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1、地骨皮總黃酮提取工藝研究馬學琴，高曉娟，楊凱，付雪艷【摘要】 目的探索從地骨皮中提取總黃酮的最佳工藝。方法以總黃酮含量為指標，應用正交實驗，優(yōu)化地骨皮總黃酮的提取工藝。結(jié)果總黃酮提取最佳工藝：75%乙醇，料液比1∶10，回流2h，提取2次。結(jié)論該工藝簡單易行，是提取地骨皮總黃酮物質(zhì)的有效途徑?！娟P鍵詞】地骨皮總黃酮提取工藝 Abstract：ObjectiveTostudyandoptimizetheextractionprocedureofthetotalflavonoidsfromLyciumbarbarumL.MethodsTheorthogonaldesignbarba
2、rumL.asindex.ResultsTheoptimizedextractionprocedurees.ConclusionTheprocedureissimpleandfeasible,andcanalsoprovideimportanttheoreticalbasisfortheexploitationofLyciumbarbarumL.resources. KeybarbarumL.;Totalflavonoids;Extractiontechnology 地骨皮是茄科植物枸杞LyciumchinenseMill或?qū)幭蔫坭絃yciumbarbarumL.的干燥根皮，為
3、常用中藥，具有主“五內(nèi)邪氣，熱中，消渴，周痹”的作用?，F(xiàn)代藥理也表明其有降血壓、降血糖、調(diào)血脂、解熱、抗菌及抗病毒等活性〔1〕，藥用價值非常明顯。因此，測定地骨皮中總黃酮的含量具有重要的意義。本文就總黃酮的提取工藝進行優(yōu)化。 1儀器與試藥 1.1儀器島津UV-2550紫外分光光度儀(日本),CQ-2200超聲波清洗器(上海新超超聲波儀器有限公司)?！ ?.2試藥蘆丁(中國藥品生物制品檢定所),所用試劑均為分析純。 2方法與結(jié)果 2.1對照品溶液的制備精密稱取蘆丁對照品(100℃干燥至恒重)20.43mg,置100ml量瓶中，加30%乙醇溶解并定容得濃度為0.2043mg/m
4、l對照品溶液?！ ?.2測定波長的選擇依據(jù)《中國藥典》方法〔2〕，取對照品溶液適量，加入1ml5%亞硝酸鈉溶液和1ml10%硝酸鋁溶液，放置10min后加入1ml10%氫氧化鈉溶液，空白試液為不加氫氧化鈉溶液的對照品溶液，進行全波長掃描，結(jié)果表明對照品溶液在500nm有最大吸收，故選500nm為測定波長?！ ?.3線性范圍考察精密量取對照品溶液各1，2，3，4，5ml置25ml容量瓶中，再依次加入1ml5%亞硝酸鈉溶液和1ml10%硝酸鋁溶液，放置10min后加入1ml10%氫氧化鈉溶液，以相應試劑為空白測定500nm各溶液的吸光度，以吸光度對濃度進行線性回歸，得到回歸方程A=14
5、.378C+0.0083，線性范圍：8.17～49.03μg/ml，r=0.9998?！ ?.4藥材的預處理和供試品的制備地骨皮藥材經(jīng)粉碎、過60目篩、粉末經(jīng)恒溫(60℃)干燥24h后，精密稱取約10g，依據(jù)正交實驗所得浸膏精密稱取約0.05g，60%乙醇50ml使溶解，精密量取25ml置50ml容量瓶中，加水稀釋至刻度成貯備液。精密量取貯備液3ml，置25ml量瓶中，加30%乙醇至6ml，依次加入1ml5%亞硝酸鈉溶液和1ml10%硝酸鋁溶液，放置10min后加入1ml10%氫氧化鈉溶液，加30%乙醇至刻度，以相應試劑為空白，在λ=500nm測定吸收光度。 2.5地骨皮總黃酮提
6、取工藝研究 2.5.1回流法和提取溶劑的考察分別用60%，75%，100%的甲醇和60%，75%，100%乙醇，料液比1∶10對地骨皮進行提取，熱回流2次，2h/次，以總黃酮含量為指標進行考察，從而確定正交實驗所用溶劑。結(jié)果見表1。表1回流法和提取溶劑與含量的關系（略） 表1結(jié)果表明，同一濃度乙醇較甲醇提取率高，并且60%，75%乙醇提取率相當，因此，正交實驗中選取乙醇濃度為60%，75%，90%作為考察的3個水平?！ ?.5.2超聲法和提取溶劑的考察分別用60%，75%，100%的甲醇和60%，75%，100%乙醇，料液比1∶10對地骨皮進行提取，提取2次，0.5h/次，以總
7、黃酮含量為指標進行考察。結(jié)果見表2。表2超聲法和提取溶劑與含量關系（略） 表2結(jié)果表明，溶劑對總黃酮提取率的影響與回流法一致，但超聲法的提取率明顯低于回流。因此，正交實驗中采用回流法。 2.5.3正交實驗在對溶劑和提取方法進行考察后，根據(jù)工藝要求，選定乙醇濃度、料液比、提取次數(shù)、提取時間作為考察的4個因素，每個因素選擇3個水平，編制因素水平表，（見表3）。采用L9(34)正交表進行實驗，以地骨皮總黃酮含量為考察指標，結(jié)果見表4。對表4結(jié)果進行統(tǒng)計學處理，得方差分析
