大鼠頸交感神經(jīng)激惹模型制作

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1、大鼠頸交感神經(jīng)激惹模型制作[]目的探討建立一種便捷實用的大鼠頸交感神經(jīng)激惹模型的制作及評價方法，以適應(yīng)進(jìn)一步對交感神經(jīng)激惹的研究。方法選用250g的SD大鼠24只，結(jié)扎右側(cè)頸交感神經(jīng)的方法制作大鼠頸交感神經(jīng)激惹模型，于術(shù)后6周對實驗動物進(jìn)行Bederson神經(jīng)功能評分、前肢放置試驗。結(jié)果術(shù)后6周時Bederson神經(jīng)功能評分實驗組評分高于對照組(P＜0.01)；前肢放置試驗組實驗側(cè)得分均低于對照組(P＜0.01)。結(jié)論結(jié)扎右側(cè)頸交感神經(jīng)的方法制作大鼠頸交感神經(jīng)激惹模型穩(wěn)定、可靠，具有進(jìn)一步的推廣意義，并可用于頸交感神經(jīng)的相關(guān)實驗研究。　　[關(guān)鍵詞]交感神經(jīng)；動物模型　　

2、[]R322.8[]B[]1005-0515（2012）-01-052-01　　　　目前臨床上由頸交感神經(jīng)激惹引起的疾病患者，其癥狀較為復(fù)雜、主觀性強(qiáng)，又不具有特異性，因此診斷比較困難，易漏診、誤診。而就交感神經(jīng)長期激惹對周圍神經(jīng)功能改變情況的研究很少，為此，我們設(shè)計了應(yīng)用結(jié)扎大鼠頸交感神經(jīng)的方法制作交感神經(jīng)激惹模型，觀察其神經(jīng)行為學(xué)改變，希望能做出穩(wěn)定可靠的動物模型，也為下一步的干預(yù)實驗奠定基礎(chǔ)。　　1材料與方法　　1.1實驗動物健康成年SD大鼠24只,體重250g，隨機(jī)分為兩組：激惹組(n=12)成年SD大鼠麻醉條件下行右側(cè)頸交感神經(jīng)頸中節(jié)部分結(jié)扎；對照組(n=12

3、)成年SD大鼠麻醉條件下暴露右側(cè)頸交感神經(jīng)頸中節(jié)后縫合。最終全部大鼠成活?！　?.2手術(shù)方法實驗組：10%水合氯醛腹腔注射麻醉，用量0.3ml/100g大鼠體重，備皮，絡(luò)合碘消毒頸胸部皮膚，仰臥位固定。按沙軻等的方法，手術(shù)顯微鏡下取頸部前正中切口，顯露大鼠右側(cè)頸中交感神經(jīng)節(jié)。結(jié)扎右側(cè)的頸中節(jié)，縫合頸部傷口。對照組僅顯露大鼠右側(cè)頸中交感神經(jīng)節(jié)，縫合頸部傷口?！　∪渴中g(shù)操作過程不超過10分鐘，出血量多者棄之不用，手術(shù)及麻醉復(fù)蘇過程中保持局部環(huán)境溫度35-37℃。　　1.3模型評價　　1.3.1Bederson神經(jīng)功能評分0分：無神經(jīng)功能缺損；1分：前肢出現(xiàn)任何屈曲成分(即

4、提尾懸空實驗陽性)，不伴其他不正常；2分：側(cè)推抵抗力下降(即側(cè)向推力試驗陽性)，伴前肢屈曲，無轉(zhuǎn)圈行為；3分：同2級行為，伴自發(fā)性旋轉(zhuǎn)(自由活動時向癱瘓側(cè)劃圈)?！　?.3.2前肢放置試驗大鼠每側(cè)受測10次，前肢觸及桌面角邊緣次數(shù)為該側(cè)得分。注意：抓握大鼠要輕柔，前肢自由懸垂，試驗前輕輕上下活動大鼠，盡量讓其放松，如大鼠掙扎，肌肉緊張或肢體放在試驗者手上不計在內(nèi)?！　?.4統(tǒng)計學(xué)分析對實驗結(jié)果采用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，采用Mann-WhitneyU秩和檢驗，以P＜0.05為有差異。　　2結(jié)果　　2.1Bederson神經(jīng)功能評分經(jīng)過檢測，術(shù)后6周實驗組有9只

5、大鼠Bederson神經(jīng)功能評分為1分，另外3只為0分，而對照組12只大鼠均為0分，經(jīng)過統(tǒng)計學(xué)分析兩組數(shù)據(jù)比較有顯著差異，P＜0.01，見表1?！　”?術(shù)后6周兩組大鼠Bederson神經(jīng)功能評分比較(n=24)　　2.2前肢放置試驗經(jīng)過檢測，術(shù)后6周前肢放置試驗實驗組左側(cè)評分均為10分，實驗組右側(cè)評分情況為5只7分、4只8分，3只9分，對照組左右側(cè)評分均為10分，兩組左側(cè)前肢放置試驗評分比較無明顯差異，P>0.05，兩組內(nèi)雙側(cè)對比也沒有差異，P＞0.05，而兩組右側(cè)對比有明顯差異，z＝-4.48，P＜0.01。　　3討論現(xiàn)有的研究交感神經(jīng)的動物模型大多使用大動物，如貓

6、、兔、狗等，但這些動物價格貴，飼養(yǎng)要求高。而大鼠因為其頸交感神經(jīng)干在解剖結(jié)構(gòu)和功能上與人類極為相似，是理想的實驗動物。并且廣泛，適于大量制作模型?！　☆i肩痛病人大多是慢性疾病，病程相對較長。本實驗選擇在大鼠術(shù)后6周做模型的評價，相當(dāng)于在人類身上有大約2年的病程。此時即保證了傷口的愈合，同時由于交感神經(jīng)激惹產(chǎn)生的一系列癥狀和體征也能夠充分的體現(xiàn)出來?！　∥覀冇每p扎的方法對交感神經(jīng)進(jìn)行部分結(jié)扎，結(jié)扎使其表面的微血管阻斷，避免完全阻斷交感神經(jīng)，并保證線結(jié)不脫落。而隨著時間的推移，由于神經(jīng)表面壓迫持續(xù)不緩解，局部將出現(xiàn)充血、水腫，進(jìn)而對交感神經(jīng)本身造成機(jī)械壓迫的刺激。頸交感鏈位

7、于頸椎橫突前方，周圍并無堅韌的組織，而是呈曲折走行，較為松弛，有一定的活動度。由于其緊貼頸椎?！　⌒袨槭菣C(jī)體功能的重要表現(xiàn)，對機(jī)體行為進(jìn)行評估是神經(jīng)科學(xué)研究領(lǐng)域的重要組成部分之一。行為學(xué)指標(biāo)用于對實驗動物的運(yùn)動功能、神經(jīng)功能和精神狀態(tài)的評估，具有全面反映實驗動物整體狀態(tài)的作用。因此，本實驗選取國內(nèi)外較為公認(rèn)的，相對客觀的神經(jīng)行為學(xué)檢測方法，包括Bederson神經(jīng)功能評分、前肢放置試驗、作為模型的評價標(biāo)準(zhǔn)，以了解實驗鼠損傷后在姿勢改變、感覺的靈敏度及動作協(xié)調(diào)性等方面的改變。以期給出一個相對客觀、可以量化的評價方法。在正式測試前的訓(xùn)練非常重