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1、野黃刺玫果粗總黃酮的提取工藝研究史萌史志輝（陜丙輝勝新興農(nóng)業(yè)科技發(fā)展有限公司712000）【摘要】目的：探討野黃刺玫果粗總黃酮最佳提取工藝。方法：以野黃刺玫果為原料，以總黃酮含量和提取率為評價指標(biāo)，乙醇濃度，料液比，提取時間為考察因素，進(jìn)行三因素三水平L9（34＞正交試驗、方差分析和驗證實驗。在上述優(yōu)選出最佳提取條件不變的情況下，乂對提取次數(shù)進(jìn)行了優(yōu)選。結(jié)果：野黃刺玫果粗總黃酮的最佳提取工藝條件為：用12倍量75%乙醇，加熱回流提取三次，每次2h?！娟P(guān)鍵詞】野黃刺玫果總黃酮正交試驗方差分析【中圖分類號】R96【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A【文章編號】1672-508
2、5（2014）15-0031-02野黃刺玫果為薔薇科（Rosaceae）截薇屬（Rosa）植物野黃刺玫（RosaxanthinaLindl）的干燥成熟果實。9月份果實成熟時釆收，除去雜質(zhì)，干燥。木品為野生落葉灌木，廣泛分布于我國北方的山區(qū)和丘陵地帶［1］［2］。野黃刺玫的花、果、葉和根皮均可入藥，味酸甘性平，具有健脾養(yǎng)血，理氣活血之功效，用于消化不良，腹痛脹氣、胃痛、氣滯血瘀的胸痹，對冠心病心絞痛及高脂血癥有奇效，并能治療婦女月經(jīng)不調(diào)［3］。民間廣泛有食用野黃刺玫果和用其釀酒的習(xí)慣?，F(xiàn)代研究表明，野黃刺玫果中含有豐宮的黃酮。皂苷、植物SOD,多種維生素
3、及大量有益的微量元素。野黃刺玫果具有抗氧化作用［4］,抗袞老和預(yù)防心血管病的作用及降壓降脂作用［5］［6］。毒理學(xué)實驗研究表明，野黃刺玫果屬于無毒級，可安全使用的藥食兩用資源［7］。由于總黃酮為野刺玫果的降壓，降脂及治療冠心病心絞痛的有效成份，木實驗研宄黃刺玫果粗總黃酮提取的最佳工藝條件，用紫外一可見分光光度法測定野黃刺玫果總黃酮的含量，為野黃玫果最佳粗總黃酮提取工藝的篩選提供了理論根據(jù)。1、材料與檢測方法1.1材料與試劑野黃刺玫果采自陜西旬邑縣石門山區(qū)，9月份果實成熟吋采摘，除去雜質(zhì)，干燥。蘆丁對照品由中國食品藥品檢定研究院提供，供含量測定用，試劑皆
4、為分析純。1.2儀器與設(shè)備UV?765型紫外一可見分光光度計上海精密科學(xué)儀器冇限公司；BS210S型電子天平，北京賽多利斯天平有限公司；RE-52A型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器，上海亞榮生化儀器廠；III型高速中藥粉碎機，浙江省瑞安永西制藥機械有限公司。1.3野黃刺玫果總黃酮的測定1.3.1對照品溶液的制備取蘆丁對照品50mg,精密稱定，置25ml量瓶中，加甲醇適量，置水浴上微熱使溶解，放冷，加甲醇至刻度，搖勻。精密量取10ml,置100ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，既得（每lml中含蘆丁0.2mg）。1.3.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密量取對照品溶液lml、2ml、3ml、
5、4ml、5ml與6ml、分別置25ml量瓶中，各加水至6.0ml,加5%亞硝酸鈉溶液lml，混勻，放置6分鐘，加10%硝酸鋁溶液lml,搖勻，放置6分鐘，加氫氧化鈉試液10ml,再加水至刻度，搖勻，放置15分鐘，以相應(yīng)的試劑為空白，照紫外一可見分光度法（中國藥典2010年版一部附錄VA），在500nm波長處測定吸光度，以吸光度為縱座標(biāo)，濃度為橫座標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。1.3.3測定法取野黃刺玫果提取物干燥細(xì)粉約lg，精密稱定，置索氏提取器中，加乙醚適量，加熱冋流至提取液無色，放冷，棄去乙醚液。再加甲醇90ml,加熱冋流至提取液無色，轉(zhuǎn)移至100ml量瓶中，
6、用甲醇少量洗滌容器，洗液并入同一量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻。精密量取50ml,置100ml量瓶中，加水至刻度，搖勻。精密量取5ml,置25ml量瓶中。照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項下的方法，自“加水至6.0ml”起，依法測定吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中含總黃酮以蘆丁（C27H30O16）計的重量（？g）,計算，即得。2、野黃刺玫果加熱冋流提取工藝的考察2.1加熱冋流提取正交試驗固定加熱冋流提取三次的條件下，以乙醇濃度，每次加乙醇量為所提野黃刺玫果粗粉的倍數(shù)及提取時間為考察因素，進(jìn)行三因素三水平L9（34）正交試驗，以總黃酮百分含量和提取率（％）為評價指標(biāo)（以
7、下皆同），篩選最佳冋流提取條件?？傸S酮百分含量和提取率的權(quán)重系數(shù)分別為0.5、0.5,并以綜合評分作為提取效果的衡量指標(biāo)。試驗結(jié)果見表1、表2。表1因素水平表注：加熱冋流提取兩個評價指標(biāo)，采用綜合評分法進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，總黃酮含量和提取率的權(quán)重系數(shù)分別為0.5、0.5。總黃酮含量評分=總黃酮含量/最人總黃酮含量×0.5×100提取率評分=提取率/最大提取率×0.5×100綜合評分=總黃酮含量評分+提取率評分從表2極差R值大小顯示，各因素對提取效果影響大小順序為A〉B〉C,再從各因素水平來看（K值分析），因素A
8、為K2〉K3〉K1,因素B為K3〉K2〉K1，因素C為K3〉K2〉K1。從以上直觀分析，最佳加
