超聲微波協(xié)同萃取法提取杜梨果實多糖

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1、超聲微波協(xié)同萃取法提取杜梨果實多糖【關(guān)鍵詞】杜梨果實多糖超聲微波協(xié)同萃取含量測定　　Abstract：ObjectiveToextractthepolysaccharidefromthefruitsofPyrusbetulaefoliaBunge，andtodetermineitscontent.MethodsUltrasonic-microployedtoextractthepolysaccharideandanthrone-sulphuricacidcolorimetryineitscontent.Results

2、Thereexistedremarkablydifferencesbetethods;ultrasonic-microalmethod.Thepolysaccharidecontentsofthetethodsl-1forglucose.Theaveragerecoveryrates100.5%(RSD1.59%，n=5).ConclusionTheultrasonic-microaytakethefirstchoicemethod.Themethodofanthronesulphuricacidcolorimetr

3、yfordeterminationofthepolysaccharidecontentisstableandaccurate.　　Keyicroination　　杜梨PyrusbetulaefoliaBunge屬薔薇科Rosaceae梨屬（PyrusL.）喬木，在微酸性和堿性土壤中生長良好，尤其能耐鹽堿，在瘠薄和干燥土壤中也能生長。其種子發(fā)芽率高，能抗病蟲害，是防護林及沙荒地造林的珍貴樹種。杜梨藥用稱棠梨，主治功用為斂肺澀腸、止咳止痢。常用于治療久咳、久瀉、久痢等［1］?！侗静菥V目》記載棠梨（即杜梨）“味酸、甘、澀、寒

4、；無毒。燒熟食用，可治泄瀉痢疾［2］”。根據(jù)文獻檢索，目前杜梨主要作為砧木、園林樹種以及重要的木材廣泛分布在我國的北部、東北部和中部各?。▍^(qū)），以黃河流域分布較多［1］?！　￡P(guān)于杜梨的研究主要集中在種子萌發(fā)與幼苗生長、幼苗根系生長狀況、作為砧木嫁接梨樹等方面的研究，對于杜梨果實多糖的提取及含量測定方面的研究未見相關(guān)報道。本實驗采用超聲-微波協(xié)同萃取和常規(guī)水浴提取杜梨果實多糖，并用蒽酮-硫酸比色法測定多糖的含量，為杜梨資源的進一步開發(fā)利用提供理論依據(jù)?！　?器材　　1.1實驗材料實驗用杜梨于200511采自新疆塔里木盆

5、地，經(jīng)鑒定為薔薇科植物杜梨PyrusbetulaefoliaBunge的果實，自然風(fēng)干，去除種子及果柄，粉碎后過40目篩備用?！　?.2儀器與試藥SartoriusBS210S電子天平（北京塞多利斯天平有限公司），T6紫外可見分光光度計（北京普析通用有限公司），DZF6021型真空干燥箱（上海精宏實驗儀器設(shè)備有限公司），CHz，溫度80℃。提取兩次，所得提取液，一部分作為供試樣品，用于含量測定，其余照2.1.1項下方法操作，得精制杜梨果實多糖?！　?.2多糖含量的測定　　2.2.1蒽酮-硫酸溶液的配制精密稱取0.3

6、007g蒽酮，緩慢加入濃硫酸完全溶解后轉(zhuǎn)移至100ml棕色容量瓶中定容，得3.007mg·ml-1蒽酮硫酸溶液，現(xiàn)配現(xiàn)用。　　2.2.2最大吸收波長的選擇精密吸取一定濃度的樣品溶液1ml加入具塞試管，加入4.00ml蒽酮硫酸溶液，搖勻后迅速浸于冰水浴中冷卻，后浸于沸水浴中，蓋上塞，自水浴重新煮沸起，準確煮沸7min后立即取出，用自來水冷卻10min后于520～720nm波長范圍內(nèi)測定吸光度［3］，確定了其最大吸收波長為620nm?！　?.2.3標準曲線的制備精密稱取105℃干燥至恒重的葡萄糖對照品100.6mg，置

7、100ml容量瓶中，加蒸餾水溶解，定容，得1.006mg·ml-1葡萄糖標準溶液。分別移取2.50，5.00，7.50，10.00ml的標準溶液置于100ml容量瓶中定容。量取1ml系列標準溶液于具塞試管中，以1ml蒸餾水作空白，分別加入4ml蒽酮硫酸溶液，立即搖勻，置于冰水中，冷卻后一起置于沸水，蓋上塞，自再次沸騰加熱7min，之后在流水放置10min冷至室溫后，于620nm處測定吸光度值［4］，以葡萄糖濃度（C）對其吸光度（A）作回歸處理，得回歸方程：A=0.006C+0.0054，r=0.9996（n=4）。葡

8、萄糖濃度在25.15～100.6μg·ml-1范圍內(nèi)與吸光度呈良好的線性關(guān)系?！　?.2.4顯色時間的考察取1.006mg·ml-1葡萄糖標準溶液及樣品溶液按標準曲線制備項下的方法測定其吸光度，每隔20min測定1次，結(jié)果表明，標準溶液及樣品溶液顯色時間一致，且在2h內(nèi)穩(wěn)定?！　?.2.5換算因子的測定精密稱取干燥恒重的杜梨果實多