋至1000ml即可。0.02MPB(PH=7.4):取100ml0.2MPB,加水稀釋至1000ml即可。若需要NaCL的話,加入NaCL至0.9%(g/100ml)即可。另:其它各種另PH值的0.2MPB(100ml)配方:pH0.2MNaH2PO4(ml)0.2MNa2HPO4(ml)5.793.56.55.89285.990106.087.712.36.185156.281.518.56.377.522.56.473.526.56.568.
3、531.56.662.537.56.756.543.56.851496.945557.038627.133677.228727.323777.419ml81ml7.516847.613877.710.50.57.88.591.57.97938.05.394.7文案大全標(biāo)準(zhǔn)實(shí)用分子生物學(xué)常用溶液配制發(fā)布日期:2008-8-25熱門指數(shù):3471分子生物學(xué)常用溶液配制一、分子生物學(xué)常用貯存液的配制1.30%丙烯酰胺溶液【配制方法】將29g丙烯酰胺和1gN,N’-亞甲雙丙烯酰胺溶于總體積為60ml的水中。加熱至37℃溶解之,補(bǔ)加水至終體積為100ml。用濾器(0.45μm孔徑
4、)過濾除菌,查證該溶液的pH值應(yīng)不大于7.0,置棕色瓶中保存于室溫?!咀⒁狻勘0肪哂泻軓?qiáng)的神經(jīng)毒性并可以通過皮膚吸收,其作用具累積性。稱量丙烯酰胺和亞甲雙丙烯酰胺時(shí)應(yīng)戴手套和面具??烧J(rèn)為聚丙烯酰胺無毒,但也應(yīng)謹(jǐn)慎操作,因?yàn)樗€可能會含有少量未聚合材料。一些價(jià)格較低的丙烯酰胺和雙丙烯酰胺通常含有一些金屬離子,在丙烯酰胺貯存液中加入大約0.2體積的單床混合樹脂(MB-1Mallinckrodt),攪拌過夜,然后用Whatman1號濾紙過濾以純化之。在貯存期間,丙烯酰胺和雙丙烯酰胺會緩慢轉(zhuǎn)化成丙烯酰和雙丙烯酸。2.40%丙烯酰胺【配制方法】把380g丙烯酰胺(DNA測序級
5、)和20gN,N’-亞甲雙丙烯酰胺溶于總體積為600ml的蒸餾水中。繼續(xù)按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法處理,但加熱溶解后應(yīng)以蒸餾水補(bǔ)足至終體積為1L?!咀⒁狻恳娚鲜雠渲?0%丙烯酰胺的說明,40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列測定。3.放線菌素D溶液【配制方法】把20mg放線菌素D溶解于4ml100%乙醇中,1:10稀釋貯存液,用100%乙醇作空白對照讀取OD440值。放線菌素D(分子量為1255)純品在水溶液中的摩爾消化系數(shù)為21,900,故而1mg/ml的放線菌素D溶液在440nm處的吸光值為0.182,放線菌素D的貯存液應(yīng)放在包有箔片的試管中,保存于-20℃?!咀?/p>
6、意】放線菌素D是致畸劑和致癌劑,配制該溶液時(shí)必須戴手套并在通風(fēng)櫥內(nèi)操作,而不能在開放在實(shí)驗(yàn)桌面上進(jìn)行,謹(jǐn)防吸入藥粉或讓其接觸到眼睛或皮膚。藥廠提供的作治療用途的放線菌素D制品常含有糖或鹽等添加劑。只要通過測量貯存液在440nm波長處的光吸收確定放線菌素D的濃度,這類制品便可用于抑制自身引導(dǎo)作用。4.0.1mol/L腺苷三磷酸(ATP)溶液【配制方法】在0.8ml水中溶解60mgATP,用0.1mol/LNaOH調(diào)至pH值至7.0,用蒸餾水定容1ml,分裝成小份保存于-70℃5.10mol/L乙酸酰溶液【配制方法】把770g乙酸酰溶解于800ml水中,加水定容至1L后過濾
7、除菌。6.10%過硫酸銨溶液【配制方法】把1g過硫酸銨溶解于終量為10ml的水溶液中,該溶液可在4℃保存數(shù)周。7.BCIP溶液【配制方法】把0.5g的5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸二鈉鹽(BCIP)溶解于10ml100%的二甲基甲酰胺中,保存于4℃8.2×BES緩沖鹽溶液文案大全標(biāo)準(zhǔn)實(shí)用【配制方法】用總體積90ml的蒸餾水溶解1.07g鹽溶液BES[N,N-雙(2-羥乙基)-2-氨基乙磺酸]、1.6gNaCl和0.027gNa2HPO4,室溫下用HCl調(diào)節(jié)該溶液的pH值至6.96、然后加入蒸餾水定容至100ml,用0.22μm濾器過濾除菌,